Fragmentarea alfa-synuclein folosind VialTweeter Sonicator

Fibrilele și panglicile α-sinucleinei sunt fragmentate în cercetarea științifică pentru a genera fragmente fibrilare mai mici sau chiar molecule individuale de proteine, care pot fi analizate mai ușor folosind diverse tehnici experimentale. VialTweeter Sonicator este unul dintre cele mai frecvent utilizate ultrasonicators pentru fragmentarea eficientă și fiabilă alfa-synuclein.

α-Synuclein în cercetare

Fibrilele alfa-synuclein sunt agregate proteice care sunt puternic asociate cu tulburări neurodegenerative, cum ar fi boala Parkinson și anumite forme de demență, inclusiv demența cu corpi Lewy. Cercetarea axată pe fibrilele alfa-synuclein își propune să înțeleagă rolul lor în progresia bolii și să dezvolte intervenții terapeutice potențiale. Prin descompunerea fibrilelor alfa-synuclein în fragmente mai mici, cercetătorii pot investiga caracteristicile lor structurale specifice. De exemplu, fragmentarea fibrilelor alfa-synuclein permite cercetătorilor să investigheze interacțiunile lor cu alte molecule, cum ar fi proteinele, lipidele sau moleculele mici. Prin producerea de fragmente mai mici, locurile de legare și afinitatea pentru acești parteneri care interacționează pot fi cercetate mai eficient. Fribrilii și panglicile α-Syn mai mici pot prezenta, de asemenea, toxicitate modificată și efecte biochimice. Prin urmare, o tehnică de fragmentare fiabilă și eficientă, care produce rezultate reproductibile într-un tratament rapid și simplu al probei, este esențială.
Fragmentarea cu ultrasunete alfa-syn: Sonicator VialTweeter este sistemul de pregătire a probei cu ultrasunete stabilit, care sonicates până la 10 flacoane simultan în exact aceleași condiții. Setările programabile permit reluarea simplă și rapidă a acelorași experimente, ceea ce oferă rezultate extrem de fiabile și reproductibile în fragmentarea fibrilei alfa-synuclein.

α-Synuclein Pregătirea probei cu un sonicator

O abordare pentru studierea fibrilelor alfa-synuclein implică extracția și fragmentarea lor folosind tehnici cum ar fi sonicare. Sonicare este un proces care utilizează undele cu ultrasunete de înaltă intensitate, de joasă frecvență pentru a perturba și descompune agregatele proteice, ceea ce duce la eliberarea de fibrile mai mici sau molecule individuale de proteine. Sonicator VialTweeter este un dispozitiv frecvent utilizat în studiile de cercetare legate de α-synuclein în acest scop.

Numeroase studii de cercetare descriu protocoale precise de pregătire a probei de alfa-synuclein fibrile sonicare, care utilizează Hielscher VialTweeter pentru fragmentarea eficientă și fiabilă a fibrilei α-synuclein. Prin fragmentarea fibrilelor ultrasonically, cercetătorii pot analiza produsele rezultate și pot examina structura lor, toxicitatea și interacțiunile cu alte molecule. Această cercetare oferă perspective importante asupra mecanismelor care stau la baza neurodegenerării și identificarea potențială a unor noi ținte terapeutice. Protocoalele bine stabilite de sonicare α-synuclein folosind sonicatorul VialTweeter permit rezultate fiabile și reproductibile.

Imagini superioare: fibrile alfa-synuclein nefragmentate
Imagini inferioare: Ultrasonically fragmentate alfa-synuclein fibrile cu sonicator VialTweeter
(studiu și imagini: ©Dieriks et al., 2022)

Fragmentarea cu ultrasunete a fibrilelor α-synuclein – Protocoale

Deoarece numeroși cercetători folosesc sonicatorul VialTweeter ca tehnică preferată de fragmentare pentru a produce fragmente uniforme de fibrilă α-sinucleină, protocoalele stabilite sunt ușor disponibile. Mai jos puteți găsi câteva protocoale de fragmentare exemplare.
 

 
Pregătirea semințelor ClearTau: Fibrilele ClearTau au fost diluate la 10 μM în dH2O și sonicated la 70 % amplitudine pentru 50 s cu 1 s ON 1 s OFF ciclu in-tub folosind sonicator UP200St cu VialTweeter. Semințele au fost caracterizate prin microscopie electronică.
Măsurarea fluorescenței ThS: Fibrilele ClearTau au fost diluate la 2,5 μM în dH2O și sonicated la 70 % amplitudine pentru 50 s cu 1 s ON 1 s OFF ciclu in-tub folosind UP200St cu VialTweeter. Monomerul Tau 4R2N de lungime completă de 2,5 μM a fost utilizat ca control. La reacția de 100 μl, s-au adăugat 100 μl de ThS (10 μM), rezultând concentrații finale de proteine de 1,25 μM. Fluorescența ThS punctuală unică a fost măsurată folosind 96 de plăci inferioare bine transparente instalate în cititorul de microplăci FLUOstar Omega cu excitație la 445 nm și emisie la 485 nm.
(cf. Limorenko et al., 2023)
 
Lungime uniformă α-synuclein folosind sonicare: Eterogenitatea lungimii fibrilelor α-syn și panglici a fost redusă prin sonicare pentru 20 min pe gheață în tuburi Eppendorf de 2 ml într-un set VialTweeter la 75% amplitudine, 0,5 s impulsuri.
(cf. Bousset et al., 2013)
 
A fost efectuat controlul calității monomerilor monomerici recombinanți umani WT sau S129A a-Syn și a polimorfelor fibrilare pe care le generează, precum și cel al a-Syn 1-110. Ulterior, polimorfele fibrilare au fost fragmentate prin sonicare timp de 20 min în tuburi Eppendorf de 2 ml în ultrasonicator VialTweeter pentru a genera particule fibrilare cu o dimensiune medie de 42-52 nm, care sunt potrivite pentru endocitoză.
(cf. Shrivastava et al., 2020)
 

Caracterizarea a cinci polimorfe fibrilare α-Syn. (A) Sunt prezentate micrografii electronice de transmisie ale fibrilelor, panglicilor, fibrilelor-91, fibrilelor-65 și fibrilelor-110 colorate α negativ înainte (banda superioară) și după fragmentarea cu VialTweeter (banda inferioară). (B) Este prezentată distribuția lungimii polimorfelor fibrilare fragmentate. Este indicat numărul (n) de ansambluri fibrilare din care au fost derivate histogramele.
(studiu și imagini: Shrivastava et al., 2020)

 
Fibrilele α-Syn au fost fragmentate prin sonicare timp de 20 min în 2 ml tuburi Eppendorf într-un VialTweeter pentru a genera particule fibrilare cu o dimensiune medie 42-52 nm, așa cum a fost evaluat prin analiza TEM.
(cf. Negrini și colab., 2022)
 
Fibrilele resuspendate91 (în PBS) au fost fragmentate înainte de adăugarea la culturi celulare prin sonicare timp de 20 min în 2 mL tuburi Eppendorf folosind sonicatorul Vial Tweeter, alicotat, înghețat rapid în azot lichid și depozitat până la utilizare la -80 ̊C.
(cf. Vajhøj și colab., 2021)
 

VialTweeter și sonicatoare de laborator pentru fragmentarea α-syn

Hielscher Ultrasonics este recunoscut la nivel mondial ca producător de frunte de ultrasonicators de ultimă oră. De încredere și stabilit în laboratoare majore de cercetare din întreaga lume, ultrasonicators noastre oferă calitate și performanță de neegalat pentru experimentele critice.
Cu Hielscher VialTweeter și orice alt sonicator Hielscher, veți experimenta confortul utilizatorului de neegalat, deoarece acestea sunt proiectate cu grijă pentru rezultate reproductibile, ușurință în utilizare și funcționare fără probleme. Cu funcții automate de înregistrare a datelor, vă puteți concentra asupra cercetării în timp ce ultrasonicators noastre înregistrează meticulos date cruciale pentru reproductibilitate și precizie.
Obțineți rezultate consecvente și reproductibile cu încredere!
Ultrasonicators noastre sunt proiectate și fabricate în Germania. Precizie germană și cea mai înaltă calitate inginerească pentru a asigura pregătirea fiabilă și precisă a probei, cum ar fi fragmentarea fibrilei alfa-synuclein de fiecare dată. Nu vă mai faceți griji cu privire la rezultatele inconsecvente - tehnologia noastră cu ultrasunete vă asigură că cercetarea dvs. rămâne în fruntea progresului științific.
Dar asta nu este tot! Angajamentul nostru față de excelență se extinde dincolo de produsele noastre. Ne mândrim cu serviciul nostru excepțional pentru clienți, oferind asistență de specialitate pentru a răspunde oricăror întrebări sau preocupări pe care le aveți. Echipa noastră dedicată este aici pentru a vă ajuta la fiecare pas al călătoriei dvs. de cercetare, asigurându-vă că profitați la maximum de ultrasonicators noastre.
Alegeți inovația, fiabilitatea și experiența excepțională a utilizatorului - alegeți sonicatoarele noastre de laborator, cum ar fi VialTweeter pentru fragmentarea fibrilei alfa-synuclein. Beneficiați de protocoalele deja stabilite și alăturați-vă rândurilor cercetătorilor de vârf care au încredere în tehnologia noastră pentru studiile lor critice. Ridicați-vă cercetarea și explorați noi frontiere în cercetarea demenței și a bolilor neurodegenerative cu ultrasonicators noastre de ultimă generație.

Proiectare, fabricație și consultanță – Calitate Made in Germany

Hielscher ultrasonicators sunt bine-cunoscute pentru cele mai înalte standarde de calitate și design. Robustețea și funcționarea ușoară permit integrarea fără probleme a ultrasonicators noastre în instalații industriale. Condiții dure și medii solicitante sunt ușor de manipulat de ultrasonicators Hielscher.

Hielscher Ultrasonics este o companie certificată ISO și pune un accent deosebit pe ultrasonicators de înaltă performanță cu tehnologie de ultimă oră și ușurință în utilizare. Desigur, sonicatoare Hielscher sunt conforme CE și îndeplinesc cerințele UL, CSA și RoHs.
 
Tabelul de mai jos vă oferă o indicație a capacității aproximative de procesare a ultrasonicators noastre de dimensiuni de laborator: