THC tahlili uchun namunalarni ultratovush yordamida tayyorlash
- Ultratovushli ekstraksiya THC ishlab chiqarish uchun sinalgan usuldir, ammo undan tahliliy maqsadlarda ham foydalanish mumkin.
- Ultratovush bilan ishlov berish kannabis mahsulotlaridagi THC ning umumiy miqdorini tahlil qilish uchun qoʻllanadigan keng tarqalgan namuna tayyorlash usulidir.
- TLC, GC va HPLC tahlilidan oldin namunalarga ultratovushli ekstraksiya qoʻllanadi.
THC ning ultratovushli ekstraksiyasi
THC yoki tetragidrokannabinol (delta-9-tetragidrokannabinol) marixuananing aksariyat psixologik taʼsirlarini keltirib chiqaradigan kimyoviy moddadir. Kannabisning 400 dan ortiq turli navlari maʼlum. Muayyan kannabis naviga qarab, kannabisdagi THC miqdori atigi 0,3 wt% boʻlishi mumkin. Boshqa navlarda THC miqdori 20 wt% gacha yetishi mumkin.
Turli kannabis mahsulotlari ham sezilarli darajada farq qiladi: marixuanadagi oʻrtacha THC konsentratsiyasi 1 dan 5% gacha; gashishda THC miqdori 5 dan 15% gacha, gashish moyida esa oʻrtacha 20% ni tashkil etadi. Marixuananing rekreatsion dozalaridagi THC miqdori juda oʻzgaruvchan boʻlib, marixuanadagi THC miqdori qanchalik past boʻlsa, foydalanuvchi istalgan taʼsirlarni his qilish uchun uni shunchalik koʻp isteʼmol qilishi kerak.
THC miqdorini tahlil qilish uchun namunalarni ultratovush yordamida tayyorlash qoʻllanadi
- rekreatsion THC mahsulotlari sifatini nazorat qilish uchun,
- farmatsevtik THC mahsulotlari sifatini aniqlash uchun,
- giyohvand modda olish uchun yetishtiriladigan kanopni tola olish uchun yetishtiriladigan kanopdan farqlash uchun.
THC tahlili uchun odatda quyidagi xromatografik usullar qoʻllanadi: yupqa qatlamli xromatografiya (TLC), gaz xromatografiyasi (GC) va yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (HPLC)
TLC tahlili uchun namunalarni ultratovush yordamida tayyorlash protokoli
Namuna tayyorlash: namunalarni tayyorlash uchun quritilgan oʻsimlik materiali matseratsiya qilinishi va bir jinsli kukun holiga keltirilguncha maydalanishi kerak. Ultratovushli ekstraksiya uchun 500mg kannabis oʻsimligi kukuni va 5mL metanol-xloroform aralashmasi (9 : 1 nisbatda) flakonda aralashtiriladi. Ultratovush bilan ishlov berishni mikro uchli ultratovush qurilmasi , VialTweeter yoki ultratovushli CupHorn yordamida amalga oshirish mumkin. Ultratovush bilan ishlov berish taxminan 5 min. davom etadi. Shundan soʻng namunani kamida 5 min. tindiring. Tiniq choʻkma usti suyuqligini ekstraksiya aralashmasi bilan suyultiring (v/v: 1 : 10). Erkin THC: TLC plastinkasiga 1μL
Dekarboksillanish: 100μL ekstrakt quruq holatgacha bugʻlatiladi. Qoldiq 180℃ da 4 min. qizdiriladi. 500μL metanol-xloroform qoʻshing (v/v 9 : 1). 5 min. ultratovush bilan ishlov bering. Tiniq choʻkma usti suyuqligini ekstraksiya aralashmasi bilan suyultiring (v/v: 1 : 10).
Kalibrlash: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC silikageli F-254, Merck 5729
TLC skaneri II, CATS3 dasturiy taʼminoti, Camag Muttenz Elyuent:
Etilatsetat : Toluol : Xloroform = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Xromatografiyadan keyingi derivatizatsiya: 0,1 M NaOH da 0,1% Fast Blue tuzi
550 nm da densitometriya
GC tahlili uchun namunalarni ultratovush yordamida tayyorlash protokoli
Namuna tayyorlash: quritilgan oʻsimlik materiali matseratsiya qilinadi va bir jinsli kukun holiga keltirilguncha maydalanadi. Ekstraksiya uchun 500mg kannabis oʻsimligi kukuni va 10mL metanol-geksan aralashmasi (9 : 1 nisbatda) flakonda aralashtiriladi. Ultratovush bilan ishlov berishni mikro uchli zond tipidagi ultratovush qurilmasi , VialTweeter yoki ultratovushli CupHorn yordamida amalga oshirish mumkin. Namunaga 15–20 min. ultratovush bilan ishlov bering. Namunani chayqating va kamida 5 min. tindiring. Tiniq choʻkma usti suyuqligini ekstraksiya aralashmasi bilan suyultiring (v/v 1: 20).
Dekarboksillanish: kiritma ichida
Injektor harorati 250℃
Kalibrlash: 5 ng/μL dan 250 ng/μL gacha
GC: 5973 MSD va 7683 avtomatik namuna uzatgichi bilan jihozlangan HP 6890; kiritish: 1μL, oqimni boʻlmasdan ishlash vaqti: 2 min.
Kolonka: HP-5 MS, 30m, diametri 250 μm, plyonka qalinligi 0,25 μm
Tashuvchi gaz: He, 35 psi, doimiy hajmiy oqim tezligi: 4 mL/min.
Pech: 100℃ da 1min.; haroratni 15℃ /min. tezlikda 280℃ gacha oshirish; 280℃ da 5 min. MSD: skanerlash: m/e 35 – 550
HPLC tahlili uchun namunalarni ultratovush yordamida tayyorlash protokoli
Namuna tayyorlash (GC uchun tayyorlashga oʻxshash): quritilgan oʻsimlik materiali matseratsiya qilinadi va bir jinsli kukun holiga keltirilguncha maydalanadi. Ekstraksiya uchun 500mg kannabis oʻsimligi kukuni va 10mL metanol-geksan aralashmasi (9 : 1 nisbatda) flakonda aralashtiriladi. Ultratovush bilan ishlov berishni mikro uchli zond tipidagi ultratovush qurilmasi , VialTweeter yoki ultratovushli CupHorn yordamida amalga oshirish mumkin. Namunaga 15–20 min. ultratovush bilan ishlov bering. Namunani chayqating va kamida 5 min. tindiring. Tiniq choʻkma usti suyuqligini ekstraksiya aralashmasi bilan suyultiring (v/v 1: 20).
VialTweeter namunalarni ultratovush yordamida tayyorlash uchun
Old kolonka: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Kolonka: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Elyuent: izokratik 36% TEAP 25 mmol/L, 64% atsetonitril; 210nm da miqdoriy aniqlash
Kalibrlash: 0,001 – 0,10 μg/μL
Kalibrlash: 0,01 – 0,50 μg/μL
Ushlanish vaqti: CBD uchun: 6,2 min.; CBN uchun: 8,0 min.; THC uchun: 9,4 min.; THC-A uchun: 11,0 min
Aniqlash chegarasi (LOD): CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St namunalarga ultratovush bilan ishlov berish uchun mikro uch bilan
Adabiyotlar/Manbalar
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): THC saqlovchi kanop oʻtining sud-kimyoviy tahlillari. Yupqa qatlamli xromatografiyadan GC orqali HPLC usuligacha. Applica 2006.
Bilishga arziydigan maʼlumotlar
Marixuana urgʻochi kannabis oʻsimligining quritilgan gullari hamda ularning ostidagi barglari va poyalaridan iborat. Bu eng koʻp isteʼmol qilinadigan shakl boʻlib, unda taxminan 3% dan 20% gacha THC mavjud. Marixuananing maxsus, yuqori darajada seleksiya qilingan shakllarida THC miqdori 30% dan oshadi. Marixuana THC saqlovchi kannabis mahsulotlarining boshqa barcha turlari uchun boshlangʻich materialdir. Eng koʻp uchraydigan kannabinoid – tetragidrokannabinol kislotasini (THCA) psixoaktiv THC ga aylantirish uchun dekarboksillanish jarayonini boshlash kerak. Shu sababli dekarboksillanishni yuzaga keltirish uchun kannabis va uning ekstraktlari qizdirilishi yoki suvsizlantirilishi kerak.
Kif kannabis barglari va gullaridan elab olinadigan, trixomalarga boy kukunni anglatadi. U kukun shaklida isteʼmol qilinadi yoki presslanib, gashish briketlarida ishlatiladi.
Gashish yoki hash presslangan kifdan yoki oʻsimlik yuzasidan qirib olinib, sharchalarga yumaloqlangan smoladan tayyorlanadigan konsentrlangan smola briketi yoki sharchasidir. Tozaligi va manbasiga qarab, u qora rangdan oltin jigarranggacha turli ranglarda boʻladi. Uni ogʻiz orqali isteʼmol qilish yoki chekish mumkin, masalan, trubka, chilim, bong, suvli chekish trubkasi yoki vaporizatorda, qizdirilgan pichoqdan foydalanib, oʻrama sigaretlarda, kannabis gʻunchalari yoki tamaki bilan aralashtirib, butilka yordamida tutunini tortib chekish yoki oziq-ovqat tarkibiy qismi sifatida ishlatish mumkin.
Kannabisning spirtli tindirmasi kannabinoidlarning spirtdagi ekstraktini anglatadi. Tindirma tayyorlash uchun kannabinoidlar kannabis oʻsimligidan yuqori spirt miqdoriga ega ichimliklar (asosan don spirti) yordamida ekstraksiya qilinadi.
Gashish moyi erituvchi yordamida ekstraksiya qilish orqali olinadigan, qotgan yoki qovushqoq massa holiga keltirilgan kannabinoidlarning smolasimon matritsasidir. Psixoaktiv birikma miqdori yuqori boʻlgani uchun gashish moyi eng kuchli taʼsirga ega kannabis mahsulotlaridan biridir. Soʻnggi paytlarda butan va oʻta kritik karbonat angidrid yordamida ekstraksiya qilingan gashish moyidan foydalanish tobora ommalashmoqda.
Damlamalar kannabis damlamasini tayyorlash uchun ishlatilishi mumkin boʻlgan turli xil uchuvchan boʻlmagan erituvchilar bilan bir-biridan farqlanadigan kannabis damlamalari turlarini anglatadi. Bunday damlamani tayyorlash uchun kannabis oʻsimligi materiali erituvchi bilan aralashtiriladi, soʻng oʻsimlikdagi moylarni erituvchiga oʻtkazish uchun presslanadi va filtrlanadi. Kakao moyi, sariyogʻ, ovqat tayyorlash moyi, glitserin va terini namlantiruvchi vositalar odatda erituvchi sifatida qoʻllanadi.
Tibbiy marixuana kannabis oʻsimligidan shifokor tavsiya qilgan oʻsimlik asosidagi davolash vositasi sifatida, shuningdek, sintetik THC va kannabinoidlardan foydalanishni anglatadi. Bunday foydalanish odatda retseptni talab qiladi va tarqatish odatda mahalliy qonunlarda belgilangan tartib doirasida amalga oshiriladi. Bir qancha tadqiqotlar kannabis yoki uning hosilalaridan foydalanish, masalan, kimyoterapiya tufayli yuzaga kelgan koʻngil aynishi va qusish, neyropatik ogʻriq va koʻp oʻchoqli sklerozga qarshi taʼsir koʻrsatishini aniqlagan.

