Ultrazvočna priprava vzorca za analizo THC
- Ultrazvočna ekstrakcija je dokazana metoda za proizvodnjo THC, vendar se lahko uporablja tudi za analitične namene.
- Ultrasonication je običajna metoda priprave vzorcev, ki se uporablja za analizo skupne vsebnosti THC v izdelkih iz konoplje.
- Ultrazvočna ekstrakcija se uporablja za vzorce pred analizo TLC, GC in HPLC.
Ultrazvočna ekstrakcija THC
THC, or tetrahydrocannabinol (delta-9-tetrahydrocannabinol), is the chemical that causes most of marijuana’s psychological effects. For the cannabis species, can be more than 400 different strains are known. Depending on the specific cannabis strain, cannabis can have as little as 0.3 wt% THC. In other strains, the THC content can reach up to 20 wt%.
Tudi različni izdelki iz konoplje se zelo razlikujejo: tako se povprečna koncentracija THC v marihuani giblje med 1 in 5%; v hašišu je vsebnost THC med 5 in 15%, v hašišem olju pa povprečno 20%. THC v rekreacijskih odmerkih marihuane je zelo spremenljiv in nižja kot je vsebnost THC v marihuani, več mora uporabnik zaužiti, da doživi želene učinke.
Ultrazvočna priprava vzorca se uporablja za analizo vsebnosti THC
- za nadzor kakovosti rekreacijskih izdelkov THC,
- za določanje kakovosti farmacevtskih izdelkov THC,
- za razlikovanje med konopljo in konopljo.
Za analizo THC se običajno uporabljajo naslednje kromatografske metode: tankoplastna kromatografija (TLC), plinska kromatografija (GC) in tekočinska kromatografija visoke ločljivosti (HPLC)
Ultrazvočni protokol za pripravo vzorca za analizo TLC
Priprava vzorca: Za pripravo vzorcev je treba posušeni rastlinski material macerirati in zmleti v homogen prah. Za ultrazvočno ekstrakcijo se v viali zmeša 500 mg prahu rastline konoplje in 5 ml mešanice metanola in kloroforma (razmerje 9: 1). Sonication se lahko uporablja z uporabo ultrazvočni aparat z mikro konico VialTweeter ali ultrazvočni Cuphorn. Čas ultrazvočnega razbijanja traja približno 5 min. Nato vzorec počiva vsaj 5 min. Prozorni supernatant razredčimo z ekstrakcijsko mešanico (v/v: 1 : 10). Prosti THC: 1 μl na TLC plošči
Dekarboksilacija: 100 μl ekstrakta se izhlapi do suhega. Ostanek segrevamo pri 180 °C 4 minute. Dodamo 500 μl metanola-kloroforma (v/v 9 : 1). Sonikirajte 5 min. Prozorni supernatant razredčimo z ekstrakcijsko mešanico (v/v: 1 : 10).
Kalibracija: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC silikagel F-254, Merck 5729
TLC skener II, programska oprema CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Etilacetat : toluol : kloroform = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Postkromatografska derivatizacija: hitra modra sol 0,1 % v 0,1 M NaOH
Denzitometrija pri 550 nm
Tetrahidrokanabinol (Δ9-THC) za analizo in ekstrakcijo
Ultrazvočni protokol za pripravo vzorca za analizo GC
Priprava vzorca: Posušeni rastlinski material maceriramo in zmeljemo v homogen prah. Za ekstrakcijo se v viali zmeša 500 mg prahu rastline konoplje in 10 ml mešanice metanola in heksana (razmerje 9 : 1). Sonication se lahko uporablja z uporabo ultrazvočna naprava tipa sonde z mikro konico VialTweeter ali ultrazvočni Cuphorn. Sonikirajte vzorec 15-20 min. Vzorec pretresite in pustite, da počiva vsaj 5 minut. Bistra supernatant razredčimo z ekstrakcijsko mešanico (v/v 1: 20).
Dekarboksilacija: v vložku
Temperatura injektorja 250 °C
Kalibracija: 5 ng/μL do 250 ng/μL
GC: HP 6890 s 5973 MSD in 7683 samodejnim vbrizgavanjem vzorčevalnika: 1 μL, čas brez delitev: 2 min.
Kolona: HP-5 MS, 30 m, premer 250 μm, debelina filma 0,25 μm
Nosilni plin: He, 35 psi, konstanten pretok: 4 ml? min.
Pečica: 100 ° C za 1 min.; povišanje temperature za 15 °C?min. do 280 °C; 280 °C za 5 min. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Ultrazvočni protokol za pripravo vzorca za analizo HPLC
Priprava vzorca (analogno pripravi GC): Posušeni rastlinski material maceriramo in zmeljemo v homogen prah. Za ekstrakcijo se v viali zmeša 500 mg prahu rastline konoplje in 10 ml mešanice metanola in heksana (razmerje 9 : 1). Sonication se lahko uporablja z uporabo ultrazvočni zvočnik tipa sonde z mikro konico VialTweeter ali ultrazvočni Cuphorn. Sonikirajte vzorec 15-20 min. Vzorec pretresite in pustite, da počiva vsaj 5 minut. Bistra supernatant razredčimo z ekstrakcijsko mešanico (v/v 1: 20).
VialTweeter za ultrazvočno pripravo vzorca
Predstolpec: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Stolpec: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Eluent: izokratični 36% TEAP 25 mmol/L, 64% kvantifikacija acetonitrila pri 210nm
Kalibracija: 0,001 – 0,10 μg/μl
Kalibracija: 0,01 – 0,50 μg/μL
Čas zadrževanja: za CBD: 6,2 min.; za CBN: 8,0 min.; za THC: 9,4 min.; za THC-A: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St z mikro konico za ultrazvočno razbijanje vzorcev
Literatura/Reference
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Aplikacija 2006.
Dejstva, ki jih je vredno vedeti
marihuana je sestavljen iz posušenih cvetov in podkrepljenih listov in stebel ženske rastline konoplje. To je najbolj razširjena oblika in vsebuje približno 3% do 20% THC. Specifične, visoko vzgojene oblike marihuane dosežejo vsebnost THC več kot 30%. Marihuana je izvorni material vseh drugih vrst izdelkov iz konoplje, ki vsebujejo THC. Za pretvorbo najbogatejšega kanabinoida, tetrahidrokanabinolne kisline (THCA), v psihoaktivni THC, je treba začeti postopek dekarboilacije. Zato je treba konopljo in njene izvlečke segreti ali dehidrirati, da se povzroči dekarboksilacija.
Kief se nanaša na prašek, bogat s trihomomi, ki se preseja iz listov in cvetov konoplje. Uživa se v obliki prahu ali stisnjen in se uporablja v hašišu.
hašiš Ali hash je koncentrirana smolna torta ali kroglica, ki se proizvaja iz stisnjenega kiefa ali iz smole, ki se strgajo s površine rastline in zvijejo v kroglice. Pojavlja se v različnih barvah od črne do zlato rjave, odvisno od čistosti in vira. Lahko se uživa peroralno ali dimljeno, npr. v cevi, nargili, bongu, mehurčku, vaporizerju, z vročim nožem, kadi v sklepih, pomeša s konopljinimi popki ali tobakom, kadi kot steklenica ali uporablja kot sestavina v hrani.
tinktura konoplje se nanaša na izvleček kanabinoidov v alkoholu. Kanabinoidi se pridobivajo iz rastline konoplje z uporabo visoko odpornih žganih pijač (večinoma žitnega alkohola) za ustvarjanje tinkture.
Hašišovo olje je smolnata matrica kanabinoidov, proizvedena z ekstrakcijo topil, oblikovana v utrjeno ali viskozno maso. Hash olje je eden najmočnejših izdelkov iz konoplje zaradi visoke vsebnosti psihoaktivne spojine. Uporaba hašišišnega olja, pridobljenega v butanu in superkritičnem ogljikovem dioksidu, je v zadnjem času postala vse bolj priljubljena.
Infuzije se nanašajo na različne vrste infuzij konoplje, ki se med seboj razlikujejo po široki paleti nehlapnih topil, ki se lahko uporabijo za proizvodnjo infuzije konoplje. Za pripravo takšne infuzije se rastlinska snov konoplje zmeša s topilom in nato stisne in filtrira, da se olja iz rastline prenesejo v topilo. Kakavovo maslo, mlečno maslo, jedilno olje, glicerin in vlažilci kože so pogosto uporabljena topila.
medicinska marihuana se nanaša na uporabo rastline konoplje kot zeliščne terapije, ki jo priporoča zdravnik, pa tudi sintetičnega THC in kanabinoidov. Ta uporaba na splošno zahteva recept, distribucija pa se običajno izvaja v okviru, ki ga določajo lokalni zakoni. Več raziskovalnih študij je pokazalo, da uporaba konoplje ali njenih derivatov deluje proti npr. slabosti in bruhanju, ki jih povzroča kemoterapija, nevropatski bolečini in multipli sklerozi.