Ուլտրաձայնային նմուշի պատրաստում THC վերլուծության համար

• Ուլտրաձայնային արդյունահանումը THC-ի արտադրության ապացուցված մեթոդ է, բայց այն կարող է օգտագործվել նաև վերլուծական նպատակներով:
• Ultrasonication-ը նմուշի պատրաստման ընդհանուր մեթոդ է, որն օգտագործվում է կանեփի արտադրանքներում THC-ի ընդհանուր պարունակության վերլուծության համար:
• Նախքան TLC, GC և HPLC վերլուծությունը նմուշների վրա կիրառվում է ուլտրաձայնային արդյունահանում:

Ուլտրաձայնային THC արդյունահանում

THC, or tetrahydrocannabinol (delta-9-tetrahydrocannabinol), is the chemical that causes most of marijuana’s psychological effects. For the cannabis species, can be more than 400 different strains are known. Depending on the specific cannabis strain, cannabis can have as little as 0.3 wt% THC. In other strains, the THC content can reach up to 20 wt%.
Նաև կանեփի տարբեր արտադրանքները զգալիորեն տարբերվում են. Այսպիսով, մարիխուանայի մեջ THC-ի միջին կոնցենտրացիան տատանվում է 1-ից 5%-ի միջև; Հաշիշում THC-ի պարունակությունը 5-ից 15% է, իսկ հաշիշի յուղում՝ միջինը 20%: THC-ն մարիխուանայի ռեկրեացիոն չափաբաժիններում խիստ փոփոխական է, և որքան ցածր է մարիխուանայի մեջ THC-ի պարունակությունը, այնքան օգտվողը պետք է օգտագործի ցանկալի ազդեցությունը զգալու համար:

Ուլտրաձայնային հզորության կիրառումը (նաև հայտնի է որպես sonification) ապացուցված գործիք է բուսական նյութերից ակտիվ բաղադրիչների արդյունահանման համար: THC-ն, ինչպես նաև այլ ակտիվ բաղադրիչները, ինչպիսիք են կանաբինոիդները և տերպենները, կարող են հաջողությամբ արդյունահանվել արտազատման միջոցով: Կտտացրեք այստեղ՝ կանեփի ուլտրաձայնային արդյունահանման մասին ավելին կարդալու համար:

Ուլտրաձայնային նմուշի պատրաստումը օգտագործվում է THC պարունակությունը վերլուծելու համար

• ռեկրեացիոն THC արտադրանքի որակի վերահսկման համար,
• դեղագործական THC արտադրանքի որակի որոշման համար,
• թմրանյութ-կանեփի և մանրաթել-կանեփի տարբերակման համար։

THC վերլուծության համար սովորաբար օգտագործվում են հետևյալ քրոմատոգրաֆիկ մեթոդները՝ բարակ շերտով քրոմատոգրաֆիա (TLC), գազային քրոմատագրություն (GC) և բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատոգրաֆիա (HPLC)

Ուլտրաձայնային նմուշի նախապատրաստման արձանագրություն TLC վերլուծության համար

Նմուշի պատրաստում. Նմուշների պատրաստման համար չորացրած բուսանյութը պետք է ցողել և մանրացնել միատարր փոշու: Ուլտրաձայնային արդյունահանման համար կանեփի բույսի 500 մգ փոշին և 5 մլ մեթանոլ-քլորոֆորմ խառնուրդը (9:1 հարաբերակցությունը) խառնվում են սրվակի մեջ: Sonication կարող է կիրառվել օգտագործելով an ուլտրաձայնային սարք միկրո ծայրով, որ VialTweeter կամ ուլտրաձայնային բաժակի եղջյուր. The sonication ժամանակը տեւում է մոտ. 5 րոպե Այնուհետև թողեք նմուշը հանգստանա առնվազն 5 րոպե: Թափանցիկ վերին նյութը նոսրացրեք արդյունահանման խառնուրդով (v/v: 1:10): Անվճար THC՝ 1 μL TLC-ափսեի վրա
Դեկարբոքսիլացում. 100 մկլ էքստրակտը գոլորշիացվում է մինչև չորանա: Մնացորդը տաքացնում են 180℃ ջերմաստիճանում 4 րոպե։ Ավելացնել 500 մկլ մեթանոլ-քլորոֆորմ (v/v 9:1): Sonicate 5 րոպե: Թափանցիկ վերին նյութը նոսրացրեք արդյունահանման խառնուրդով (v/v: 1:10):
Կալիբրացիա՝ 20 նգ, 60 նգ, 100 նգ, 140 նգ
HPTLC:
TLC silica gel F-254, Merck 5729
TLC սկաներ II, ծրագրակազմ CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Էթիլացետատ՝ տոլուոլ՝ քլորոֆորմ = 3: 17: 0,25 (v/v/v)
Հետքրոմատոգրաֆիկ ածանցավորում. արագ կապույտ աղ 0,1% 0,1 M NaOH-ում
Դենսիտոմետրիա 550 նմ

Ուլտրաձայնային նմուշի նախապատրաստման արձանագրություն GC վերլուծության համար

Նմուշի պատրաստում. Չորացրած բուսանյութը ցրվում և մանրացվում է միատարր փոշի դառնալու համար: Արդյունահանման համար կանեփի բույսի 500 մգ փոշին և 10 մլ մեթանոլ-հեքսան խառնուրդը (9:1 հարաբերակցությունը) խառնվում են սրվակի մեջ: Sonication կարող է կիրառվել օգտագործելով a զոնդի տիպի ուլտրաձայնային սարք միկրո ծայրով, որ VialTweeter կամ ուլտրաձայնային բաժակի եղջյուր. Նմուշը 15-20 րոպեով արտահոսեք: Թափահարեք նմուշը և թողեք այն հանգստանա առնվազն 5 րոպե: Թափանցիկ վերին նյութը նոսրացրեք արդյունահանման խառնուրդով (v/v 1:20):
Դեկարբոքսիլացում՝ ներդիրում
Ներարկիչի ջերմաստիճանը 250℃
Կալիբրացիա՝ 5 նգ/մլ-ից մինչև 250 նգ/մլ
GC՝ HP 6890 5973 MSD և 7683 ավտոմատ նմուշառման ներարկում՝ 1 μL, առանց բաժանման ժամանակ՝ 2 րոպե:
Սյունակ՝ HP-5 MS, 30 մ, տրամագիծը՝ 250 մկմ, թաղանթի հաստությունը՝ 0,25 մկմ
Բեռնատար գազ՝ He, 35 psi, մշտական հոսք՝ 4 մլ/րոպե։
Ջեռոց՝ 100℃ 1 րոպե; ջերմաստիճանի բարձրացում 15℃/րոպե: մինչև 280℃; 280℃ 5 րոպե: MSD՝ SCAN՝ m/e 35 – 550 թ

Ուլտրաձայնային նմուշի նախապատրաստման արձանագրություն HPLC վերլուծության համար

Նմուշի պատրաստում (GC-ի պատրաստման անալոգը). Չորացրած բուսանյութը ցրվում և մանրացվում է միատարր փոշու: Արդյունահանման համար կանեփի բույսի 500 մգ փոշին և 10 մլ մեթանոլ-հեքսան խառնուրդը (9:1 հարաբերակցությունը) խառնվում են սրվակի մեջ: Sonication կարող է կիրառվել օգտագործելով a զոնդի տիպի ուլտրաձայնային սարք միկրո ծայրով, որ VialTweeter կամ ուլտրաձայնային բաժակի եղջյուր. Նմուշը 15-20 րոպեով արտահոսեք: Թափահարեք նմուշը և թողեք այն հանգստանա առնվազն 5 րոպե: Թափանցիկ վերին նյութը նոսրացրեք արդյունահանման խառնուրդով (v/v 1:20):

HPLC-DAD՝ Waters 2695 բաժանման մոդուլ? 2996 PAD ներարկում՝ 10 μL
Նախասյուն՝ LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Սյունակ՝ LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 մկմ (Merck 50829)
Էլուենտ՝ իզոկրատ 36% TEAP 25 մմոլ/լ, 64% ացետոնիտրիլի քանակականացում 210 նմ-ում
Կալիբրացիա՝ 0,001 – 0,10 մկգ/մլ
Կալիբրացիա՝ 0,01 – 0,50 μg/μL
Պահպանման ժամանակը՝ CBD-ի համար՝ 6,2 րոպե; CBN-ի համար՝ 8,0 րոպե; THC-ի համար՝ 9,4 րոպե; THC-A-ի համար՝ 11,0 րոպե
LOD՝ CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%