استخراج بيتا جلوكان من الفطر باستخدام الموجات فوق الصوتية

يتضمن استخراج بيتا جلوكان من الفطر لأغراض الاختبار المعملي أو الإنتاج مزيجا من تقطيع الفطر أو طحنه أو سحقه ، والاستخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية ، وترسيب بيتا جلوكان. فيما يلي مخطط مبسط لعملية استخراج بيتا جلوكان ، جنبا إلى جنب مع أمثلة على الأحجام والأوزان لتجربة على نطاق المختبر. يرجى ملاحظة أن الظروف والقياسات المحددة قد تختلف اعتمادا على نوع الفطر ونقاء بيتا جلوكان المطلوب.

المواد والمعدات

  • الفطر (على سبيل المثال ، 100 جرام من الفطر المفروم أو المقطع إلى شرائح)
  • الماء المقطر البارد (على سبيل المثال ، 500 مل)
  • خلاط أو طاحونة
  • أكواب زجاجية أو قوارير
  • ورق الترشيح أو إعداد الترشيح بالتفريغ
  • أجهزة الطرد المركزي (اختياري)
  • الكحول (على سبيل المثال ، الإيثانول) لهطول الأمطار
  • ثلاجة
  • فرن التجفيف
استخراج بيتا جلوكان من فطر ليونزمان

بروتوكول استخراج بيتا جلوكان

  1. طحن أو سحق الفطر (على سبيل المثال ، Chaga أو الأسد’ فطر بدة) إلى جزيئات خشنة من حوالي 1 إلى 3 ملليمترات. على سبيل المثال ، استخدم 100 جرام من جزيئات الفطر المجففة.
  2. ثم أضف جزيئات الفطر إلى دورق زجاجي أو قارورة.
  3. بعد ذلك، أضف 500 مل من الماء المقطر إلى الكأس الزجاجية التي تحتوي على جزيئات الفطر المراد استخلاصها. قد تختلف نسبة الماء إلى الفطر اعتمادا على نوع الفطر المحدد وحجم الجسيمات.
  4. بعد تحريك الملاط ، صوتنة الخليط باستخدام خالط مختبر بالموجات فوق الصوتية (على سبيل المثال ، UP400St مع سونوترود 22 مم بسعة 100٪ أو UP200Ht مع سونوترود 14 مم بسعة 100٪) والحفاظ على درجة حرارة أقل من 90 درجة مئوية. تساعد درجات الحرارة المنخفضة في الحفاظ على المركبات الحساسة للحرارة ، مثل بيتا جلوكان أثناء الاستخراج. استخدم صوتيا لمدة 5 إلى 10 دقائق تقريبا عند استخدام UP400St ولمدة 10 إلى دقائق عند استخدام UP200Ht على التوالي. يرجى ملاحظة أن درجة الحرارة ووقت الاستخراج يمكن أن تختلف اعتمادا على الطاقة فوق الصوتية المستخدمة. بالطبع ، سوف تتطلب أحجام أكبر أوقات صوتنة أطول.
  5. قم بتصفية الخليط الصوتي من خلال ورق الترشيح أو استخدم إعداد الترشيح الفراغي لفصل السائل (الذي يحتوي على بيتا جلوكان المستخرج) عن بقايا الفطر الصلبة.
  6. ثم ترسيب بيتا جلوكان من السائل عن طريق إضافة الكحول (مثل الإيثانول). عادة ، يمكنك استخدام 2-3 مجلدات من الكحول لهطول الأمطار.
  7. بعد ذلك ، قم بتخزين الخليط في الثلاجة لعدة ساعات للسماح للبيتا جلوكان بالترسيب.
  8. بعد هطول الأمطار ، يمكنك صب السائل بعناية وجمع راسب بيتا جلوكان.
  9. أخيرا ، جفف بيتا جلوكان في فرن على درجة حرارة منخفضة (على سبيل المثال ، 40-50 درجة مئوية) حتى تتم إزالة كل الكحول وتحصل على مسحوق جاف.
This video demonstrates the highly efficient extraction of lion's mane mushrooms using the Hielscher UP200Ht ultrasonic homogenizer.

Lion's Mane Mushroom Extraction using an Ultrasonic Homogenizer UP200Ht

صورة مصغرة للفيديو

الفطر تظهر اختلافات في خصائصها. وبالتالي ، يمكن أن تختلف عملية استخراج بيتا جلوكان بناء على عوامل مثل أنواع الفطر المحددة ، وحالة الفطر (المجفف أو الطازج) ، وحجم الجسيمات ، ودرجة حرارة الاستخراج. لتحسين إجراء الاستخراج الخاص بك ، ضع في اعتبارك تجربة معلمات مختلفة ، بما في ذلك تغيير نسب المواد الصلبة إلى السائل ، وضبط درجات الحرارة ، واستكشاف المذيبات المختلفة ، واختبار فترات صوتنة متنوعة وإعدادات السعة.

طلب معلومات





استخراج الأنزيمية بمساعدة الموجات فوق الصوتية من بيتا جلوكان

الاستخراج الأنزيمي بمساعدة الموجات فوق الصوتية هو طريقة تستخدم لاستخراج بيتا جلوكان من الفطر باستخدام مزيج من الإنزيمات والموجات فوق الصوتية. تعزز هذه العملية كفاءة الاستخراج عن طريق تحطيم جدران خلايا الفطر وتسهيل إطلاق بيتا جلوكان.

توسيع نطاق استخلاص بيتا جلوكان من الفطر

بمجرد إنشاء بروتوكول استخراج بيتا جلوكان الذي يلبي متطلباتك ، يمكن أن يكون توسيع نطاق عملية الاستخراج مسعى مباشرا.

توسيع نطاق استخراج الدفعات

إذا كنت تخطط للتوسع باستخدام طريقة استخراج الدفعات ، فإننا نوصي بزيادة حجم الدفعات مع الحفاظ على نسب الصلبة إلى السائلة وجميع المعلمات الأخرى ثابتة. إذا كنت لا تزال تستخدم نفس الخالط بالموجات فوق الصوتية ، تأكد من زيادة وقت صوتنة بشكل متناسب. بالنسبة للدفعات التي تتجاوز 1 لتر ، قد ترغب في التفكير في دمج محرك بطيء للحفاظ على تعليق الجسيمات وتحسين توحيد الاستخراج. توضح الصورة أدناه إعداد استخراج دفعة سعة 8 لتر باستخدام الخالط بالموجات فوق الصوتية UP400St مع محرك مختبري.

إعداد استخراج الفطر باستخدام الخالط بالموجات فوق الصوتية UP400sT (400 واط ، 24 كيلو هرتز)

إعداد استخراج الفطر دفعة 8 لتر مع UP400St سونيكاتور

الترشيح الفراغي لمستخلص بيتا جلوكان بعد الصوتنة باستخدام جهاز صوتي UP200Ht

الترشيح الفراغي لمستخلص بيتا جلوكان بعد السونيكيون

استخراج الفطر المضمن

للراغبين في استخراج كميات أكبر باستمرار من بيتا جلوكان من الفطر، Hielscher الفوق صوتيات يقدم مفاعلات تدفق الخلايا المصممة لاستخراج المواد النباتية. إذا كان هذا ينطبق عليك ، فنحن نشجعك على التواصل معنا مباشرة للحصول على مزيد من المعلومات. سيسعد فريقنا الفني بالمساعدة في تحديد الإعداد الأنسب لاحتياجاتك الخاصة. ومع ذلك ، فإن إجراء التجربة على نطاق المختبر المذكورة سابقا مع أنواع الفطر المحددة الخاصة بك يمكن أن يكون لا يقدر بثمن في فهم متطلبات العملية الدقيقة. تظهر الصورة أدناه مفاعل خلية تدفق كبير مع خالط بالموجات فوق الصوتية UIP4000hdT لاستخراج بيتا جلوكان في حوالي 50 إلى 200 لتر من ملاط مذيب الفطر في الساعة.

مفاعل خلية التدفق مع الخالط بالموجات فوق الصوتية UIP4000hdT لاستخراج بيتا جلوكان عند 50 إلى 200 لتر من ملاط مذيب الفطر في الساعة

UIP4000hdT الخالط بالموجات فوق الصوتية لمدة 50 إلى 200 لتر من ملاط الفطر المذيب في الساعة

تركيز بيتا جلوكان التجريبي لأنواع الفطر

أدناه ، ستجد قائمة بتركيز بيتا جلوكان التجريبي الذي تم استخراجه من أنواع الفطر المختلفة.

أنواع الفطرمحتوى بيتا جلوكان (٪ الوزن)
تيرميتوميسز فوليجينوسوس ر. هايم1%
بوليتوس العملاق ر. هايم3%
روسولا دينسيفوليا سيكر. جيليت السابق25%
روسولا سيانوكسانثا (شيف.) الأب.29%
روسولا ألبوارولاتا هونغو42%
روسولا إيميتيكا (شيف.) بيرس.10%
روسولا ديليكا الأب.38%
بيكنوبوروس سينابارينوس (جاك) ب. كارست.35%
أمانيتا هيميبافا (بيرك. & بروم) ساك.5%
أمانيتا برينسبس كورنر & باس9%
أمانيتا قيصرية (سكوب) بيرس.4%
هيمييلا ريتيسبورا (بات. & سي إف بيكر) بوديجن19%
كورتيناريوس كلاريكولور فار تورماليس (الأب) كوادر13%
تيرميتوميسز تايلريانوس أوتينو12%
Termitomyces microcarpus (Berk. & بروم) ر. هايم8%
تيرميتوميسز يوريزوس (بيرك) ر. هايم7%
بوليبوريلوس فاريوس (بيرس) P. كارست.2%
بيكنوبوروس كوكسينيوس (الأب) بوندارتسيف & مغن45%
لينتينوس سكواروسولوس مونت.2%
دايدالوبيسيس كونفراغوسا (بولتون) ج. شروت3%
بيكنوبوروس سانغينيوس (L.) الأب.35%
أمانيتا هيميبافا (بيرك. & بروم) ساك.5%
أمانيتا فيرجينيويدس باس1%
أغاريكوس سيلفاتيكوس شيف.3%
موليبديت الكلوروفيلوم (G. Mey.) ماسي3%
غانوديرما لوكيدوم (كورتيس) ب. كارست.33%
أموروديرما روغوسوم (بلوم & ت. نيس) توريند4%
Suillus bovinus var. bovinus (Pers.) Kuntze1%
كليتوسيب سوافيولنس (شوماخ.) ب. كوم. S9%
كليرودما فيروكوسوم (الثور) بيرس.9%
هيمييلا ريتيسبورا (بات. & سي إف بيكر)19%
عدس العدس (بيرك.) بيجلر34%
بيكنوبوروس سينابارينوس (جاك) ب. كارست.35%

تركيز بيتا جلوكان لأنواع الفطر البري ، المصدر: بونيانوفهاب ، جارونتورن & هانساواسدي ، شانيدا. (2010). التوزيع المكاني لبيتا جلوكان المحتوي على مجتمعات الفطر البري في الغابات الجافة شبه الاستوائية ، تايلاند. التنوع الفطري. 46. 29-42. 10.1007 / s13225-010-0067-8.

اطلب المزيد من المعلومات

يرجى استخدام النموذج أدناه، إذا كنت ترغب في طلب معلومات إضافية حول التجانس بالموجات فوق الصوتية. سنكون سعداء لنقدم لكم نظام الموجات فوق الصوتية تلبية الاحتياجات الخاصة بك.









يرجى ملاحظة لدينا سياسة الخصوصية.




القياس الكمي لتركيز مستخلص بيتا جلوكان للفطر

يمكن قياس تركيز بيتا جلوكان بعد الاستخراج باستخدام طرق مختلفة ، اعتمادا على نوع بيتا جلوكان والمتطلبات المحددة للتحليل. الطرق الشائعة لقياس تركيز بيتا جلوكان مذكورة أدناه. بالطبع ، يعتمد اختيار الطريقة على عوامل مثل الدقة المطلوبة والمعدات المتاحة.

  1. طريقة الجاذبية

    • المبدأ: تعتمد هذه الطريقة على ترسيب بيتا جلوكان مع الإيثانول ، يليه تجفيف ووزن المادة المترسبة.
    • الإجراء: يتم إذابة العينة في الماء ، ومعالجتها بالإيثانول لترسيب بيتا جلوكان ، ثم يتم جمع الراسب وتجفيفه ووزنه.
    • المزايا: بسيطة وتستخدم على نطاق واسع.
    • القيود: أقل دقة مقارنة بالطرق الأخرى.
  2. طرق القياس اللوني

    • المبدأ: تتضمن هذه الطرق تفاعلات لونية مع كواشف محددة تنتج تغيرا في اللون يتناسب مع تركيز بيتا جلوكان.
    • أمثلة:

      • طريقة حمض الفينول الكبريتيك: تتضمن هذه الطريقة معالجة العينة بحمض الكبريتيك المركز والفينول ، مما يحول المحلول إلى اللون البرتقالي. تتناسب كثافة اللون مع تركيز بيتا جلوكان.
      • طريقة Anthrone: يتفاعل كاشف Anthrone مع بيتا جلوكان لإنتاج لون أزرق أخضر ، ويتم قياس كثافة اللون.
    • المزايا: حساسة ومناسبة للتحليل عالي الإنتاجية.
    • القيود: التداخل من المركبات الأخرى والحاجة إلى كواشف محددة.
  3. المُسايس الأنزيمية

    • المبدأ: تستخدم المقايسات الأنزيمية إنزيمات مثل β-glucanase لتحطيم بيتا جلوكان إلى سكريات أبسط ، ويتم تحديد كمية السكريات المنبعثة.
    • المزايا: محددة للغاية ودقيقة.
    • القيود: يتطلب معدات وكواشف متخصصة.
  4. كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء (HPLC)

    • المبدأ: يفصل HPLC المركبات ويحددها بناء على تفاعلاتها مع عمود كروماتوغرافي.
    • الإجراء: يتم تحلل بيتا جلوكان إلى السكريات الأحادية ، ويتم فصل السكريات الناتجة وقياسها بواسطة HPLC.
    • المزايا: دقيقة للغاية ومناسبة للعينات المعقدة.
    • القيود: يتطلب معدات وخبرات متخصصة.
  5. المقايسات المناعية المحددة

    • المبدأ: تستخدم المقايسات المناعية أجساما مضادة خاصة بالبيتا جلوكان لتحديد تركيزها.
    • أمثلة:

      • ELISA (مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم): في هذه الطريقة ، ينتج الجسم المضاد المرتبط بالإنزيم تغيرا في اللون عندما يرتبط ببيتا جلوكان.
      • فحوصات التدفق الجانبي: هذه اختبارات سريعة توفر نتيجة واضحة على شريط الاختبار.
    • المزايا: خصوصية عالية وحساسية.
    • القيود: يتطلب أجساما مضادة محددة وقد يكون أكثر تكلفة.

سنكون سعداء لمناقشة العملية الخاصة بك.

دعونا الحصول على اتصال.