מטבולומיקה בסיוע סוניקציה בתפוקה גבוהה

מטבולומיקה היא תחום המחקר המשתמש בטכניקות בתפוקה גבוהה לאפיון ולכימות של מולקולות קטנות בנוזלים ביולוגיים שונים, כגון שתן, סרום, פלזמה, צואה ורוק, תוך חשיפת חתימות מטבוליות ייחודיות. הסוניקטור בתפוקה גבוהה UIP400MTP, המיועד לצלחות מרובות באריות, הוא כלי רב עוצמה לפירוק תאים בדגימות אלה, המקל על שחרור מטבוליטים לצורך אנליזה בהמשך התהליך. גישה מדויקת ואמינה זו חיונית למטבולומיקה, שבה תכנון מחקר מדויק, הכנת דגימות קפדנית, הגדרה מיטבית של פלטפורמת העבודה, ניתוח נתונים מקיף ופרשנות ביולוגית בעלת משמעות הם בעלי חשיבות עליונה. המטבולומיקה משתמשת הן בגישות ממוקדות, המתמקדות בקבוצות מסוימות של מולקולות כגון פחמימות, ליפידים וחומצות אמינו, והן בטכניקות לא ממוקדות, המספקות תמונה רחבה של הפרופילים המטבוליים בדגימה וחושפות את המורכבות הרבה של האיתות המטבולי.

הכנת דגימות בתפוקה גבוהה באמצעות הסוניקטור לצלחות בעלות 96 באריות UIP400MTP

השימוש בסוניקטור ללא מגע UIP400MTP בשילוב צלחות בעלות 96 באריות הוא שיטה יעילה להומוגניזציה ולמיצוי מטבוליטים בתפוקה גבוהה. מערך זה מונע מגע ישיר עם הדגימה ומפחית את הסיכון לזיהום צולב תוך עיבוד של דגימות מרובות בו־זמנית.

פרוטוקול שלב אחר שלב להומוגניזציה באמצעות הסוניקטור ל־96 באריות UIP400MTP

1. הכנת דגימות למטבולומיקה
   העברת הדגימות לבאריות: העבירו כל דגימה (למשל צואה, רקמת מעי או תוכן חלל המעי) לבארית נפרדת בצלחת בעלת 96 באריות או במיקרופלטה.
   ממס: ממסים אורגניים, כגון מתנול, אתנול, אצטוניטריל, כלורופורם ותערובותיהם (המימיות), חיוניים למיצוי מטבוליטים ומסייעים בשחרור מטבוליטים תוך־תאיים מהמטריצה התאית. השתמשו ב־100–300 µL של ממס לכל בארית, והקפידו על נפח מספיק לטבילה מלאה של הדגימה.
   תקנים פנימיים: לפי הצורך, הוסיפו תקנים פנימיים לכל בארית לצורך נרמול במהלך האנליזה המטבולומית בהמשך התהליך.
2. הכנת תווך הצימוד
   מפלס המים: הניחו את הצלחת בעלת 96 הבאריות על פלטפורמת הסוניקציה המלאה במים (תווך הצימוד), כמתואר במדריך.
3. הגדרת הפרמטרים של UIP400MTP
   הגדרות הספק: כוונו את המשרעת האולטרסונית ל־50–80% מההספק המרבי להומוגניזציה יעילה.
   מצב פולסים: הגדירו את מחזור הסוניקציה לפולסים לסירוגין (למשל, 30 שניות פעולה, 30 שניות הפסקה) כדי לאפשר קירור ולמנוע התחממות יתר של הדגימה.
   משך הזמן הכולל: 4–10 דקות, בהתאם למורכבות הדגימה ולקשיחותה.
   בקרת טמפרטורה: השתמשו במערכת קירור מעבדתית לשמירה על טמפרטורת מים של 4–8°C במהלך הסוניקציה, כדי להגן על מטבוליטים רגישים לחום.
4. תהליך הסוניקציה
   הפעילו את UIP400MTP לביצוע מחזורי סוניקציה.
   עקבו אחר התהליך באמצעות הממשק של UIP400MTP.
   אפקט הקוויטציה יבצע הומוגניזציה של הדגימות ויפרק תאים בתוך הבאריות, תוך שחרור מטבוליטים תוך־תאיים אל הממס.
5. לאחר הסוניקציה
   צנטריפוגציה: לאחר הסוניקציה, העבירו את תוכן הצלחת למבחנות איסוף במידת הצורך. בצעו צנטריפוגציה ב־4,000–6,000 × g במשך 10 דקות כדי להשקיע שאריות בלתי מסיסות וחומר תאי.
   איסוף הנוזל העליון: העבירו בזהירות את הנוזל העליון מכל בארית למבחנות או לצלחות חדשות לצורך אנליזה.
   ייבוש לפי הצורך: ייבשו את הנוזלים העליונים באמצעות מרכז בוואקום (למשל SpeedVac) אם נדרש ריכוז, ולאחר מכן המסו אותם מחדש בנפח קטן של הממס המתאים.

נצלו את קיבולת העיבוד בתפוקה גבוהה של הסוניקטור לצלחות מרובות באריות UIP400MTP והקלו על המחקר והאנליזה המטבולומיים שלכם!

עקרון הסוניקציה ללא מגע באמצעות UIP400MTP

ה-UIP400MTP מעביר גלים אולטרסוניים לבאריות של פלטה בעלת 96 באריות באופן עקיף דרך תווך צימוד (למשל, מים). גלים אלה יוצרים קוויטציה, המפרקת תאים ומשחררת מטבוליטים ללא מגע פיזי בין הגשושית של מכשיר הסוניקציה לבין הדגימה.

תכנון, ייצור וייעוץ – איכות תוצרת גרמניה

מכשירי הסוניקציה של Hielscher מוכרים בזכות תקני האיכות והתכנון הגבוהים ביותר שלהם. עמידות וקלות הפעלה מאפשרות שילוב חלק של מכשירי הסוניקציה שלנו במתקנים תעשייתיים. מכשירי הסוניקציה של Hielscher מתמודדים בקלות עם תנאים קשים וסביבות תובעניות.

Hielscher Ultrasonics היא חברה בעלת הסמכת ISO, והיא שמה דגש מיוחד על מכשירי סוניקציה בעלי ביצועים גבוהים, המשלבים טכנולוגיה מהמתקדמות ביותר וידידותיות למשתמש. כמובן, מכשירי הסוניקציה של Hielscher תואמים לדרישות CE ועומדים בדרישות UL, CSA ו-RoHs.