Detașarea celulelor cu ultrasunete

Detașarea celulelor cu ultrasunete este o tehnică extrem de eficientă și fiabilă de pregătire a probelor, utilizată în diferite domenii ale biologiei celulare și biotehnologiei. Folosind unde ultrasonice, placa sonicator multi-puț UIP400MTP detașează celulele aderente de pe suprafețele culturii și pregătește suspensiile celulare pentru aplicații în aval. Sonicare oferă mai multe avantaje față de tehnicile tradiționale de detașare enzimatică, chimică și mecanică, făcându-l un instrument valoros pentru cercetători.

Principiul detașării celulelor cu ultrasunete

Detașarea celulelor cu ultrasunete se bazează pe utilizarea ultrasunetelor de putere pentru a perturba interacțiunile dintre celule și substratul la care sunt atașate. Undele ultrasonice generează microbule, cavitație acustică și vibrații în mediul de cultură, producând forțe mecanice care dislocă ușor, dar eficient, celulele. Acest proces se realizează de obicei folosind UIP400MTP sonicator fără contact pentru plăci cu mai multe godeuri.

Mai jos, găsiți o instrucțiune exemplară pentru detașarea celulelor folosind placa sonicator cu mai multe puțuri UIP400MTP.
 

Echipamente și materiale pentru detașarea celulelor cu ultrasunete

• Sonicator fără contact pentru plăci cu mai multe godeuri UIP400MTP: Acest sonicator cu randament ridicat este instrumentul cheie. Placa sonicator UIP400MTP este potrivit pentru orice plăci standard multi-godeu și microtitrare, precum și pentru feluri de mâncare Petri. Undele cu ultrasunete furnizează energia mecanică necesară pentru detașarea celulelor.
• Plăci de cultură celulară sau vase Petri: Vasele standard utilizate pentru creșterea culturilor celulare aderente.
• Mediul de cultură: Mediul lichid în care celulele sunt cultivate și întreținute.
• PBS steril (soluție salină tamponată cu fosfat): Folosit pentru spălarea celulelor înainte de detașare.
• Tuburi de colectare: Pentru colectarea suspensiei celulare detașate.

Protocol pentru detașarea cu ultrasunete folosind placa Sonicator UIP400MTP

1. Pregătire
   – Asigurați-vă că toate echipamentele sunt curate și sterile pentru a preveni contaminarea.
   – Preîncălziți mediul de cultură și PBS la temperatura corespunzătoare (de obicei 37 ° C).
2. Spălarea celulelor
   – Se aspiră mediul de cultură din balonul sau placa de cultură celulară.
   – Se spală ușor celulele cu PBS steril pentru a îndepărta orice mediu rezidual și celulele detașate.
3. Sonicare
   – Se adaugă un volum mic de PBS sau mediu de cultură proaspăt în balon sau placă pentru a acoperi monostratul celular.
   – Așezați vasul sau placa Petri în sonicatorul UIP400MTP.
   – Sonicate pentru o durată specificată, de obicei variind de la câteva secunde la câteva minute, în funcție de tipul de celulă și puterea de atașare.
4. Colectarea suspensiei celulare
   – După sonicare, observați celulele sub microscop pentru a asigura detașarea.
   – Se pipetează ușor suspensia celulară pentru a colecta celulele detașate.
   – Transferați suspensia într-un tub de colectare.
5. Procesare post-detașare
   – Dacă este necesar, se centrifughează suspensia celulară pentru concentrarea celulelor.
   – Se omogenizează celulele într-un mediu de cultură proaspăt sau într-un tampon pentru aplicații în aval.

Note: Parametrii (cum ar fi timpul sonicare și intensitatea) trebuie să fie optimizate pentru diferite tipuri de celule pentru a evita deteriorarea celulelor. Unele tipuri delicate de celule pot fi mai sensibile la tratamentul cu ultrasunete, necesitând o optimizare atentă.

Aplicații practice ale detașării celulelor cu ultrasunete

Detașarea celulelor cu ultrasunete este utilizată în diverse cercetări și setări clinice:

1. Citometrie în flux: Pregătirea suspensiilor unicelulare pentru analiză.
2. Teste de numărare a celulelor și de viabilitate: Detașarea celulelor pentru numărarea precisă și evaluarea viabilității.
3. Subcultură: Transferul celulelor dintr-un vas de cultură în altul.
4. Experimente de biologie moleculară: Izolarea celulelor pentru ADN, ARN și extracția proteinelor.

Citiți aici cum este utilizat sonicatorul UIP400MTP cu plăci cu 96 de godeuri pentru dislocarea biofilmului în teste de biofilm, cum ar fi protocolul ASTM E2799!

De ce ar trebui să înlocuiesc răzuirea celulară prin detașarea celulelor cu UIP400MTP sonciator cu microplăci?

Înlocuirea răzuirii celulare cu detașarea celulelor folosind sonicatorul cu microplăci UIP400MTP oferă cercetătorilor mai multe avantaje. Spre deosebire de răzuirea manuală, sonicarea controlabilă cu precizie cu UIP400MTP asigură o detașare uniformă și ușoară a celulelor, minimizând deteriorarea mecanică și păstrând viabilitatea celulelor. UIP400MTP oferă un control precis asupra parametrilor de sonicare, permițând un tratament uniform în toate godeurile și eliminând variabilitatea între probe. Această metodă este mai rapidă, mai eficientă și mai scalabilă, ceea ce o face ideală pentru aplicații cu randament ridicat, menținând în același timp reproductibilitatea și integritatea culturilor celulare sensibile. Găsiți studiul comparativ aici!