Ultraljudsprovförberedelse för THC-analys
- Ultraljudsextraktion är en beprövad metod för produktion av THC, men den kan också användas för analytiska ändamål.
- Ultraljud är en vanlig provberedningsmetod som används för analys av det totala innehållet av THC i cannabisprodukter.
- Ultraljudsextraktion appliceras på proverna före TLC-, GC- och HPLC-analys.
Ultraljud THC-extraktion
THC, eller tetrahydrocannabinol (delta-9-tetrahydrocannabinol), är den kemikalie som orsakar de flesta av marijuanas psykologiska effekter. För cannabisarten kan det finnas mer än 400 olika stammar är kända. Beroende på den specifika cannabissorten kan cannabis ha så lite som 0,3 viktprocent THC. I andra sorter kan THC-innehållet nå upp till 20 viktprocent.
De olika cannabisprodukterna varierar också avsevärt: Så varierar den genomsnittliga THC-koncentrationen i marijuana mellan 1 och 5 %; i hasch är THC-halten mellan 5 och 15 %, och i hascholja är den i genomsnitt 20 %. THC i rekreationsdoser av marijuana är mycket varierande och ju lägre THC-halten i marijuanan är, desto mer måste användaren konsumera för att uppleva de önskade effekterna.
Ultraljudsprovberedning används för att analysera THC-innehållet
- för kvalitetskontroll av THC-produkter för rekreationsbruk,
- för kvalitetsbestämning av farmaceutiska THC-produkter,
- för att skilja mellan läkemedelshampa och fiberhampa.
För THC-analys används ofta följande kromatografiska metoder: tunnskiktskromatografi (TLC), gaskromatografi (GC) och högpresterande vätskekromatografi (HPLC)
Ultraljudsprovförberedelseprotokoll för TLC-analys
Provberedning: För beredning av proverna måste det torkade växtmaterialet macereras och malas till ett homogent pulver. För ultraljudsextraktionen blandas 500 mg av cannabisväxtpulvret och 5 ml metanol-kloroformblandning (förhållandet 9: 1) i en injektionsflaska. Ultraljudsbehandling kan tillämpas med hjälp av en ultraljud med mikrospets, VialTweeter eller ultraljud Kopparhorn. Ultraljudsbehandlingen tar ca 5 min. Låt sedan provet vila i minst 5 minuter. Späd den klara supernatanten med extraktionsblandningen (v/v: 1: 10). Fri THC: 1μL på TLC-plattan
Dekarboxylering: 100 μL av extraktet förångas till torrhet. Återstoden värms upp vid 180 °C i 4 minuter. Tillsätt 500 μL metanol-kloroform (v/v 9: 1). Ultraljudsbehandling i 5 minuter. Späd den klara supernatanten med extraktionsblandningen (v/v: 1: 10).
Kalibrering: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC kiselgel F-254, Merck 5729
TLC scanner II, programvara CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Etylacetat : Toluol : Kloroform = 3 : 17 : 0,25 (v / v / v)
Postkromatografisk derivatisering: Snabbt blått salt 0,1 % i 0,1 M NaOH
Densitometri vid 550 nm
Ultraljudsprovförberedelseprotokoll för GC-analys
Provberedning: Det torkade växtmaterialet macereras och mals till ett homogent pulver. För extraktionen blandas 500 mg av cannabisväxtpulvret och 10 ml metanol-hexanblandning (förhållandet 9: 1) i en injektionsflaska. Ultraljudsbehandling kan tillämpas med hjälp av en ultraljudsenhet av sondtyp med mikrospets, VialTweeter eller ultraljud Kopparhorn. Ultraljudsbehandla provet i 15-20 minuter. Skaka provet och låt det vila i minst 5 min. Späd den klara supernatanten med extraktionsblandningen (v/v 1: 20).
Dekarboxyliering: i bipacksedeln
Injektortemperatur 250°C
Kalibrering: 5 ng/μL till 250 ng/μL
GC: HP 6890 med 5973 MSD och 7683 autosamplerinjektion: 1 μL, delad tid: 2 min.
Kolonn: HP-5 MS, 30 m, diameter 250 μm, filmtjocklek 0,25 μm
Bärgas: He, 35 psi, konstant flöde: 4 ml/min.
Ugn: 100°C i 1 min.; temperaturökning från 15 °C/min till 280 °C; 280 °C i 5 min. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Ultraljudsprovförberedelseprotokoll för HPLC-analys
Provberedning (analog till GC-prep): Det torkade växtmaterialet macereras och mals till ett homogent pulver. För extraktionen blandas 500 mg av cannabisväxtpulvret och 10 ml metanol-hexanblandning (förhållandet 9: 1) i en injektionsflaska. Ultraljudsbehandling kan tillämpas med hjälp av en ultraljud av sondtyp med mikrospets, VialTweeter eller ultraljud Kopparhorn. Ultraljudsbehandla provet i 15-20 minuter. Skaka provet och låt det vila i minst 5 min. Späd den klara supernatanten med extraktionsblandningen (v/v 1: 20).

VialTweeter för förberedelse av ultraljudsprov
Förkolonn: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Kolumn: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Eluent: isokratisk 36 % TEAP 25 mmol/L, 64 % acetonitrilkvantifiering vid 210 nm
Kalibrering: 0,001 – 0,10 μg/μL
Kalibrering: 0,01 – 0,50 μg/μL
Retentionstid: för CBD: 6,2 min.; för CBN: 8,0 min.; för THC: 9,4 min.; för THC-A: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%

UP200St med mikrospets för prov ultraljudsbehandling
Litteratur/Referenser
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Applica 2006.
Fakta som är värda att veta
cannabis består av de torkade blommorna och de subtila bladen och stjälkarna från den kvinnliga cannabisväxten. Detta är den mest konsumerade formen och den innehåller cirka 3 % till 20 % THC. Specifika, högförädlade former av marijuana når en THC-halt på mer än 30 %. Marijuana är källmaterialet för alla andra sorter av THC-innehållande cannabisprodukter. För att omvandla den vanligaste cannabinoiden, tetrahydrocannabinolsyra (THCA), till den psykoaktiva THC, måste en dekarboyleringsprocess initieras. Därför måste cannabis och dess extrakt värmas upp eller dehydreras för att orsaka dekarboxylering.
kief kief hänvisar till ett pulver, rikt på trikomer, som siktas från cannabisblad och blommor. Den konsumeras antingen i pulverform eller komprimeras och används i haschkakor.
hasch eller hash är en koncentrerad hartskaka eller boll som antingen tillverkas av pressad kief eller av hartset som skrapas från växtens yta och rullas till bollar. Den förekommer i olika färger från svart till gyllenbrun beroende på renhet och källa. Den kan konsumeras oralt eller rökas, t.ex. i en pipa, vattenpipa, bong, bubblare, förångare, med hjälp av en varm kniv, rökas i jointar, blandas med cannabisknoppar eller tobak, rökas som flaskbloss eller användas som ingrediens i mat.
cannabis tinktur hänvisar till extraktet av cannabinoider i alkohol. Cannabinoiderna extraheras från cannabisväxten med hjälp av högsäker sprit (mestadels spannmålsalkohol) för att skapa tinkturen.
hash olja är en hartsartad matris av cannabinoider som produceras genom lösningsmedelsextraktion, formad till en härdad eller viskös massa. Hascholja är en av de mest potenta cannabisprodukterna på grund av dess höga nivå av psykoaktiva föreningar. Användningen av hascholja extraherad i butan och superkritisk koldioxid har nyligen vunnit en ökande popularitet.
Infusioner hänvisar till olika typer av cannabisinfusioner som skiljer sig från varandra genom det stora utbudet av icke-flyktiga lösningsmedel som kan användas för att producera en cannabisinfusion. För att förbereda en sådan infusion blandas cannabisväxtmaterial med ett lösningsmedel och pressas och filtreras sedan för att överföra oljorna från växten till lösningsmedlet. Kakaosmör, mejerismör, matolja, glycerin och hudfuktighetskräm är vanliga lösningsmedel.
medicinsk marijuana hänvisar till användningen av cannabisväxten som en läkarrekommenderad örtterapi samt syntetisk THC och cannabinoider. Denna användning kräver i allmänhet ett recept, och distribution sker vanligtvis inom ett ramverk som definieras av lokala lagar. Flera forskningsstudier har visat att användningen av cannabis eller dess derivat verkar mot t.ex. kemoterapiinducerat illamående och kräkningar, neuropatisk smärta och multipel skleros.