إزاحة الأغشية الحيوية باستخدام UIP400MTP سونيكاتور عالي الإنتاجية
تعتبر الصوتيات عالية الإنتاجية المصممة للألواح متعددة الآبار وألواح 96 بئرا أدوات أساسية في أبحاث الأغشية الحيوية ، خاصة لإزاحة وإزالة الأغشية الحيوية من الآبار والأنابيب والدبابيس وأطباق بتري. هذه الصوتيات تسهل معالجة العديد من العينات في وقت واحد ، وتحسين الكفاءة والاتساق. UIP400MTP صوتي Hielscher عالي الإنتاجية هو مثالي لصوتنة لوحات متعددة الآبار ، لوحات 96 بئر ، عدة أنابيب أو أطباق بتري. يزيل الاهتزاز بالموجات فوق الصوتية والتجويف المنتظم الأغشية الحيوية بشكل موثوق من أسفل اللوحة. وهذا يجعل صوتنة الألواح متعددة الآبار UIP400MTP أداة تحضير العينات المثالية لإزالة الأغشية الحيوية ومقايسات الأغشية الحيوية وأبحاث البكتيريا والميكروبات.
UIP400MTP سونيكاتور متعدد الآبار لإزالة الأغشية الحيوية الرقيقة وإزالتها في تحضير العينات عالية الإنتاجية:
- الأغشية الحيوية البكتيرية
- الأغشية الحيوية حقيقية النواة
- الأغشية الحيوية الفطرية
- الأغشية الحيوية القديمة
- الأغشية الحيوية متعددة الميكروبات / الأغشية الحيوية المختلطة الأنواع
- الأغشية الحيوية للأسنان (البلاك)
- الأغشية الحيوية البحرية
- الأغشية الحيوية البيئية
- الأغشية الحيوية للأجهزة الطبية
- معلقات الخلايا المستزرعة
إزاحة الأغشية الحيوية الرقيقة وإزالتها باستخدام Sonication
تم تصميم UIP400MTP صوتي Hielscher عالي الإنتاجية من أجل صوتنة موثوقة وموحدة من لوحات متعددة الآبار و 96 بئرا. ضروري في أبحاث الأغشية الحيوية ، يوفر UIP400MTP صوتي متعدد الآبار تقنية موثوقة لإزاحة وإزالة الأغشية الحيوية من الألواح والأنابيب وأطباق بتري متعددة الآبار. السماح بإعداد عينة عالية الإنتاجية ، يعزز UIP400MTP كفاءة واتساق مقايسات الأغشية الحيوية والدراسات الأخرى ذات الصلة ، مما يجعل هذا الصوتي لا غنى عنه في كل من أبحاث علم الأحياء الدقيقة الأكاديمية والصناعية.
إزالة الأغشية الحيوية باستخدام صوتنة: بالنسبة لإزاحة الأغشية الحيوية ، يسمح للأغشية الحيوية بالتكون في آبار الصفيحة متعددة الآبار في ظل ظروف خاضعة للرقابة. ثم يتم وضع اللوحة في الصوتنة ، حيث يتم تعيين معلمات مثل الوقت والسعة والتردد وفقا للمتطلبات المحددة لنوع الأغشية الحيوية والأهداف التجريبية. تولد الموجات فوق الصوتية التجويف داخل كل بئر ، مما يؤدي إلى تعطيل مصفوفة الأغشية الحيوية بشكل فعال وإزاحة الخلايا.
تحضير العينة بالموجات فوق الصوتية للأغشية الحيوية: في مقايسات الأغشية الحيوية ، يكون للصوتيات عالية الإنتاجية العديد من التطبيقات. بعد صوتنة ، يمكن جمع خلايا الأغشية الحيوية المزاحة وقياسها باستخدام مقايسات مختلفة مثل تلطيخ البنفسج البلوري ، أو عد الخلايا القابلة للحياة ، أو قياس الكتلة الحيوية. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن معالجة الأغشية الحيوية بعوامل مضادة للميكروبات تليها صوتنة لتقييم فعالية هذه العوامل في تعطيل الأغشية الحيوية. تعد خلايا الأغشية الحيوية المخلوحة مفيدة أيضا للدراسات الجينومية والبروتينية ، حيث يمكن استخدامها لاستخراج الحمض النووي والحمض النووي الريبي والبروتين لمزيد من التحليل الجزيئي.
توفر الصوتيات عالية الإنتاجية العديد من المزايا. إنها تسمح بالمعالجة المتزامنة لعينات متعددة ، مما يوفر الوقت والعمالة ، ويضمن معالجة موحدة لجميع الآبار ، مما يقلل من التباين ويحسن استنساخ النتائج. هذه الأجهزة مناسبة أيضا للدراسات واسعة النطاق ، مما يتيح فحصا عالي الإنتاجية لتكوين الأغشية الحيوية والاضطراب والمعالجة.
أهمية إزالة الأغشية الحيوية بالموجات فوق الصوتية في أبحاث الأغشية الحيوية
تعد إزالة الأغشية الحيوية بالموجات فوق الصوتية أمرا بالغ الأهمية في أبحاث الأغشية الحيوية نظرا لفعاليتها واتساقها وكفاءتها وتعدد استخداماتها. إنه يضمن تعطيلا شاملا وموحدا للأغشية الحيوية ، مما يسهل التحليل الدقيق والقابل للتكرار في مختلف مقايسات الأغشية الحيوية. توفر هذه المقايسات ، بما في ذلك تلطيخ الكريستال البنفسجي ، وعد الخلايا القابل للحياة ، والتلألؤ الحيوي ATP ، وتقليل XTT ، والتحليل المجهري ، واستخراج الحمض النووي / البروتين ، رؤى شاملة حول تكوين الأغشية الحيوية ، والجدوى ، والبنية ، والاستجابة للعلاجات.
يعمل Sonication على إزاحة وإزالة الأغشية الحيوية الرقيقة بلطف من الركائز الصلبة مثل قيعان الألواح أو المسامير أو الأوتاد أو أغطية الغطاء.
- التعطيل الفعال للأغشية الحيوية:
التجويف: تخلق الموجات فوق الصوتية فقاعات تجويف تولد قوى قص قوية عند الانهيار ، مما يعطل بشكل فعال البنية المعقدة للأغشية الحيوية.
إزاحة شاملة: يضمن إزاحة خلايا الأغشية الحيوية تماما من الأسطح، وهو أمر بالغ الأهمية للقياس الكمي والتحليل الدقيق. - الاتساق والتكاثر:
علاج موحد: توفر الصوتيات عالية الإنتاجية توزيعا موحدا للطاقة بالموجات فوق الصوتية عبر جميع العينات ، مما يقلل من التباين ويحسن قابلية التكاثر.
التقييس: يتيح توحيد بروتوكولات تعطيل الأغشية الحيوية الرقيقة ، مما يؤدي إلى نتائج أكثر موثوقية وقابلة للمقارنة. - كفاءة:
قدرة إنتاجية عالية: تسمح بالمعالجة المتزامنة لعينات متعددة ، مما يوفر الوقت ويزيد الإنتاجية في دراسات الأغشية الحيوية.
الأتمتة: يمكن دمجها بسهولة في سير العمل الآلي ، مما يزيد من تعزيز الكفاءة وتقليل العمل اليدوي. - الحفاظ على الجدوى والنزاهة:
الظروف الخاضعة للرقابة: يمكن ضبط المعلمات مثل الوقت والشدة بدقة لتعطيل الأغشية الحيوية دون المساس بصلاحية الخلية أو سلامتها ، وهو أمر مهم للفحوصات اللاحقة. - براعه:
قابلية التطبيق على نطاق واسع: مناسبة لأنواع مختلفة من الأغشية الحيوية (البكتيرية والفطرية والأنواع المختلطة) ومتوافقة مع الأسطح والمواد المختلفة المستخدمة في أبحاث الأغشية الحيوية.
Hielscher الفوق صوتيات يقدم نماذج صوتيات مختلفة بما في ذلك صوتيات من نوع المسبار، صوتيات عدم الاتصال وصوتيات عالية الإنتاجية. تواصل معنا الآن! سيسعد خبراؤنا الفنيون بمناقشة متطلبات المعالجة الخاصة بك معك ويوصونك بأنسب صوتنة لتطبيق البيوفيلم الخاص بك.
الأدب / المراجع
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
الأسئلة المتداولة حول أبحاث الأغشية الحيوية
ما هي السقالة الأكثر شيوعا للأغشية الحيوية؟
السقالة الأكثر شيوعا للأغشية الحيوية في الأبحاث المختبرية هي لوحة المعايرة الدقيقة. تستخدم ألواح المعايرة الدقيقة ، وخاصة تنسيق 96 بئرا ، على نطاق واسع نظرا لتعدد استخداماتها وسهولة استخدامها وتوافقها مع التقنيات التحليلية المختلفة.
ما هي أفضل لوحة 96 بئرا للأغشية الحيوية؟
تعتمد أفضل لوحة من 96 بئرا لدراسات الأغشية الحيوية على عدة عوامل بما في ذلك نوع الأغشية الحيوية الرقيقة قيد الدراسة، والإعداد التجريبي، والمتطلبات المحددة للبحث. ومع ذلك ، فإن بعض لوحات 96 بئرا الموصى بها بشكل شائع لدراسات الأغشية الحيوية هي:
- لوحة Corning® Costar® 3596 ذات القاع المسطح الشفاف 96 بئرا: غالبا ما تستخدم هذه اللوحة نظرا لوضوحها البصري العالي ، وهو أمر مفيد للتصوير والمقايسات الطيفية.
- لوحات Nunc™ MicroWell™ 96-Well: تشتهر هذه الألواح بأبعادها الموحدة للبئر ووضوحها البصري العالي. وهي متوفرة في معالجات سطحية مختلفة لدعم أنواع مختلفة من زراعة الخلايا.
- Greiner Bio-One CELLSTAR® 96-Well Microplate: تستخدم هذه الصفيحة بشكل متكرر في دراسات الأغشية الحيوية بسبب جودتها المتسقة من بئر إلى بئر وتوافرها في الطلاءات السطحية المختلفة ، مثل الأسطح المعالجة بزراعة الأنسجة أو الأسطح منخفضة الربط.
- ألواح 96 بئرا سوداء / شفافة القاع: بالنسبة للدراسات التي تتطلب قياسات مضان أو تلألؤ ، تعتبر الألواح السوداء ذات القيعان الشفافة (على سبيل المثال ، Corning® 3603) مثالية لأنها تقلل من الحديث المتبادل بين الآبار وتحسن اكتشاف الإشارة.
- الألواح المطلية الكارهة للماء أو المحبة للماء: اعتمادا على طبيعة الأغشية الحيوية والكائنات الحية الدقيقة ، يمكن أن تكون الألواح ذات الطلاءات المحددة التي تعزز أو تمنع الالتصاق مفيدة. على سبيل المثال ، قد تكون الصفائح الكارهة للماء مناسبة للأغشية الحيوية التي تشكلها بعض البكتيريا.
- لوحات خاصة بالأغشية الحيوية: تقدم بعض الشركات المصنعة لوحات مصممة خصيصا لأبحاث الأغشية الحيوية. غالبا ما يكون لهذه الصفائح خصائص سطحية محسنة تعزز تكوين الأغشية الحيوية ويتم تحسينها لفحوصات الأغشية الحيوية.
عند اختيار صفيحة 96 بئرا لدراسات الأغشية الحيوية ، ضع في اعتبارك المعايير التالية:
- المواد والمعالجة السطحية: اختر مادة الصفيحة والمعالجة السطحية التي تدعم التصاق ونمو الكائنات الحية الدقيقة المكونة للأغشية الحيوية التي تدرسها.
الوضوح البصري: بالنسبة للفحوصات التي تتضمن قياسات بصرية ، تأكد من أن اللوحة تتمتع بوضوح بصري عالي. - تصميم جيد: ضع في اعتبارك شكل وعمق الآبار ، والتي يمكن أن تؤثر على نمو الأغشية الحيوية وفعالية المعالجات أو القياسات اللاحقة.
- التوافق مع المعدات: تأكد من أن اللوحة متوافقة مع جهاز الصوتنة والحاضنة وأي معدات أخرى مستخدمة في دراستك. جهاز صوتنة لوحة الآبار المتعددة Hielscher متوافق مع جميع لوحات microtiter القياسية ومتعددة الآبار.
في النهاية ، سيعتمد الخيار الأفضل على المتطلبات المحددة لأبحاث الأغشية الحيوية وخصائص الكائنات الحية الدقيقة المعنية.
ما هي مقايسات الأغشية الحيوية النموذجية المستخدمة في البحث؟
في البحث والتشخيص ، يتم استخدام أنواع مختلفة من المقايسات لفحص وتصنيف الأغشية الحيوية. Sonication هي خطوة شائعة لإعداد العينة لإزالة الغشاء الحيوي من ركيزته الصلبة مما يجعل الغشاء الحيوي متاحا للمقايسات والتحليل.
- تلطيخ الكريستال البنفسجي:
الغرض: تحديد الكتلة الحيوية الأغشية الحيوية الكلية للغشاء الحيوي.
الطريقة: يتم تلطيخ الأغشية الحيوية بصبغة بنفسجية بلورية ، ثم يتم إذابة الصبغة وقياسها طيفيا.
التطبيق: يستخدم لتقييم تكوين الأغشية الحيوية وتأثيرات العوامل المضادة للميكروبات. - عد الخلايا القابل للحياة (فحص CFU):
الغرض: يحدد عدد خلايا الأغشية الحيوية القابلة للحياة.
الطريقة: يتم تخفيف خلايا الأغشية الحيوية المخلوعة بشكل متسلسل ومطلية على أجار لحساب وحدات تكوين المستعمرات (CFUs).
التطبيق: يقيم صلاحية خلايا الأغشية الحيوية وفعالية مضادات الميكروبات. - تلألؤ ATP الحيوي:
الغرض: يقيس النشاط الأيضي لخلايا الأغشية الحيوية.
الطريقة: يتم قياس مستويات ATP باستخدام مقايسة التوهج الحيوي.
التطبيق: يشير إلى صلاحية الأغشية الحيوية والحالة الأيضية. - مقايسة تخفيض XTT:
الغرض: يقيم النشاط الأيضي الخلوي.
الطريقة: يتم تقليل كاشف XTT بواسطة الخلايا النشطة الأيضية لتشكيل منتج فورمازان ملون ، والذي يتم قياسه طيفيا ضوئيا.
التطبيق: يستخدم لتقييم صلاحية الخلايا البيوفيلم وتأثير العلاجات. - التحليل المجهري:
الغرض: تصور بنية الأغشية الحيوية وتكوينها.
الطريقة: تشمل التقنيات الفحص المجهري الضوئي والمجهر بالليزر متحد البؤر (CLSM) والمجهر الإلكتروني الماسح (SEM).
التطبيق: يوفر رؤى مفصلة حول بنية الأغشية الحيوية والتوزيع وتأثيرات العلاجات. - استخراج الحمض النووي والحمض النووي الريبي والبروتين:
الغرض: يحلل الملامح الجينية والبروتينية لخلايا الأغشية الحيوية.
الطريقة: يتم تحليل خلايا الأغشية الحيوية لاستخراج الأحماض النووية والبروتينات للتحليل النهائي (على سبيل المثال ، تفاعل البوليميراز المتسلسل ، qPCR ، التسلسل ، البروتينات).
التطبيق: يدرس التعبير الجيني والتنوع الجيني والتعبير البروتيني في الأغشية الحيوية. - مقايسات تثبيط الأغشية الحيوية والقضاء عليها:
الغرض: فحص المركبات لقدرتها على منع تكوين الأغشية الحيوية أو القضاء على الأغشية الحيوية الراسخة.
الطريقة: يتم التعامل مع الأغشية الحيوية بعوامل مضادة محتملة للغشاء الحيوي ، ويتم تقييم الاضطراب باستخدام المقايسات المذكورة أعلاه.
التطبيق: اكتشاف الأدوية وتطوير العلاجات المضادة للغشاء الحيوي.