Sonikasiya tətbiq etməklə əks fazalı buxarlandırma üsulu ilə liposomların hazırlanması
Liposomlar biouyğunluğu və həm hidrofil, həm də hidrofob dərman maddələrini kapsullaşdırmaq qabiliyyəti sayəsində dərmanların çatdırılmasında istifadə olunan çoxməqsədli nanodaşıyıcılardır. Əks fazalı buxarlandırma üsulu (həmçinin emulsiyalaşdırma üsulu və ya həlledicinin buxarlandırılması üsulu kimi tanınır) yüksək kapsullaşdırma səmərəliliyi təmin edən, liposomların hazırlanması üçün geniş tanınan bir texnikadır. Bu məqalə zond tipli sonikasiya ilə təkmilləşdirilmiş əks fazalı buxarlandırma üsulu vasitəsilə liposomların hazırlanmasına yönəlir, prosedurun mərhələlərini, üstünlüklərini və dərman çatdırılması sistemlərində potensial tətbiqlərini işıqlandırır.
Liposomlar bir və ya bir neçə lipid ikiqat təbəqəsindən ibarət olan, hidrofil və hidrofob birləşmələri kapsullaşdıra bilən vezikulyar strukturlardır. Onların unikal quruluşu onları dərmanların hədəfli çatdırılması üçün ideal edir. Əks fazalı buxarlandırma üsulu (həmçinin emulsiyalaşdırma və ya həlledicinin buxarlandırılması üsulu kimi tanınır) liposomların hazırlanması üçün yaxşı oturuşmuş bir texnikadır. Növbəti abzaslarda sizi emulsiyalaşdırmanı, kapsullaşdırma səmərəliliyini və liposomların ölçüsünün kiçildilməsini yaxşılaşdırdığı məlum olan zond tipli sonikasiyadan istifadə edən əks fazalı buxarlandırma üsulunun üstünlükləri ilə tanış edirik.
Zond tipli sonikator UP400St liposomların hazırlanması üçün
Əks fazalı buxarlandırma üsulu ilə liposomların hazırlanması metodologiyası
Sonikasiya tətbiq etməklə əks buxarlandırma üsulu ilə liposomların əmələ gətirilməsi lipidlərin xloroform və metanoldan ibarət üzvi həlledici qarışığında (2:1 v/v) həll edilməsini əhatə edir; bu, tərs misellərin əmələ gəlməsini asanlaşdırır. Sonra bu qarışığa sulu bufer əlavə edilir. Birləşdirilmiş məhlul, məsələn, UP400ST kimi zond tipli sonikatorla sonikasiya edilir və yağda su mikroemulsiyası yaradılır. Daha sonra üzvi həlledici rotasion buxarlandırıcı ilə buxarlandırılır, nəticədə özlü gel alınır; bu gel sonda strukturunu itirərək liposomlar əmələ gətirir. Mikroemulsiya qabarcıqlarının böyük sulu nüvəsi hidrofil molekulların daxilində tutulmasını asanlaşdırır və idarə olunan buraxılma və yaxşı nüfuzetmə profili nümayiş etdirən liposomal gellərin yaranmasına gətirib çıxarır. Nəhayət, sonikatordan istifadə etməklə liposomların ölçüsü kiçildilərək vahid ölçüyə gətirilir.
Protokol / Addım-addım təlimatlar:
- Lipidləri çəkin və həll edin:
L-α-fosfatidilxolin və xolesterini 4:1 və ya 7:3 kütlə nisbətində, ümumilikdə 40 mg olmaqla dəqiq çəkin.
Çəkilmiş lipidləri yumrudibli kolbada 10 mL xloroform/metanol qarışığında (4:1 v/v) həll edin. - Lipid təbəqəsi əmələ gətirin:
Yumrudibli kolbanı rotasion buxarlandırıcıya birləşdirin.
Kolbanın divarlarında nazik lipid təbəqəsi əmələ gələnədək kolbanı vakuum şəraitində 40°C temperaturda 8 x g ilə fırladın. - Həlledici buxarlarını uzaqlaşdırın:
Kolbadan azot qazı keçirərək həlledici qarışığının qalan buxarlarını uzaqlaşdırın. - Lipid təbəqəsini yenidən həll edin:
Əks fazalı vezikullar əmələ gətirmək üçün lipid təbəqəsini 10 mL dietil efirində yenidən həll edin. - Sulu fazanı hazırlayın:
Kapsullaşdırılacaq aktiv maddəni və 20 mg Tween 80-i ehtiva edən 5 mL PBS buferini (0,1 M, pH 7,4) üzvi faza (həll edilmiş lipidlər olan dietil efiri) ilə qarışdırın. - Emulsiyanı sonikasiya edin:
w/o emulsiyasını buz vannasına yerləşdirin.
Emulsiyanı zond tipli sonikator UP200Ht ilə 26 kHz tezlikdə, 50% impuls rejimində (0,5 dövr = 30 sec AKTİV / 30 sec QEYRİ-AKTİV) və 50% amplitudada 1 dəqiqə sonikasiya edin. - Gel əmələ gətirmək üçün buxarlandırın:
Sonikasiya edilmiş emulsiyanı yenidən rotasion buxarlandırıcıya yerləşdirin.
Gel alınanadək atmosfer təzyiqində 40°C temperaturda buxarlandırın. - Liposomlar əmələ gətirin:
Geli daha da buxarlandıraraq yarımşəffaf mayeyə çevrilməsini təmin edin; bu, liposomların əmələ gəldiyini göstərir. - Son liposom suspenziyası:
Liposom suspenziyasına əlavə 5 mL PBS buferi (0,1 M, pH 7,4) əlavə edin.
Qarışığı vorteks qarışdırıcısında yüngülcə qarışdırın.
Azot qazından istifadə edərək dietil efirinin qalan buxarlarını uzaqlaşdırın. - Saxlanma:
Son liposom suspenziyasını lazım olanadək soyuducuda 4°C temperaturda saxlayın.
Bu təlimatlar ultrasəs homogenləşdirməsi ilə əks fazalı buxarlandırma üsulundan istifadə edərək liposomların hazırlanmasının addım-addım prosesini təsvir edir və yüksək daxili sulu faza yüklənməsini və aktiv maddənin səmərəli kapsullaşdırılmasını təmin edir.
Əks fazalı buxarlandırma üsulu, xüsusilə zond tipli sonikasiyadan istifadə etməklə, liposomların hazırlanması üçün geniş tətbiq olunan bir texnikadır; bu, xüsusən yüksək daxili sulu faza yüklənməsi hədəfləndikdə istifadə olunur. Liposomların daxilinə daha çox sulu faza daxil etmək qabiliyyəti sayəsində bu üsul ənənəvi nazik təbəqənin hidratlaşdırılması üsulundan üstündür.
Sənaye sonikatoru UIP2000hdT liposomların genişmiqyaslı istehsalı üçün
Liposomların əmələ gətirilməsində zond tipli sonikasiyanın üstünlükləri
- Artırılmış homogenlik: Zond tipli sonikasiya sabit enerji daxilolmasını təmin edir və nəticədə liposomların ölçü paylanması daha vahid olur.
- Yaxşılaşdırılmış kapsullaşdırma: Sonikasiya zamanı yaranan mexaniki qüvvələr, xüsusən hidrofil birləşmələr üçün, dərman maddələrinin kapsullaşdırılmasını yaxşılaşdırır.
- Miqyasın artırılması imkanı: Üsulların miqyasını asanlıqla artırmaq mümkündür, bu da onları liposomların genişmiqyaslı istehsalı üçün uyğun edir.
Liposomların dərman çatdırılmasında tətbiqləri
Zond tipli sonikasiya ilə emulsiyalaşdırma və həlledicinin buxarlandırılması üsulları vasitəsilə hazırlanmış liposomlar müxtəlif dərman çatdırılması tətbiqləri üçün uyğundur, o cümlədən:
- Dərmanların hədəfli çatdırılması: Liposomların spesifik liqandlarla funksionallaşdırılması müəyyən toxumalara və ya hüceyrələrə hədəfli çatdırılmaya imkan verir.
- İdarə olunan buraxılma: Lipid ikiqat təbəqəsinin quruluşu dərman maddəsinin idarə olunan buraxılmasına imkan verir və terapevtik effektivliyi artırır.
- Çoxməqsədlilik: Bu üsullar kiçik molekullardan zülallar və nuklein turşuları kimi daha böyük biomolekullara qədər geniş çeşidli terapevtik maddələrin istifadəsinə imkan verir.
Əks fazalı buxarlandırma üsulu xüsusilə nazik təbəqənin hidratlaşdırılması üsulu ilə müqayisədə daha yüksək daxili sulu faza yüklənməsi ilə seçilir. Bu xüsusiyyət hidrofil dərman maddələrinin və ya digər terapevtik maddələrin böyük miqdarda kapsullaşdırılmasını tələb edən tətbiqlər üçün faydalıdır.
Zond tipli sonikasiyadan istifadə edən əks fazalı buxarlandırma üsulu liposomların hazırlanması üçün etibarlı və səmərəli bir texnikadır. Daha yüksək daxili sulu faza yüklənməsinə nail olmaq qabiliyyəti onu hidrofil maddələrin kapsullaşdırılmasının maksimuma çatdırılmasının vacib olduğu əczaçılıq tətbiqlərində üstünlük verilən üsula çevirir. Həlledicinin buxarlandırılmasına diqqətli nəzarət və sonikasiyadan istifadə bu üsulun uğuru üçün əsasdır və müxtəlif terapevtik məqsədlər üçün uyğun yüksək keyfiyyətli liposomların istehsalına gətirib çıxarır.
Liposom istehsalınız üçün uyğun sonikatoru tapın
Hielscher Ultrasonics liposomların səmərəli istehsalı üçün geniş çeşiddə zond tipli sonikatorlar təklif edir; bunun nəticəsində bioaktiv molekulların yüksək tutulma səmərəliliyi və yüksək yükləmə tutumu əldə olunur.
Hielscher sonikatorlarından burada təsvir olunan əks fazalı buxarlandırma texnikası, emulsiyalaşdırma üsulu və nazik təbəqə üsulu kimi müxtəlif liposom hazırlama yollarında istifadə edə bilərsiniz.
Nazik təbəqə üsulu ilə ultrasəs vasitəsilə liposomların hazırlanması haqqında daha ətraflı oxuyun!
Aşağıdakı maddələri kapsullaşdıran, ultrasəs vasitəsilə hazırlanmış liposomlar haqqında daha ətraflı oxuyun:
- yüksək səmərəlilik
- ən müasir texnologiya
- etibarlılıq və möhkəmlik
- tənzimlənə bilən, dəqiq proses idarəetməsi
- partiya ilə və axın xəttində emal
- istənilən həcm üçün
- intellektual proqram təminatı
- ağıllı funksiyalar (məsələn, proqramlaşdırıla bilmə, məlumatların protokollaşdırılması, məsafədən idarəetmə)
- asan və təhlükəsiz istismar
- az texniki xidmət tələbi
- CIP (yerində təmizləmə)
Layihələndirmə, istehsal və məsləhət xidmətləri – Almaniya istehsalı keyfiyyət
Hielscher ultrasəs cihazları ən yüksək keyfiyyət və dizayn standartları ilə tanınır. Möhkəmlik və asan istismar ultrasəs cihazlarımızın sənaye müəssisələrinə rahat inteqrasiyasına imkan verir. Hielscher ultrasəs cihazları ağır şəraitin və yüksək tələblər qoyan mühitlərin öhdəsindən asanlıqla gəlir.
Hielscher Ultrasonics ISO sertifikatlı şirkətdir və ən müasir texnologiyaya və istifadə rahatlığına malik yüksək məhsuldarlıqlı ultrasəs cihazlarına xüsusi əhəmiyyət verir. Əlbəttə, Hielscher ultrasəs cihazları CE tələblərinə uyğundur və UL, CSA və RoHs tələblərinə cavab verir.
Aşağıdakı cədvəl ultrasəs cihazlarımızın təxmini emal gücü barədə təsəvvür yaradır:
| Partiya həcmi | Axın sürəti | Tövsiyə olunan cihazlar |
|---|---|---|
| 0,5–1,5mL | n.a. | VialTweeter |
| 1–500mL | 10–200mL/min | UP100H |
| 10–2000mL | 20–400mL/min | UP200Ht, UP400St |
| 0,1–20L | 0,2–4L/min | UIP2000hdT |
| 10–100L | 2–10L/min | UIP4000hdT |
| 15–150L | 3–15L/min | UIP6000hdT |
| 15–150L | 3–15L/min | UIP6000hdT |
| n.a. | 10–100L/min | UIP16000 |
| n.a. | daha yüksək | klasterdə birləşdirilmiş UIP16000 |
Bizimlə əlaqə saxlayın! / Bizə sual verin!
Ədəbiyyat / İstinadlar
- Marco Paini, Sean Ryan Daly, Bahar Aliakbarian, Ali Fathi, Elmira Arab Tehrany, Patrizia Perego, Fariba Dehghani, Peter Valtchev (2015): An efficient liposome based method for antioxidants encapsulation. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 136, 2015. 1067-1072.
- Yao, X., Bunt, C., Cornish, J., Quek, S.-Y. and Wen, J. (2014): Preparation, Optimization and Characterization of Bovine Lactoferrin-loaded Liposomes and Solid Lipid Particles Modified by Hydrophilic Polymers Using Factorial Design. Chemical Biology and Drug Design 83, 2014. 560-575.
- Seyedeh Parinaz Akhlaghi, Iris Renata Ribeiro, Ben J. Boyd, Watson Loh (2016): Impact of preparation method and variables on the internal structure, morphology, and presence of liposomes in phytantriol-Pluronic® F127 cubosomes. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 145, 2016. 845-853.
Bilməyə dəyər faktlar
Liposomlar nədir?
Liposomlar birləşmələri kapsullaşdırmaq üçün istifadə olunan, lipid ikiqat təbəqəsinə malik sferik vezikullardır. Onlar daxilində tutulacaq birləşməni ehtiva edən məhlulda hazırlanır. Zülallar kimi hidrofil birləşmələr üçün sulu məhlul istifadə olunur, hidrofob molekullar isə lipidlərlə qarışdırılmış üzvi həlledicilərdəki məhlullardan istifadə etməklə kapsullaşdırılır. Bu çoxməqsədlilik liposomları dərmanların çatdırılması və digər biotibbi tətbiqlər üçün dəyərli edir.
Liposomların hazırlanmasında əks fazalı buxarlandırma üsulu nədir?
Liposomların hazırlanması üçün əks fazalı buxarlandırma üsulu lipidlərin xloroform/metanol qarışığında həll edilməsini və rotasion buxarlandırma vasitəsilə nazik lipid təbəqəsinin əmələ gətirilməsini əhatə edir. Bu təbəqə daha sonra əks fazalı vezikullar yaratmaq üçün dietil efirində yenidən həll edilir. Aktiv maddə və Tween 80 ehtiva edən sulu faza üzvi faza ilə qarışdırılır və yağda su emulsiyası əmələ gəlir. Emulsiya zond tipli sonikatorla sonikasiya edilir, sonra gel əldə etmək üçün əlavə rotasion buxarlandırma aparılır; bu gel əlavə buxarlandırma nəticəsində sonda liposomlar əmələ gətirir. PBS buferinin əlavə edilməsi və qalıq həlledicilərin azot qazı ilə uzaqlaşdırılması ilə son suspenziyanın hazırlanması tamamlanır və nəticədə 4°C temperaturda saxlanılan liposomlar alınır.
Sonikasiyanın liposomlara təsiri nədir?
Sonikasiya lipid və sulu fazaları parçalamaq və qarışdırmaq üçün ultrasəs dalğalarından istifadə etməklə liposomlara təsir edir və homogen dispersiyanın əmələ gəlməsini asanlaşdırır. Bu proses liposomların ölçüsünü və vahidliyini idarə etməyə kömək edir və fasiləli enerji impulslarına imkan verməklə həddindən artıq qızmanın qarşısını alır. Sonikasiyanın yaratdığı idarə olunan kavitasiya aktiv maddələrin liposomların daxilində səmərəli kapsullaşdırılmasını təmin edir.
Liposomlarda faza keçidi nədir?
Liposomlarda faza keçidi temperaturun təsiri ilə lipidin fiziki halının dəyişməsini ifadə edir. Faza keçidi temperaturu lipidlərin karbohidrogen zəncirlərinin tam açılmış və sıx yerləşmiş olduğu nizamlı gel fazasından karbohidrogen zəncirlərinin təsadüfi istiqamətləndiyi və axıcılıq qazandığı nizamsız maye kristal fazasına keçdiyi konkret temperaturdur. Bu keçid liposomların sabitliyinə, keçiriciliyinə və kapsullaşdırılmış maddələrlə qarşılıqlı təsirinə təsir göstərir.
Liposomların hazırlanmasının ekstruziya üsulu nədir?
Bəzən nazik təbəqənin hidratlaşdırılması üsulu həm də ekstruziya üsulu adlandırılır, çünki nazik təbəqənin hidratlaşdırılması mərhələsindən sonra ekstruziya mərhələsi gəlir. Ekstruziya zamanı homogen kiçik liposomlar əldə etmək üçün liposomlar polikarbonat membranlardan sıxılaraq keçirilir. Ekstruziyaya alternativ olaraq, liposomların ölçüsü çox vaxt sonikasiya ilə kiçildilir.
Liposomların sonikasiya üsulu nədir?
Sonikasiya liposomların əmələ gətirilməsinin müxtəlif üsullarında tətbiq olunur. Sonikasiya lipidlərin və həlledicilərin emulsiyalaşdırılması, lipid təbəqəsinin yenidən hidratlaşdırılması və liposomların ölçüsünün kiçildilməsi üçün tətbiq olunur. Əks fazalı buxarlandırma üsulunda lipidlər sulu faza ilə ultrasəs vasitəsilə emulsiyalaşdırılır. Nazik təbəqə üsulunda çoxlamelli vezikul suspenziyası yaratmaq üçün qurudulmuş lipid təbəqəsi sonikatordan istifadə edilərək yenidən hidratlaşdırılır. Bir çox liposom hazırlama texnikasında əmələ gəlmiş liposomların ölçüsünün sonradan kiçildilməsi üçün sonikasiyadan istifadə olunur. Burada sonikasiya müxtəlif tətbiqlərə uyğun, vahid kiçik ölçülü və sabit liposomların alınmasına gətirib çıxarır.
Hielscher Ultrasonics yüksək məhsuldarlıqlı ultrasəs homogenizatorları istehsal edir: laboratoriya ölçüsündən başlayaraq sənaye ölçüsünədək.

