הכנת דגימה קולית לניתוח THC
- מיצוי אולטראסוני הוא שיטה מוכחת לייצור THC, אך ניתן להשתמש בו גם למטרות אנליטיות.
- אולטרסוניקציה היא שיטת הכנת דגימה נפוצה המשמשת לניתוח התוכן הכולל של THC במוצרי קנאביס.
- מיצוי קולי מוחל על הדגימות לפני ניתוח TLC, GC ו- HPLC.
מיצוי THC קולי
THC, או tetrahydrocannabinol (delta-9-tetrahydrocannabinol), הוא הכימיקל שגורם לרוב ההשפעות הפסיכולוגיות של מריחואנה. עבור זני הקנאביס, יכולים להיות יותר מ -400 זנים שונים ידועים. בהתאם לזן הקנאביס הספציפי, קנאביס יכול להכיל מעט כמו 0.3 wt% THC. בזנים אחרים, תכולת ה-THC יכולה להגיע עד 20 wt%.
כמו כן, מוצרי הקנאביס השונים משתנים באופן משמעותי: כך נע ריכוז ה-THC הממוצע במריחואנה בין 1% ל-5%; בחשיש תכולת ה-THC היא בין 5% ל-15%, ובשמן חשיש היא עומדת על 20% בממוצע. THC במינונים של מריחואנה הוא משתנה מאוד וככל שתכולת ה-THC במריחואנה נמוכה יותר, כך המשתמש חייב לצרוך יותר כדי לחוות את ההשפעות הרצויות.
הכנת דגימה קולית משמשת לניתוח תוכן ה- THC
- לבקרת איכות של מוצרי THC לפנאי,
- לקביעת איכות של מוצרי THC פרמצבטיים,
- להבחנה בין סמים קנבוס וסיבים-קנבוס.
עבור ניתוח THC, שיטות הכרומטוגרפיה הבאות משמשות בדרך כלל: כרומטוגרפיית שכבה דקה (TLC), כרומטוגרפיית גז (GC) וכרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC)
פרוטוקול הכנת דגימה קולית לניתוח TLC
הכנת הדגימה: להכנת הדגימות, החומר הצמחי המיובש חייב להיות macerated וטחינה לאבקה הומוגנית. עבור מיצוי קולי, 500mg של אבקת צמח הקנאביס ותערובת מתנול-כלורופורם 5mL (יחס של 9: 1) מעורבבים בבקבוקון. ניתן ליישם סוניקציה באמצעות אולטרסוניקטור עם Micro Tip, הסמל VialTweeter או האולטרסוני קופהורן. זמן הסוניק אורך כ-5 דקות. לאחר מכן, תן לדגימה לנוח לפחות 5 דקות. לדלל את supernatant ברור עם תערובת מיצוי (v/v: 1: 10). THC חינם: 1μL על צלחת TLC
Decarboxylation: 100μL של התמצית מתאדה ליובש. השאריות מחוממות ב-180 מעלות צלזיוס למשך 4 דקות. הוסף 500μL של מתנול-כלורופורם (v/v 9: 1). סוניק למשך 5 דקות. לדלל את supernatant ברור עם תערובת מיצוי (v/v: 1: 10).
כיול: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC סיליקה ג'ל F-254, Merck 5729
סורק TLC II, תוכנה CATS3, Camag Muttenz Eluens:
אתילקטאט : טולול : כלורופורם = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
נגזרת פוסטכרומטוגרפית: מלח כחול מהיר 0.1% ב 0.1 M NaOH
דנסיטומטריה ב 550 ננומטר
טטרהידרוקנבינול (Δ9-THC) לניתוח ומיצוי
פרוטוקול הכנת דגימה קולית לניתוח GC
הכנה לדוגמה: החומר הצמחי המיובש מואץ וטחון לאבקה הומוגנית. לצורך המיצוי, 500mg של אבקת צמח הקנאביס ותערובת מתנול-הקסאן 10mL (יחס של 9: 1) מעורבבים בבקבוקון. ניתן ליישם סוניקציה באמצעות מכשיר אולטראסוני מסוג בדיקה עם Micro Tip, הסמל VialTweeter או האולטרסוני קופהורן. סוניק את הדגימה למשך 15-20 דקות. נערו את הדגימה ותנו לה לנוח לפחות 5 דקות. לדלל את supernatant ברור עם תערובת מיצוי (v/v 1: 20).
Decarboxyliation: בעלון
טמפרטורת מזרק 250°C
כיול: 5 נ"ג/מיקרוליטר עד 250 נ"ג/מיקרוליטר
GC: HP 6890 עם 5973 MSD והזרקת דוגם אוטומטי 7683: 1μL, זמן מפוצל: 2 דקות.
עמודה: HP-5 MS, 30 מטר, קוטר 250 מיקרומטר, עובי סרט 0.25 מיקרומטר
גז מוביל: הוא, 35 psi, זרימה קבועה: 4 מ"ל / דקה.
תנור: 100 מעלות צלזיוס למשך דקה; עליית טמפרטורה של 15°C לדקה עד 280°C; 280°C למשך 5 דקות MSD: סריקה: m/e 35 – 550
פרוטוקול הכנת דגימה קולית לניתוח HPLC
הכנה לדוגמה (אנלוגי להכנת GC): החומר הצמחי המיובש הוא macerated ו טחון לאבקה הומוגנית. לצורך המיצוי, 500mg של אבקת צמח הקנאביס ותערובת מתנול-הקסאן 10mL (יחס של 9: 1) מעורבבים בבקבוקון. ניתן ליישם סוניקציה באמצעות אולטרסוניקטור מסוג בדיקה עם Micro Tip, הסמל VialTweeter או האולטרסוני קופהורן. סוניק את הדגימה למשך 15-20 דקות. נערו את הדגימה ותנו לה לנוח לפחות 5 דקות. לדלל את supernatant ברור עם תערובת מיצוי (v/v 1: 20).
VialTweeter להכנת דגימה קולית
קדם-עמודה: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
עמודה: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 מיקרומטר (Merck 50829)
Eluent: איזוקרטי 36% TEAP 25 mmol / L, 64% כימות acetonitrile ב 210nm
כיול: 0,001 – 0,10 מיקרוגרם/μL
כיול: 0,01 – 0.50 מיקרוגרם/μL
זמן שמירה: עבור CBD: 6,2 דקות; עבור CBN: 8,0 דקות; עבור THC: 9,4 דקות; עבור THC-A: 11.0 דקות
לוד: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200ST עם Micro-Tip לסוניק לדוגמה
ספרות/מקורות
- ורנר ברנהרד, פרנציסקה פניצ'קה, אלן ברוייה, פריזמה רגנשיט (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. אפליק 2006.
עובדות שכדאי לדעת
מריחואנה מורכב מהפרחים המיובשים והעלים והגבעולים העדינים של צמח הקנאביס הנקבי. זוהי הצורה הנפוצה ביותר והיא מכילה כ-3% עד 20% THC. צורות ספציפיות של מריחואנה מגיעות לתכולת THC של יותר מ-30%. מריחואנה היא חומר המקור לכל הזנים האחרים של מוצר קנאביס המכיל THC. כדי להמיר את הקנבינואיד הנפוץ ביותר, חומצה טטרהידרוקנבינולית (THCA), ל-THC פסיכואקטיבי, יש להתחיל בתהליך דה-קרבוילציה. לכן, הקנאביס ותמציות הקנאביס חייבים להיות מחוממים או מיובשים כדי לגרום לדקרבוקסילציה.
קיף הכוונה היא לאבקה, עשירה בטריכומות, המנופה מעלי ופרחי הקנאביס. הוא נצרך בצורת אבקה או דחוס ומשמש בעוגות חשיש.
חשיש או חשיש הוא עוגת שרף מרוכזת או כדור המיוצר מקיף לחוץ או מהשרף שנשרט מפני השטח של הצמח ומגולגל לכדורים. הוא מופיע בצבעים שונים משחור ועד חום זהוב בהתאם לטוהר ולמקור. ניתן לצרוך אותו דרך הפה או לעשן, למשל במקטרת, נרגילה, באנג, בוער, וופורייזר, באמצעות סכין חמה, לעשן בג'וינטים, לערבב אותו עם ניצני קנאביס או טבק, לעשן אותו כטוק בקבוקים או להשתמש בו כמרכיב במזון.
תמיסת קנאביס מתייחס תמצית של קנבינואידים באלכוהול. הקנבינואידים מופקים מצמח הקנאביס באמצעות משקאות חריפים בעלי עמידות גבוהה (בעיקר אלכוהול דגנים) ליצירת התמיסה.
שמן חשיש היא מטריצה שרף של קנבינואידים המיוצרים על ידי מיצוי ממס, שנוצרו למסה קשוחה או צמיגה. שמן חשיש הוא אחד ממוצרי הקנאביס החזקים ביותר בגלל הרמה הגבוהה של החומר הפסיכואקטיבי שבו. השימוש בשמן חשיש המופק בבוטאן ובפחמן דו-חמצני סופר-קריטי צבר לאחרונה פופולריות הולכת וגוברת.
חליטות מתייחסים לסוגים שונים של חליטות קנאביס הנבדלות זו מזו במגוון הרחב של ממיסים לא נדיפים שניתן להשתמש בהם לייצור עירוי קנאביס. כדי להכין עירוי כזה, חומר צמחי קנאביס מעורבב עם ממס ולאחר מכן לחוץ ומסונן כדי להעביר את השמנים מהצמח לתוך הממס. חמאת קקאו, חמאת חלב, שמן בישול, גליצרין ותכשירי לחות לעור הם ממסים נפוצים.
מריחואנה רפואית מתייחס לשימוש בצמח הקנאביס כטיפול צמחי המומלץ על ידי רופא, כמו גם THC סינתטי וקנבינואידים. שימוש זה דורש בדרך כלל מרשם, וההפצה נעשית בדרך כלל במסגרת המוגדרת בחוקים המקומיים. מספר מחקרים הראו כי השימוש בקנאביס או נגזרותיו פועל נגד בחילות והקאות הנגרמות על ידי כימותרפיה, כאבים נוירופתיים וטרשת נפוצה.