محاليل منظمة مُحضَّرة بالمعالجة بالموجات فوق الصوتية
يمكن تحضير المحاليل المنظمة للتحلل الخلوي بكفاءة وسرعة باستخدام مجانسات الأنسجة بالموجات فوق الصوتية. ولأن أجهزة المعالجة بالموجات فوق الصوتية أداة مثالية للخلط والإذابة والتشتيت، فإنها تتيح تحضير المحاليل المنظمة للتحلل الخلوي بطريقة موثوقة وسهلة الاستخدام.
تحضير المحاليل المنظمة للتحلل الخلوي بالموجات فوق الصوتية
تُعد مجانسات الأنسجة بالموجات فوق الصوتية أداة شائعة لتفكيك الخلايا وتحللها والاستخلاص، ولذلك تتوفر في معظم المختبرات. ومن التطبيقات الثانوية لأجهزة المعالجة بالموجات فوق الصوتية ذات المسبار تحضير المحاليل المنظمة للتحلل الخلوي.
المحلول المنظم للتحلل الخلوي هو محلول يُستخدم لفتح الخلايا عن طريق تحللها وإطلاق محتوياتها لإجراء التحليلات اللاحقة. ويمكن أن يختلف التركيب المحدد للمحلول المنظم للتحلل الخلوي باختلاف نوع الخلايا المراد تحليلها والتطبيق اللاحق. ومع ذلك، يحتوي المحلول المنظم النموذجي للتحلل الخلوي على مكونات مثل المنظفات والأملاح ومثبطات البروتياز. وتُستخدم عادةً الأملاح المنظمة (مثل Tris-HCl) والأملاح الأيونية (مثل NaCl) لضبط الأس الهيدروجيني والأسمولارية لمستخلص التحلل الخلوي.
لتحضير محلول منظم للتحلل الخلوي، تُخلط المكونات معًا بالتراكيز المناسبة وعند الأس الهيدروجيني المناسب. وعادةً ما يُحرَّك المزيج أو يُرجّ حتى تذوب المكونات ويصبح المحلول متجانسًا.
التجنيس بالموجات فوق الصوتية طريقة يمكن استخدامها للمساعدة في تحضير محلول منظم جيد للتحلل الخلوي من خلال تحسين خلط المكونات وإذابتها. وفي هذه الطريقة، تُطبَّق موجات فوق صوتية – عادةً في نطاق 20 إلى 30 kHz – على المزيج، مما يُنشئ فقاعات تجويف تنهار وتولِّد طاقة موضعية شديدة، تؤدي إلى القص الميكانيكي وخلط المكونات.
يمكن أن تساعد عملية التجنيس بالموجات فوق الصوتية على تفكيك أي كتل أو تجمعات للمكونات، وضمان خلط المحلول بصورة موحدة. وبالتالي، يمكن أن يؤدي هذا المحلول المنظم المحسَّن للتحلل الخلوي إلى تفكيك الخلايا بكفاءة أعلى وزيادة مردود المادة المستخلصة. إضافةً إلى ذلك، يمكن أن يقلل التجنيس بالموجات فوق الصوتية الوقت اللازم لتحضير محلول منظم للتحلل الخلوي مقارنةً بطرق التحريك أو الرجّ التقليدية.
وبوجه عام، يُعد التجنيس بالموجات فوق الصوتية أداة فعالة لتحسين جودة تحضير المحاليل المنظمة للتحلل الخلوي وكفاءته.
المجانس المختبري بالموجات فوق الصوتية UP200Ht شائع الاستخدام في مختبرات الأبحاث لتحضير العينات والتحلل الخلوي والاستخلاص وتجزئة DNA والإذابة.
بروتوكول تحضير المحلول المنظم للتحلل الخلوي بالموجات فوق الصوتية
هذا بروتوكول عام لتحضير محلول منظم للتحلل الخلوي باستخدام جهاز معالجة بالموجات فوق الصوتية ذي مسبار:
المواد:
- منظف أو منظفات حسب الاختيار (مثل Triton X-100 وSDS وCHAPS)
- ملح أو أملاح حسب الاختيار (مثل NaCl وKCl)
- مثبطات البروتياز (مثل PMSF والأبروتينين والليوبيبتين)
- جهاز معالجة بالموجات فوق الصوتية
- جهاز تحريك
- ماء منزوع الأيونات
- مقياس الأس الهيدروجيني أو شرائط قياس الأس الهيدروجيني
التعليمات خطوة بخطوة:
- حدِّد تركيب المحلول المنظم للتحلل الخلوي بناءً على الخلايا أو الأنسجة التي ستُحلِّلها، والتطبيقات اللاحقة التي ستستخدم مستخلص التحلل الخلوي فيها. حضِّر المحاليل المخزونة للمنظفات والأملاح ومثبطات البروتياز بالتراكيز المطلوبة.
- أضف المحاليل المخزونة للمنظفات والأملاح ومثبطات البروتياز إلى كأس مخبري أو دورق.
- أضف الماء منزوع الأيونات للوصول إلى الحجم المطلوب من المحلول المنظم.
- اخلط المكونات باستخدام جهاز تحريك للحصول على محلول مخلوط مبدئيًا.
- قِس الأس الهيدروجيني للمحلول المنظم باستخدام مقياس الأس الهيدروجيني أو شرائط قياس الأس الهيدروجيني، واضبطه حسب الحاجة بإضافة كميات صغيرة من حمض أو قاعدة.
- استخدم جهاز المعالجة بالموجات فوق الصوتية ذا المسبار لتجنيس المحلول المخلوط مبدئيًا بحيث تحصل على محلول عالي التجانس. ولتحقيق ذلك، عالِج المحلول بالموجات فوق الصوتية لبضع ثوانٍ حتى يمتزج تمامًا وتتفكك أي كتل أو تجمعات. ويمكن تحسين مدة المعالجة بالموجات فوق الصوتية وقدرتها وفقًا للمحلول المنظم المحدد للتحلل الخلوي وجهاز المعالجة بالموجات فوق الصوتية المستخدم.
- بعد المعالجة بالموجات فوق الصوتية، أعد قياس الأس الهيدروجيني للمحلول المنظم واضبطه حسب الحاجة.
- رشِّح المحلول المنظم عبر مرشح بمقاس مسام 0.2 ميكرون لإزالة أي حطام أو تجمعات قد تكون تشكلت أثناء المعالجة بالموجات فوق الصوتية.
- أصبح المحلول المنظم للتحلل الخلوي جاهزًا للاستخدام الآن.
ملاحظة: يمكن أن يختلف التركيب الدقيق والأس الهيدروجيني للمحلول المنظم للتحلل الخلوي باختلاف الخلايا أو الأنسجة المراد تحليلها والتطبيقات اللاحقة. والبروتوكول أعلاه إرشادات عامة وقد يحتاج إلى تحسين ليلائم تطبيقات محددة.
تُستخدم المجانسات بالموجات فوق الصوتية عادةً لتفكيك الخلايا واستخلاص الجزيئات الموجودة داخلها. ولذلك تستخدم العديد من تطبيقات التحلل الخلوي المعالجة بالموجات فوق الصوتية باستخدام مسبار لتحضير المحلول المنظم للتحلل الخلوي، وكذلك لتفكيك الخلايا ميكانيكيًا والاستخلاص.
وهذا يجعل مجانسات الأنسجة بالموجات فوق الصوتية أداة متعددة الاستخدامات للمختبرات، ويفسر الاستخدام الواسع لأجهزة المعالجة بالموجات فوق الصوتية في علم الأحياء الدقيقة والتكنولوجيا الحيوية وعلوم الحياة.
مجانسات مختبرية بالموجات فوق الصوتية
تصنِّع Hielscher Ultrasonics وتورِّد مجانسات بالموجات فوق الصوتية ومسابير (سونوترودات) بقدرات مختلفة ولأحجام عينات متنوعة. وهذا يتيح لنا أن نقدم لك أنسب جهاز لتفكيك الخلايا بالموجات فوق الصوتية لتحضير عيناتك. ونركز على أعلى مستويات الجودة والراحة الفائقة للمستخدم والنتائج الموثوقة للمعالجة بالموجات فوق الصوتية. وتتميز جميع أجهزة المعالجة الرقمية بالموجات فوق الصوتية ببرمجيات ذكية، وإمكانية برمجة بروتوكولات المعالجة بالموجات فوق الصوتية وضبطها مسبقًا، والتحكم عن بُعد عبر المتصفح، والتحكم في درجة الحرارة، وإضاءة العينات، وكذلك التسجيل التلقائي للبيانات على بطاقة SD مدمجة.
التصميم والتصنيع والاستشارات – جودة صُنعت في ألمانيا
تشتهر أجهزة المعالجة بالموجات فوق الصوتية من Hielscher بأعلى معايير الجودة والتصميم. وتتيح المتانة وسهولة التشغيل دمج أجهزتنا للمعالجة بالموجات فوق الصوتية بسلاسة في المنشآت الصناعية. وتتعامل أجهزة المعالجة بالموجات فوق الصوتية من Hielscher بسهولة مع الظروف القاسية والبيئات ذات المتطلبات العالية.
Hielscher Ultrasonics شركة حاصلة على شهادة ISO، وتولي اهتمامًا خاصًا بأجهزة المعالجة بالموجات فوق الصوتية عالية الأداء التي تتميز بأحدث التقنيات وسهولة الاستخدام. وبالطبع، تتوافق أجهزة المعالجة بالموجات فوق الصوتية من Hielscher مع CE وتلبي متطلبات UL وCSA وRoHs.
يقدم لك الجدول أدناه نظرة عامة على أجهزتنا المختبرية المختلفة للمعالجة بالموجات فوق الصوتية:
| VialTweeter مع UP200St | 200W | 26kHz | المعالجة بالموجات فوق الصوتية للقوارير الصغيرة، مثل Eppendorf 1.5mL |
| UP50H | 50W | 30kHz | مجانس مختبري محمول باليد أو مثبَّت على حامل |
| UP100H | 100W | 30kHz | مجانس مختبري محمول باليد أو مثبَّت على حامل |
| UP200Ht | 200W | 26kHz | مجانس مختبري محمول باليد أو مثبَّت على حامل |
| UP200St | 200W | 26kHz | مجانس مختبري مثبَّت على حامل |
| UP400St | 400W | 24kHz | مجانس مختبري مثبَّت على حامل |
| SonoStep | 200W | 26kHz | مفاعل مختبري يجمع بين المعالجة بالموجات فوق الصوتية ومضخة وجهاز تحريك ووعاء |
| GDmini2 | 200W | 26kHz | خلية التدفق الخالية من التلوث |
| CupHorn | 200W | 26kHz | حمام بالموجات فوق الصوتية شديد التأثير للقوارير والكؤوس المخبرية |
| UIP400MTP | 400W | 24kHz | نظام بالموجات فوق الصوتية للصفائح متعددة الآبار / صفائح المعايرة الدقيقة |
cuphorn بالموجات فوق الصوتية للمعالجة المكثفة بالموجات فوق الصوتية للأنابيب والقوارير المغلقة من أجل تجنيس العينات في ظروف معقمة.
اتصل بنا! / اسألنا!
المجانس المختبري بالموجات فوق الصوتية UP400St يُستخدم عادةً لتحضير المحلول المنظم للتحلل الخلوي وتفكيك الخلايا لاحقًا.
المؤلفات / المراجع
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
تصنِّع Hielscher Ultrasonics مجانسات بالموجات فوق الصوتية عالية الأداء تتراوح أحجامها من الحجم المختبري إلى الحجم الصناعي.