Sonikasiyadan istifadə edərək tərs fazalı buxarlanma metodu ilə lipozomlar
Liposomlar biouyğunluğuna və həm hidrofilik, həm də hidrofobik dərmanları əhatə etmə qabiliyyətinə görə dərmanların çatdırılmasında istifadə edilən çox yönlü nanodaşıyıcılardır. Əks fazalı buxarlanma üsulu (həmçinin emulsifikasiya metodu və ya həlledici-buxarlanma üsulu kimi tanınır) yüksək enkapsulyasiya səmərəliliyi təklif edən liposomların hazırlanması üçün görkəmli texnikadır. Bu məqalə, prob tipli sonikasiya ilə gücləndirilmiş tərs fazalı buxarlanma üsulu ilə liposomların hazırlanmasına diqqət yetirir, dərman çatdırılma sistemlərində prosedur addımlarını, faydalarını və potensial tətbiqlərini vurğulayır.
Liposomlar bir və ya daha çox lipid qatından ibarət olan, hidrofilik və hidrofobik birləşmələri əhatə edə bilən vezikulyar strukturlardır. Onların unikal quruluşu onları məqsədyönlü dərman çatdırılması üçün ideal edir. Əks fazalı buxarlanma üsulu (aka emulsiya və ya həlledici-buxarlanma üsulu) lipozomların hazırlanması üçün yaxşı qurulmuş bir texnikadır. Aşağıdakı paraqraflarda biz sizi emulsifikasiyanı, inkapsulyasiyanın effektivliyini və liposom ölçüsünü azaltmağı yaxşılaşdırdığı bilinən zond tipli sonikasiyadan istifadə edərək tərs fazalı buxarlanma metodunun üstünlükləri ilə tanış edirik.
Zond tipli sonikator UP400St lipozomların hazırlanması üçün
Əks Faza Buxarlanma Metodu ilə Liposom Hazırlanmasının Metodologiyası
Sonikasiyadan istifadə edərək tərs buxarlanma üsulu ilə lipozomların əmələ gəlməsi lipidlərin xloroform və metanolun (2:1 v/v) üzvi həlledici qarışığında həll edilməsini nəzərdə tutur ki, bu da ters çevrilmiş misellərin əmələ gəlməsinə kömək edir. Sonra bu qarışığa sulu tampon əlavə edilir. Birləşdirilmiş məhlul, məsələn, UP400ST kimi bir zond tipli sonikatordan istifadə edərək, yağda su mikroemulsiyasını yaratmaq üçün sonikləşdirilir. Üzvi həlledici daha sonra fırlanan buxarlandırıcıdan istifadə edərək buxarlanır, nəticədə lipozomlar əmələ gətirmək üçün çökən özlü gel əldə edilir. Mikroemulsiya qabarcıqlarının böyük sulu nüvəsi hidrofilik molekulların tutulmasına kömək edir, bu da idarə olunan buraxılış və yaxşı nüfuz profili nümayiş etdirən liposomal gellərə gətirib çıxarır. Nəhayət, sonikatordan istifadə edərək liposomlar vahid ölçüyə qədər kiçildilir.
Sonication istifadə edərək tərs buxarlanma metodu ilə Liposom formalaşması
Protokol? Addım-addım Təlimatlar:
- Lipidləri çəkin və həll edin:
Cəmi 40 mq L-α-fosfatidilkolini və xolesterini 4:1 və ya 7:3 kütlə nisbətində dəqiqliklə çəkin.
Çəkilmiş lipidləri 10 mL xloroform/metanol qarışığında (4:1 v/v) dairəvi dibi olan kolbada həll edin. - Forma Lipid Film:
Dəyirmi dibli kolbanı fırlanan buxarlandırıcıya əlavə edin.
Kolbanın divarlarında nazik lipid təbəqəsi əmələ gələnə qədər kolbanı 8 xg-də 40°C-də vakuum şəraitində fırladın. - Solvent dumanını çıxarın:
Kolbanı azot qazı ilə yuyaraq həlledici qarışığın qalan buxarlarını boşaltın. - Lipid filmini yenidən həll edin:
Ters fazalı veziküllər yaratmaq üçün lipid filmini 10 mL dietil efirdə yenidən həll edin. - Sulu faza hazırlayın:
Kapsülləmə üçün aktiv tərkib hissəsi olan 5 mL PBS tamponunu (0,1 M, pH 7,4) və 20 mq Tween 80-ni üzvi faza ilə (həll edilmiş lipidlərlə dietil efir) qarışdırın. - Emulsiyanı sonikləşdirin:
Tərkibsiz emulsiyanı buz banyosuna qoyun.
26 kHz və 50% nəbz rejimində (0,5 dövr = 30 san ON? 30 saniyə OFF) və 1 dəqiqə üçün 50% amplituda bir zond tipli sonikator UP200Ht istifadə edərək emulsiyanı sonikasiya edin. - Gel əmələ gətirmək üçün buxarlayın:
Sonicated emulsiyanı fırlanan buxarlandırıcıya qaytarın.
Bir gel əldə olunana qədər atmosfer təzyiqi altında 40 ° C-də buxarlanır. - Liposomlar əmələ gətirir:
Gelin daha da buxarlanması, lipozomların meydana gəlməsini göstərən yarı şəffaf bir maye halına salın. - Son Liposom Süspansiyonu:
Liposom suspenziyasına başqa 5 mL PBS buferi (0,1 M, pH 7,4) əlavə edin.
Qarışığı yumşaq bir şəkildə burulğan edin.
Azot qazından istifadə edərək dietil efirin qalan tüstülərini evakuasiya edin. - Yaddaş:
Son lipozom suspenziyasını tələb olunana qədər soyuducuda 4°C-də saxlayın.
Bu təlimatlar ultrasəs homogenləşdirmə ilə tərs fazalı buxarlanma metodundan istifadə edərək, yüksək daxili sulu yüklənməni və aktiv tərkib hissəsinin səmərəli inkapsulyasiyasını təmin edən liposomların hazırlanması üçün addım-addım prosesi təsvir edir.
Əks fazalı buxarlanma metodu, xüsusən də sonda tipli sonikasiyadan istifadə etməklə, liposomların hazırlanması üçün, xüsusən də yüksək daxili sulu yüklənməni hədəflədikdə geniş istifadə olunan bir texnikadır. Bu üsul liposomların içərisinə daha çox miqdarda sulu faza daxil etmək qabiliyyətinə görə ənənəvi nazik təbəqənin nəmləndirilməsi metodundan üstündür.
Sənaye sonikatoru UIP2000hdT geniş miqyaslı lipozom istehsalı üçün
Liposomların formalaşması üçün prob tipli sonikasiyanın üstünlükləri
- Təkmilləşdirilmiş Homojenlik: Prob tipli sonikasiya ardıcıl enerji girişini təmin edir, nəticədə lipozomların daha vahid ölçüdə paylanması təmin edilir.
- Təkmilləşdirilmiş Encapsulation: Sonikasiya zamanı mexaniki qüvvələr, xüsusən də hidrofilik birləşmələr üçün dərman kapsulyasiyasını artırır.
- Ölçeklenebilirlik: Metodlar asanlıqla miqyaslana bilir, bu da onları geniş miqyaslı lipozom istehsalı üçün uyğun edir.
Dərman çatdırılmasında lipozomların tətbiqi
Prob tipli sonikasiya ilə emulsifikasiya və həlledici-buxarlanma üsulları ilə hazırlanan liposomlar müxtəlif dərmanların çatdırılması üçün uyğundur, o cümlədən:
- Məqsədli Dərman Çatdırılması: Liposomların xüsusi liqandlarla funksionallaşdırılması müəyyən toxumalara və ya hüceyrələrə məqsədyönlü çatdırılmağa imkan verir.
- Nəzarət olunan buraxılış: Lipid ikiqatlı quruluşu, terapevtik effektivliyi artıraraq, nəzarət edilən dərmanların buraxılmasına imkan verir.
- Çox yönlülük: Bu üsullar kiçik molekullardan tutmuş zülallar və nuklein turşuları kimi daha böyük biomolekullara qədər geniş spektrli terapevtik agentləri əhatə edir.
Ters fazalı buxarlanma üsulu, nazik təbəqənin nəmləndirilməsi üsulu ilə müqayisədə daha yüksək daxili sulu yüklənməsi ilə xüsusilə qeyd olunur. Bu xüsusiyyət hidrofilik dərmanların və ya digər terapevtik vasitələrin əsaslı şəkildə inkapsulyasiyasını tələb edən tətbiqlər üçün faydalıdır.
Zond tipli sonikasiyadan istifadə edən tərs fazalı buxarlanma üsulu lipozomların hazırlanması üçün möhkəm və səmərəli texnikadır. Onun daha yüksək daxili sulu yüklənməyə nail olmaq qabiliyyəti onu hidrofilik maddələrin enkapsulyasiyasının maksimum dərəcədə vacib olduğu əczaçılıq tətbiqlərində üstünlük verilən üsula çevirir. Solventin buxarlanmasına diqqətli nəzarət və sonikasiyadan istifadə bu metodun uğurunun açarıdır və müxtəlif terapevtik məqsədlər üçün uyğun olan yüksək keyfiyyətli liposomların istehsalına gətirib çıxarır.
Liposom istehsalınız üçün doğru Sonicator tapın
Hielscher Ultrasonics, bioaktiv molekulların yüksək sıxılma səmərəliliyi və yüksək yükləmə qabiliyyəti ilə nəticələnən səmərəli lipozom istehsalı üçün geniş çeşidli zond tipli sonikatorlar təklif edir.
Hielscher sonikatorlarından burada təsvir olunan tərs fazalı buxarlanma texnikası, emulsifikasiya üsulu və nazik film üsulu kimi müxtəlif lipozomların hazırlanması marşrutları üçün istifadə edə bilərsiniz.
Nazik film üsulu ilə ultrasəs liposomlarının hazırlanması haqqında ətraflı oxuyun!
Ultrasonik olaraq hazırlanmış liposomların kapsullaşdırılması haqqında daha çox oxuyun
- yüksək səmərəlilik
- ən müasir texnologiya
- etibarlılıq & möhkəmlik
- tənzimlənən, dəqiq proses nəzarəti
- dəstə & xətdə
- istənilən həcm üçün
- ağıllı proqram təminatı
- ağıllı funksiyalar (məsələn, proqramlaşdırıla bilən, məlumatların protokollaşdırılması, uzaqdan idarəetmə)
- idarə etmək asan və təhlükəsizdir
- aşağı təmir
- CIP (yerində təmiz)
Dizayn, İstehsalat və Konsaltinq – Keyfiyyətli Almaniya istehsalı
Hielscher ultrasəs cihazları ən yüksək keyfiyyət və dizayn standartları ilə tanınır. Sağlamlıq və asan əməliyyat ultrasəs aparatlarımızın sənaye obyektlərinə rahat inteqrasiyasına imkan verir. Kobud şərtlər və tələbkar mühitlər Hielscher ultrasəs cihazları tərəfindən asanlıqla idarə olunur.
Hielscher Ultrasonics, ISO sertifikatlı bir şirkətdir və ən müasir texnologiya və istifadəçi dostu olan yüksək performanslı ultrasəs cihazlarına xüsusi diqqət yetirir. Əlbəttə ki, Hielscher ultrasəs cihazları CE-yə uyğundur və UL, CSA və RoHs tələblərinə cavab verir.
Aşağıdakı cədvəl ultrasəs cihazlarımızın təxmini emal qabiliyyətinin göstəricisini verir:
| Partiya Həcmi | Axın | Tövsiyə olunan Cihazlar |
|---|---|---|
| 0,5 - 1,5 ml | na | VialTweeter |
| 1 ilə 500 ml | 10-200 ml/dəq | UP100H |
| 10 ilə 2000 ml | 20 - 400 ml/dəq | UP200Ht, UP400St |
| 0.1 - 20L | 0.2 ilə 4L/dəq | UIP2000hdT |
| 10-100 l | 2 ilə 10 L? dəq | UIP4000hdT |
| 15-150 l | 3 ilə 15 L/dəq | UIP6000hdT |
| 15-150 l | 3 ilə 15 L/dəq | UIP6000hdT |
| na | 10-100 l/dəq | UIP16000 |
| na | daha böyük | klaster UIP16000 |
Bizimlə əlaqə saxlayın!? Bizdən soruşun!
Hielscher Ultrasonics, laboratoriya, pilot və sənaye miqyasında qarışdırma tətbiqləri, dispersiya, emulsiya və ekstraksiya üçün yüksək performanslı ultrasəs homogenizatorları istehsal edir.
Ədəbiyyat? İstinadlar
- Marco Paini, Sean Ryan Daly, Bahar Aliakbarian, Ali Fathi, Elmira Arab Tehrany, Patrizia Perego, Fariba Dehghani, Peter Valtchev (2015): An efficient liposome based method for antioxidants encapsulation. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 136, 2015. 1067-1072.
- Yao, X., Bunt, C., Cornish, J., Quek, S.-Y. and Wen, J. (2014): Preparation, Optimization and Characterization of Bovine Lactoferrin-loaded Liposomes and Solid Lipid Particles Modified by Hydrophilic Polymers Using Factorial Design. Chemical Biology and Drug Design 83, 2014. 560-575.
- Seyedeh Parinaz Akhlaghi, Iris Renata Ribeiro, Ben J. Boyd, Watson Loh (2016): Impact of preparation method and variables on the internal structure, morphology, and presence of liposomes in phytantriol-Pluronic® F127 cubosomes. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 145, 2016. 845-853.
Bilməyə Dəyər Faktlar
Liposomlar nədir?
Liposomlar birləşmələri əhatə etmək üçün istifadə olunan lipid ikiqatlı sferik veziküllərdir. Onlar tutulacaq birləşməni ehtiva edən bir məhlulda hazırlanır. Zülallar kimi hidrofilik birləşmələr üçün sulu məhlul istifadə olunur, hidrofobik molekullar isə lipidlərlə qarışdırılmış üzvi həlledicilərdəki məhlullardan istifadə edərək kapsullaşdırılır. Bu çox yönlülük liposomları dərmanların çatdırılması və digər biotibbi tətbiqlər üçün qiymətli edir.
Liposomların hazırlanması üçün tərs fazalı buxarlanma üsulu nədir?
Liposomların hazırlanması üçün tərs fazalı buxarlanma metodu lipidlərin xloroform/metanol qarışığında həll edilməsini və fırlanan buxarlanma yolu ilə nazik lipid filminin əmələ gəlməsini nəzərdə tutur. Bu film daha sonra tərs fazalı veziküllər yaratmaq üçün dietil efirdə yenidən həll edilir. Tərkibində aktiv tərkib hissəsi və Tween 80 olan sulu faza üzvi faza ilə qarışdırılır və yağda su emulsiyasını əmələ gətirir. Emulsiya zond tipli sonikatordan istifadə edərək sonikasiya olunur, sonra əlavə buxarlanma zamanı liposomlar əmələ gətirən gel əldə etmək üçün daha da fırlanan buxarlanma aparılır. Son suspenziya PBS buferinin əlavə edilməsi və qalıq həlledicilərin azot qazı ilə çıxarılması ilə tamamlanır, nəticədə 4°C-də saxlanılan liposomlar yaranır.
Sonikasiyanın Liposomlara Təsiri nədir?
Sonication lipid və sulu fazaları pozmaq və qarışdırmaq üçün ultrasəs dalğalarından istifadə edərək liposomlara təsir edir, homojen bir dispersiyanın meydana gəlməsini təşviq edir. Bu proses liposomların ölçüsünü və vahidliyini idarə etməyə kömək edir və fasilələrlə enerji partlamalarına icazə verərək həddindən artıq istiləşmənin qarşısını alır. Sonikasiya nəticəsində yaranan idarə olunan kavitasiya lipozomlar daxilində aktiv maddələrin səmərəli enkapsulyasiyasını təmin edir.
Liposomlarda faza keçidi nədir?
Phase transition in liposomes refers to the temperature-induced change in the lipid’s physical state. The phase transition temperature is the specific temperature at which lipids shift from the ordered gel phase, where hydrocarbon chains are fully extended and closely packed, to the disordered liquid crystalline phase, where the hydrocarbon chains become randomly oriented and fluid. This transition impacts the liposome stability, permeability, and interaction with encapsulated substances.
Liposomların hazırlanmasının ekstruziya üsulu nədir?
Bəzən nazik təbəqənin nəmləndirilməsi üsulu ekstruziya üsulu da adlanır, çünki nazik təbəqənin nəmləndirilməsi pilləsindən sonra ekstruziya mərhələsi gəlir. Ekstruziya zamanı liposomlar homojen kiçik liposomlar əldə etmək üçün polikarbonat membranlardan ekstrüde edilir. Ekstruziyaya alternativ olaraq, liposomlar tez-tez sonikasiya ilə azaldılır.
Liposomların sonikasiya üsulu nədir?
Sonikasiya müxtəlif lipozom əmələgəlmə üsullarında tətbiq edilir. Sonikasiya lipidlərin və həlledicilərin emulsifikasiyası, lipid filminin rehidrasiyası və lipozomların kiçilməsi üçün tətbiq edilir. Əks fazalı buxarlanma üsulu üçün lipidlər sulu faza ilə ultrasəs emulsiyasına məruz qalır. İncə təbəqə üsulu üçün çox qatlı vezikül süspansiyonu yaratmaq üçün bir sonikator istifadə edərək qurudulmuş lipid filmi rehidratlanır. Çoxsaylı liposomların hazırlanması üsulları əmələ gələn lipozomların sonradan kiçilməsi üçün sonikasiyadan istifadə edir. Burada, sonikasiya müxtəlif tətbiqlər üçün uyğun olan vahid kiçik və sabit liposomlarla nəticələnir.
Hielscher Ultrasonics yüksək performanslı ultrasəs homogenizatorları istehsal edir laboratoriya üçün sənaye ölçüsü.