إعداد عينة بالموجات فوق الصوتية لتحليل THC

• استخراج بالموجات فوق الصوتية هو طريقة مجربة لإنتاج THC ، ولكن يمكن استخدامه لأغراض تحليلية أيضا.
• Ultrasonication هي طريقة إعداد عينة شائعة تستخدم لتحليل المحتوى الكلي ل THC في منتجات القنب.
• يتم تطبيق استخراج بالموجات فوق الصوتية على العينات قبل تحليل TLC و GC و HPLC.

استخراج THC بالموجات فوق الصوتية

THC ، أو رباعي هيدروكانابينول (دلتا -9-تتراهيدروكانابينول) ، هو المادة الكيميائية التي تسبب معظم الآثار النفسية للماريجوانا. بالنسبة لأنواع القنب ، يمكن أن يكون أكثر من 400 سلالة مختلفة معروفة. اعتمادا على سلالة القنب المحددة ، يمكن أن يحتوي القنب على أقل من 0.3٪ بالوزن٪ THC. في سلالات أخرى ، يمكن أن يصل محتوى THC إلى 20٪ بالوزن.
كما تختلف منتجات القنب المختلفة بشكل كبير: لذلك يتراوح متوسط تركيز THC في الماريجوانا بين 1 إلى 5٪. في الحشيش ، يتراوح محتوى THC بين 5 إلى 15٪ ، وفي زيت الحشيش ، يبلغ متوسطه 20٪. THC في الجرعات الترفيهية من الماريجوانا متغير للغاية وكلما انخفض محتوى THC في الماريجوانا ، يجب على المستخدم أن يستهلك أكثر لتجربة التأثيرات المطلوبة.

تطبيق الموجات فوق الصوتية الطاقة (المعروف أيضا باسم صوتنة) هو أداة مجربة لاستخراج المكونات النشطة من المواد النباتية. يمكن استخراج THC وكذلك المكونات النشطة الأخرى مثل القنب والتربين بنجاح عن طريق صوتنة. انقر هنا لقراءة المزيد عن استخراج القنب بالموجات فوق الصوتية!

يستخدم إعداد عينة بالموجات فوق الصوتية لتحليل محتوى THC

• لمراقبة جودة منتجات THC الترفيهية ،
• لتحديد جودة منتجات THC الصيدلانية ،
• للتمييز بين المخدرات القنب والقنب الألياف.

لتحليل THC ، يتم استخدام الطرق الكروماتوغرافية التالية بشكل شائع: كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة (TLC) ، كروماتوغرافيا الغاز (GC) ، والكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC)

بروتوكول إعداد العينة بالموجات فوق الصوتية لتحليل TLC

تحضير العينة: لإعداد العينات ، يجب نقع المواد النباتية المجففة وطحنها إلى مسحوق متجانس. لاستخراج بالموجات فوق الصوتية ، يتم خلط 500mg من مسحوق نبات القنب و 5mL خليط الميثانول والكلوروفورم (نسبة 9: 1) في قارورة. يمكن تطبيق Sonication باستخدام الموجات فوق الصوتية مع طرف صغير ، VialTweeter أو الموجات فوق الصوتية كوبهورن. يستغرق وقت الصوتنة حوالي 5 دقائق. بعد ذلك ، اترك العينة ترتاح لمدة 5 دقائق على الأقل. قم بتخفيف المادة الطافية الصافية بخليط الاستخراج (v / v: 1: 10). THC مجاني: 1 ميكرولتر على لوحة TLC
نزع الكربوكسيل: يتم تبخير 100 ميكرولتر من المستخلص حتى يجف. يتم تسخين البقايا عند 180 درجة مئوية لمدة 4 دقائق. أضف 500 ميكرولتر من ميثانول كلوروفورم (v / v 9: 1). سونيكات لمدة 5 دقائق. قم بتخفيف المادة الطافية الصافية بخليط الاستخراج (v / v: 1: 10).
المعايرة: 20 نانوغرام ، 60 نانوغرام ، 100 نانوغرام ، 140 نانوغرام
HPTLC:
TLC هلام السيليكا F-254 ، ميرك 5729
TLC الماسح الضوئي الثاني, برنامج CATS3, كاماج موتنز Eluens:
إيثيل أسيتات: تولول: كلوروفورم = 3: 17: 0,25 (v / v / v)
اشتقاق ما بعد الكروماتوغرافيا: ملح أزرق سريع 0,1٪ في 0,1 م هيدروكسيد الصوديوم
قياس الكثافة عند 550 نانومتر

بروتوكول إعداد العينة بالموجات فوق الصوتية لتحليل GC

تحضير العينة: يتم نقع المواد النباتية المجففة وطحنها إلى مسحوق متجانس. للاستخراج ، يتم خلط 500 ملغ من مسحوق نبات القنب وخليط 10 مل من الميثانول والهكسان (نسبة 9: 1) في قنينة. يمكن تطبيق Sonication باستخدام جهاز الموجات فوق الصوتية من نوع التحقيق مع طرف صغير ، VialTweeter أو الموجات فوق الصوتية كوبهورن. قم بتنشيط العينة لمدة 15-20 دقيقة. رج العينة واتركها ترتاح لمدة 5 دقائق على الأقل. قم بتخفيف المادة الطافية الصافية بخليط الاستخراج (v / v 1: 20).
إزالة الكربوكسيل: في الإدراج
درجة حرارة الحاقن 250 درجة مئوية
المعايرة: 5 نانوغرام / ميكرولتر إلى 250 نانوغرام / ميكرولتر
GC: HP 6890 مع 5973 MSD و 7683 حقن أخذ العينات التلقائي: 1 ميكرولتر ، وقت غير مقسم: 2 دقيقة.
العمود: HP-5 MS ، 30 م ، قطر 250 ميكرومتر ، سمك الفيلم 0,25 ميكرومتر
الغاز الناقل: هو ، 35 رطل / بوصة مربعة ، التدفق المستمر: 4 مل / دقيقة.
الفرن: 100 درجة مئوية لمدة 1 دقيقة ؛ زيادة درجة الحرارة من 15 درجة مئوية / دقيقة إلى 280 درجة مئوية ؛ 280 درجة مئوية لمدة 5 دقائق. MSD: المسح الضوئي: م / ه 35 – 550

بروتوكول إعداد العينة بالموجات فوق الصوتية لتحليل HPLC

تحضير العينة (تناظري لتحضير GC): يتم نقع المادة النباتية المجففة وطحنها إلى مسحوق متجانس. للاستخراج ، يتم خلط 500 ملغ من مسحوق نبات القنب وخليط 10 مل من الميثانول والهكسان (نسبة 9: 1) في قنينة. يمكن تطبيق Sonication باستخدام مسبار نوع الموجات فوق الصوتية مع طرف صغير ، VialTweeter أو الموجات فوق الصوتية كوبهورن. قم بتنشيط العينة لمدة 15-20 دقيقة. رج العينة واتركها ترتاح لمدة 5 دقائق على الأقل. قم بتخفيف المادة الطافية الصافية بخليط الاستخراج (v / v 1: 20).

HPLC-DAD: وحدة فصل المياه 2695 / حقن PAD 2996: 10 ميكرولتر
العمود التمهيدي: LiChrospher 60 ، RP-Select B ، 5 ميكرومتر (Merck 50963)
العمود: LiChroCart 125-4 ، Lichrospher 60 ، RP-Select B ، 5 ميكرومتر (Merck 50829)
Eluent: متساوي الكراتيك 36٪ TEAP 25 مليمول / لتر ، 64٪ أسيتونيتريل تكميمي عند 210 نانومتر
المعايرة: 0,001 – 0، 10 ميكروغرام / ميكرولتر
المعايرة: 0،01 - 0،50 ميكروغرام / ميكرولتر
وقت الاحتفاظ: لاتفاقية التنوع البيولوجي: 6,2 دقيقة ؛ ل CBN: 8,0 دقيقة ؛ ل THC: 9,4 دقيقة ؛ ل THC-A: 11,0 دقيقة
لود: CBD 0,5٪ ، CBN 0,5٪ ، THC 0,15٪ ، THC-A 1٪