Ультразвуковая пробоподготовка для анализа THC
- Ультразвуковая экстракция – проверенный метод получения THC, который также можно использовать в аналитических целях.
- Обработка ультразвуком – распространённый метод пробоподготовки для анализа общего содержания THC в продуктах из каннабиса.
- Образцы подвергают ультразвуковой экстракции перед анализом методами TLC, GC и HPLC.
Ультразвуковая экстракция THC
THC, или тетрагидроканнабинол (delta-9-tetrahydrocannabinol), – химическое вещество, вызывающее большинство психологических эффектов марихуаны. Известно более 400 различных сортов каннабиса. В зависимости от конкретного сорта содержание THC в каннабисе может составлять всего 0,3 wt%. В других сортах содержание THC может достигать 20 wt%.
Различные продукты из каннабиса также существенно различаются: средняя концентрация THC в марихуане составляет от 1 до 5%; в гашише содержание THC составляет от 5 до 15%, а в гашишном масле – в среднем 20%. Количество THC в рекреационных дозах марихуаны сильно варьируется, и чем ниже содержание THC в марихуане, тем больше её необходимо употребить пользователю для достижения желаемых эффектов.
Ультразвуковая пробоподготовка используется для анализа содержания THC
- для контроля качества рекреационных продуктов с THC,
- для определения качества фармацевтических продуктов с THC,
- для различения наркотической и волокнистой конопли.
Для анализа THC обычно используются следующие хроматографические методы: тонкослойная хроматография (TLC), газовая хроматография (GC) и высокоэффективная жидкостная хроматография (HPLC)
Протокол ультразвуковой пробоподготовки для анализа методом TLC
Пробоподготовка: для подготовки образцов высушенный растительный материал необходимо подвергнуть мацерации и измельчить до однородного порошка. Для ультразвуковой экстракции во флаконе смешивают 500mg порошка каннабиса и 5mL смеси метанола и хлороформа (в соотношении 9 : 1). Обработку ультразвуком можно проводить с помощью ультразвукового устройства с микронаконечником, VialTweeter или ультразвукового CupHorn. Время обработки ультразвуком составляет приблизительно 5 min. Затем оставьте образец в покое не менее чем на 5 min. Разбавьте прозрачную надосадочную жидкость экстракционной смесью (v/v: 1 : 10). Свободный THC: 1μL на пластину для TLC
Декарбоксилирование: 100μL экстракта выпаривают досуха. Остаток нагревают при 180℃ в течение 4 min. Добавьте 500μL смеси метанола и хлороформа (v/v 9 : 1). Обрабатывайте ультразвуком в течение 5 min. Разбавьте прозрачную надосадочную жидкость экстракционной смесью (v/v: 1 : 10).
Калибровка: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
Силикагель для TLC F-254, Merck 5729
Сканер TLC II, программное обеспечение CATS3, Camag Muttenz; элюент:
Этилацетат : толуол : хлороформ = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Постхроматографическая дериватизация: соль Fast Blue 0,1% в 0,1 M NaOH
Денситометрия при 550 nm
Тетрагидроканнабинол (Δ9-THC) для анализа и экстракции
Протокол ультразвуковой пробоподготовки для анализа методом GC
Пробоподготовка: высушенный растительный материал подвергают мацерации и измельчают до однородного порошка. Для экстракции во флаконе смешивают 500mg порошка каннабиса и 10mL смеси метанола и гексана (в соотношении 9 : 1). Обработку ультразвуком можно проводить с помощью зондового ультразвукового устройства с микронаконечником, VialTweeter или ультразвукового CupHorn. Обрабатывайте образец ультразвуком в течение 15–20 min. Встряхните образец и оставьте его в покое не менее чем на 5 min. Разбавьте прозрачную надосадочную жидкость экстракционной смесью (v/v 1: 20).
Декарбоксилирование: во вставке
Температура инжектора 250℃
Калибровка: от 5 ng/μL до 250 ng/μL
GC: HP 6890 с 5973 MSD и автосамплером 7683; объём ввода: 1μL, время без деления потока: 2 min.
Колонка: HP-5 MS, 30m, диаметр 250 μm, толщина плёнки 0,25 μm
Газ-носитель: He, 35 psi, постоянный расход: 4 mL/min.
Термостат: 100℃ в течение 1min.; повышение температуры со скоростью 15℃ /min. до 280℃; 280℃ в течение 5 min. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Протокол ультразвуковой пробоподготовки для анализа методом HPLC
Пробоподготовка (аналогично подготовке для GC): высушенный растительный материал подвергают мацерации и измельчают до однородного порошка. Для экстракции во флаконе смешивают 500mg порошка каннабиса и 10mL смеси метанола и гексана (в соотношении 9 : 1). Обработку ультразвуком можно проводить с помощью зондового ультразвукового устройства с микронаконечником, VialTweeter или ультразвукового CupHorn. Обрабатывайте образец ультразвуком в течение 15–20 min. Встряхните образец и оставьте его в покое не менее чем на 5 min. Разбавьте прозрачную надосадочную жидкость экстракционной смесью (v/v 1: 20).
VialTweeter для ультразвуковой пробоподготовки
Предколонка: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Колонка: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Элюент: изократический режим, 36% TEAP 25 mmol/L, 64% ацетонитрила; количественное определение при 210nm
Калибровка: 0,001 – 0,10 μg/μL
Калибровка: 0,01 – 0,50 μg/μL
Время удерживания: для CBD: 6,2 min.; для CBN: 8,0 min.; для THC: 9,4 min.; для THC-A: 11,0 min
Предел обнаружения (LOD): CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St с микронаконечником для обработки образцов ультразвуком
Литература/Источники
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Судебно-химический анализ растительного материала конопли, содержащего THC. От тонкослойной хроматографии через газовую хроматографию к методу HPLC. Applica 2006.
Полезные сведения
Марихуана состоит из высушенных цветков, расположенных под ними листьев и стеблей женского растения конопли. Это наиболее широко употребляемая форма, содержащая приблизительно от 3% до 20% THC. Отдельные формы марихуаны, полученные в результате интенсивной селекции, достигают содержания THC более 30%. Марихуана служит исходным материалом для всех остальных разновидностей продуктов из каннабиса, содержащих THC. Для превращения наиболее распространённого каннабиноида, тетрагидроканнабиноловой кислоты (THCA), в психоактивный THC необходимо запустить процесс декарбоксилирования. Поэтому каннабис и его экстракты необходимо нагреть или обезводить, чтобы вызвать декарбоксилирование.
Киф – это богатый трихомами порошок, получаемый просеиванием листьев и цветков каннабиса. Его употребляют либо в виде порошка, либо прессуют и используют в гашишных брикетах.
Гашиш , или хаш, – это брикет или шарик концентрированной смолы, получаемый либо из прессованного кифа, либо из смолы, которую соскабливают с поверхности растения и скатывают в шарики. Его цвет варьируется от чёрного до золотисто-коричневого в зависимости от чистоты и происхождения. Его можно употреблять внутрь или курить, например в трубке, кальяне, бонге, бабблере, вапорайзере, с помощью горячего ножа, в самокрутках, в смеси с соцветиями каннабиса или табаком, вдыхая дым через бутылку, либо использовать как ингредиент пищи.
Настойка каннабиса – это спиртовой экстракт каннабиноидов. Для приготовления настойки каннабиноиды экстрагируют из растения каннабиса с помощью крепких спиртных напитков (преимущественно зернового спирта).
Гашишное масло – это смолистая матрица каннабиноидов, получаемая экстракцией растворителем и приобретающая форму затвердевшей или вязкой массы. Гашишное масло – один из наиболее сильнодействующих продуктов из каннабиса благодаря высокому содержанию психоактивного соединения. В последнее время всё большую популярность приобретает использование гашишного масла, экстрагированного бутаном и сверхкритическим диоксидом углерода.
Настои – это различные виды настоев каннабиса, различающиеся широким спектром нелетучих растворителей, которые можно использовать для их приготовления. Для приготовления такого настоя растительный материал каннабиса смешивают с растворителем, затем отжимают и фильтруют, чтобы перенести масла из растения в растворитель. В качестве растворителей обычно используют масло какао, сливочное масло, кулинарное масло, глицерин и увлажняющие средства для кожи.
Медицинская марихуана – это использование растения каннабиса в качестве рекомендованного врачом средства фитотерапии, а также синтетического THC и каннабиноидов. Такое применение, как правило, требует рецепта, а распространение обычно осуществляется в рамках, установленных местным законодательством. Ряд исследований показал, что применение каннабиса или его производных оказывает действие против, например, вызванных химиотерапией тошноты и рвоты, нейропатической боли и рассеянного склероза.