Pregătirea probei cu ultrasunete pentru analiza THC
- Extracția cu ultrasunete este o metodă dovedită pentru producerea de THC, dar poate fi utilizată și în scopuri analitice.
- Ultrasonication este o metodă comună de pregătire a probei utilizată pentru analiza conținutului total de THC în produsele de canabis.
- Extracția cu ultrasunete se aplică probelor înainte de analiza TLC, GC și HPLC.
Extracție cu ultrasunete THC
THC, sau tetrahidrocanabinol (delta-9-tetrahidrocanabinol), este substanța chimică care provoacă majoritatea efectelor psihologice ale marijuanei. Pentru speciile de canabis, pot fi cunoscute mai mult de 400 de tulpini diferite. În funcție de tulpina specifică de canabis, canabisul poate avea doar 0,3% THC în greutate. În alte tulpini, conținutul de THC poate ajunge până la 20% în greutate.
De asemenea, diferitele produse de canabis variază semnificativ: Deci, concentrația medie de THC din marijuana variază între 1 și 5%; în hașiș, conținutul de THC este între 5 și 15%, iar în uleiul de hașiș, este în medie de 20%. THC în doze recreaționale de marijuana este foarte variabil și cu cât conținutul de THC din marijuana este mai mic, cu atât utilizatorul trebuie să consume mai mult pentru a experimenta efectele dorite.
Pregătirea probei cu ultrasunete este utilizată pentru a analiza conținutul de THC
- pentru controlul calității produselor THC recreative,
- pentru determinarea calității produselor farmaceutice THC,
- pentru distincția dintre cânepă și cânepă pentru fibre.
Pentru analiza THC, se utilizează în mod obișnuit următoarele metode cromatografice: cromatografia în strat subțire (TLC), cromatografia în fază gazoasă (GC) și cromatografia lichidă de înaltă performanță (HPLC)
Protocol de pregătire a probei cu ultrasunete pentru analiza TLC
Pregătirea probei: Pentru prepararea probelor, materialul vegetal uscat trebuie macerat și măcinat până la o pulbere omogenă. Pentru extracția cu ultrasunete, 500mg de pulbere de plante de canabis și 5 ml amestec metanol-cloroform (raport de 9: 1) sunt amestecate într-un flacon. Sonicare poate fi aplicat folosind un ultrasonicator cu micro tip, VialTweeter sau cu ultrasunete Cuphorn. Timpul de sonicare durează aproximativ 5 min. După aceea, se lasă proba să se odihnească timp de cel puțin 5 minute. Se diluează supernatantul limpede cu amestecul de extracție (v/v: 1:10). THC gratuit: 1μL pe placa TLC
Decarboxilare: 100 μL din extract se evaporă până la uscare. Reziduul este încălzit la 180°C timp de 4 minute. Se adaugă 500μL de metanol-cloroform (v/v 9: 1). Sonicate timp de 5 min. Se diluează supernatantul limpede cu amestecul de extracție (v/v: 1:10).
Calibrare: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC silicagel F-254, Merck 5729
TLC scanner II, software-ul CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Etilacetat: Toluol: Cloroform = 3: 17: 0,25 (v/v/v)
Derivatizare postcromatografică: Sare albastră rapidă 0,1% în 0,1 M NaOH
Densitometrie la 550 nm
Tetrahidrocanabinol (Δ9-THC) pentru analiză și extracție
Protocol de pregătire a probei cu ultrasunete pentru analiza GC
Pregătirea probei: Materialul vegetal uscat este macerat și măcinat până la o pulbere omogenă. Pentru extracție, 500 mg pulbere de plante de canabis și 10 ml amestec metanol-hexan (raport de 9: 1) sunt amestecate într-un flacon. Sonicare poate fi aplicat folosind un dispozitiv cu ultrasunete de tip sondă cu micro tip, VialTweeter sau cu ultrasunete Cuphorn. Sonicați proba timp de 15-20 min. Se agită proba și se lasă să se odihnească timp de cel puțin 5 minute. Se diluează supernatantul limpede cu amestecul de extracție (v/v 1: 20).
Decarboxiliere: în inserție
Temperatura injectorului 250°C
Calibrare: 5 ng/μL până la 250 ng/μL
GC: HP 6890 cu 5973 MSD și 7683 injecție autosampler: 1μL, timp fără divizare: 2 min.
Coloană: HP-5 MS, 30m, diametru 250 μm, grosime film 0,25 μm
Gaz purtător: He, 35 psi, debit constant: 4 ml / min.
Cuptor: 100°C timp de 1min.; creșterea temperaturii de la 15°C /min. la 280°C; 280°C pentru 5 min. MSD: SCANARE: m/e 35 – 550
Protocol de pregătire a probei cu ultrasunete pentru analiza HPLC
Prepararea probei (analog preparatului GC): Materialul vegetal uscat este macerat și măcinat până la o pulbere omogenă. Pentru extracție, 500 mg pulbere de plante de canabis și 10 ml amestec metanol-hexan (raport de 9: 1) sunt amestecate într-un flacon. Sonicare poate fi aplicat folosind un sondă de tip ultrasonicator cu micro tip, VialTweeter sau cu ultrasunete Cuphorn. Sonicați proba timp de 15-20 min. Se agită proba și se lasă să se odihnească timp de cel puțin 5 minute. Se diluează supernatantul limpede cu amestecul de extracție (v/v 1: 20).
VialTweeter Pentru pregătirea probei cu ultrasunete
Precoloană: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Coloană: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Eluant: izokratic 36% TEAP 25 mmol/L, 64% cuantificare acetonitril la 210nm
Calibrare: 0,001 – 0,10 μg/μL
Calibrare: 0,01 – 0,50 μg/μL
Timp de retenție: pentru CBD: 6,2 min.; pentru CBN: 8,0 min.; pentru THC: 9,4 min.; pentru THC-A: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St cu micro-tip pentru sonicare eșantion
Literatură/Referințe
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Applica 2006.
Fapte care merită știute
marijuana constă din flori uscate și frunze și tulpini subtile ale plantei feminine de canabis. Aceasta este forma cea mai consumată și conține aproximativ 3% până la 20% THC. Formele specifice, foarte crescute de marijuana ating un conținut de THC de peste 30%. Marijuana este materialul sursă pentru toate celelalte soiuri de produs de canabis care conține THC. Pentru a converti cel mai abundent canabinoid, acidul tetrahidrocanabinolic (THCA), în THC psihoactiv, trebuie inițiat un proces de decarboilare. Prin urmare, canabisul și extractele sale trebuie încălzite sau deshidratate pentru a provoca decarboxilarea.
kief se referă la o pulbere, bogată în tricomi, care este cernută din frunzele și florile de canabis. Se consumă fie sub formă de pulbere, fie comprimat și utilizat în prăjituri de hașiș.
hașiș sau hash este un tort sau o bilă concentrată de rășină care este produsă fie din kief presat, fie din rășina care este răzuită de pe suprafața plantei și laminată în bile. Apare în diferite culori, de la negru la maro auriu, în funcție de puritate și sursă. Poate fi consumat pe cale orală sau afumat, de exemplu într-o pipă, narghilea, bong, barbotor, vaporizator, folosind un cuțit fierbinte, fumat în articulații, amestecat cu muguri de canabis sau tutun, fumat ca tokes de sticlă sau utilizat ca ingredient în alimente.
tinctura de canabis se referă la extractul de canabinoizi din alcool. Canabinoizii sunt extrași din planta de canabis folosind băuturi spirtoase de înaltă dovadă (mai ales alcool din cereale) pentru a crea tinctura.
ulei de hash este o matrice rășinoasă de canabinoizi produși prin extracție cu solvent, formată într-o masă întărită sau vâscoasă. Uleiul de hash este unul dintre cele mai puternice produse de canabis datorită nivelului ridicat de compus psihoactiv. Utilizarea uleiului de hash extras din butan și dioxid de carbon supercritic a câștigat recent o popularitate din ce în ce mai mare.
Perfuzii Se referă la diferite tipuri de infuzii de canabis care diferă unele de altele prin marea varietate de solvenți nevolatili care pot fi utilizați pentru a produce o perfuzie de canabis. Pentru a prepara o astfel de perfuzie, materia vegetală de canabis este amestecată cu un solvent și apoi presată și filtrată pentru a transfera uleiurile din plantă în solvent. Untul de cacao, untul de lapte, uleiul de gătit, glicerina și hidratantele pentru piele sunt solvenți utilizați în mod obișnuit.
marijuana medicală se referă la utilizarea plantei de canabis ca terapie pe bază de plante recomandată de medic, precum și THC sintetic și canabinoizi. Această utilizare necesită, în general, o rețetă, iar distribuirea se face de obicei într-un cadru definit de legile locale. Mai multe studii de cercetare au arătat că utilizarea canabisului sau a derivaților săi acționează împotriva, de exemplu, greața și vărsăturile induse de chimioterapie, durerea neuropată și scleroza multiplă.