Le ensayos bey ELISA ku utilizan ampliamente utia'al u diagnóstico in vitro, le detección proteínas relacionadas yéetel k'aas k'oja'anilo'obo' yéetel le kaambalil yo'osal calidad (je'ebix, le monitoreo alérgenos alimentarios). Wa u muestras ultrasónicas yilik jach jump'éel láaka rápida, fiable yéetel reproducible utia'al u análisis celulares yéetel aislar proteínas intracelulares, ADN, ARN yéetel orgánulos. Hielscher Ultrasonidos k'u'ubul ya'abkach soluciones ultrasónicas utia'al u conveniente wa u yilik muestras individuales, ya'ab k'oja'ano'ob viales, bey je'el bix ti' placas microtíter yéetel placas 96 pozos.

Elisa – Ensayo inmunoabsorbente ligado enzimas

ELISA u ensayo inmunoabsorbente ligado enzimas yéetel le jump'éel láaka análisis bioquímico ampliamente utilizada categoría ensayos unión ligandos. Ti' ELISA, ku añade jump'éel muestra líquida ti' jump'éel fase sólida estacionaria yéetel propiedades u unión especiales. Normalmente, le fase sólida estacionaria ku aplica bey recubrimiento ti' jump'éel placa ti' ch'e'eno' wa placa ELISA. Tu continuación ya'ab reactivos ts'a'abal u añaden, incuban yéetel ku lavan secuencialmente, ti' modo u finalmente u yaantal jump'éel k'eexpajal óptico (je'ebix, le ma'alo'ob u boonil tuméen le producto jump'éel reacción enzimática) tu líquido xuul ichil le ch'e'eno'. Le k'eexpajal óptico ku cha'antik P'iis le cantidad analito tumen juntúul llamado “xookik". Utia'al le xooko' cuantitativa, ku meyajtiko'ob juntúul espectrofotómetro, fluorómetro wa luminómetro yo'osal detectar yéetel P'iis le intensidad le sáasilo' transmitida. Le sensibilidad u detección u influenciada tumen le amplificación le señal ichil le reacciones analíticas. Dado ti' le reacciones enzimáticas táan ma'alob investigadas yéetel u utilizan procesos u amplificación fiables, le enzimas ku utilizan ch'a'iko'ob le señal. Le enzimas táan vinculadas ti' le reactivos detección ti' proporciones fijas utia'al u permitir jump'éel cuantificación precisa, ku tsool xan u k'aaba' ensayo inmunoabsorbente "ligado ti' enzimas".
Bey le ensayos ELISA u ku beetiko'ob ti' placas microtíter leti' placas 96 pozos, u leti'e', k'ajolo'on bey láaka ensayo ku ti' placas yéetel ku meyajtiko'ob, je'ebix, tu diagnóstico clínico in vitro, investigación, ma'alo'ob fármacos, etc. yo'osal detectar yéetel cuantificar anticuerpos, péptidos, proteínas yéetel hormonas.
Tu láaka ELISA ku meyajtiko'ob con frecuencia bey nu'ukula' diagnóstico ti' ts'aak, biotecnología, patología vegetal yéetel xan le Páaybe'en medición kanik ti' ya'ab k'oja'ano'ob industrias.

Wa u muestras ultrasónicas yilik tu taan ELISA

Ma'ili' ti' u u páajtal u le ensayo ELISA, le muestras requieren wook preparación tales como le lysis t'aan yéetel le extracción proteínas intracelulares, ADN, ARN, etc. Ventaja le lysis t'aan ultrasónica yéetel le aislamiento proteico jach u ka'anal eficiencia, fiabilidad yéetel reproducibilidad. Le ba'ax ku importantes tia'al diagnósticos u ka'anal calidad yéetel ya'ala'al máaxo'ob máano'ob investigación

Protocolo utia'al u lísis t'aan ultrasónica pre-ELISA

• Utia'al u cultivos celulares: Bey ma' u lysis t'aan ultrasónica, células centrífugas ichil 5 minutos u 270 x g ti' jump'éel microcentrífuga. Retire le sobrenadante yo'osal células aspiración yéetel resuspendida ti' 30 – 100 l tampón RIPA. Ts'o'okole', incubar le pellet t'aan yo'osal hielo ti' 30 min.
• Bejla'e', le muestra celda táan ts'o'ok utia'al u lílisis ultrasónica:
  Meyaj juntúul ultrasonicador bin yano'ob sonda (je'ebix. UP200Ht yéetel sonda S26d2) wa jump'éel dispositivo ultrasónico multimuestra (je'ebix, VialTweeter utia'al u sonicación simultánea u tak 10 viales wa UIP400MPT utia'al u placas microtíter leti' placas 96 pozos) dependiendo de cantidad muestras ku necesite mentik.
  Utia'al u sonicación bin yano'ob sonda jump'éel tin juunal muestra, coloque le células ti' tubos microcentrífuga 1,5 ml.
• Ajuste ku u ku bisik ultrasónica, yaan tu energía total, modo ciclo yéetel leti' wa límites temperatura ti' le menú digital ti' le ultrasonicador. Le ba'ala' garantiza jump'éel sonicación yéetel repetibilidad ma'alob fiables.
• Inset le sonotrodo yéetel encienda le dispositivo ultrasónico. Suavemente u mueva u micro-xnuk le sonda ultrasónica ti' le muestra utia'al u sonicar le muestra uniformemente.
  Utia'al u óol tuláakal le máasewáalo'obo' ti' le células, le lysis ultrasónica u completará ka' 2 - 4 ciclos sonicación 10 seg.
• Ka' sonicación, retire u sonotrodo le muestra. Le muestras k'a'abéet u incubadas ti' hielo ichil 5 min. Ts'o'okole', centrifugar u 10.000 x g ti' 20 minutos utia'al u peletizar le escombros. Transfiera le sobrenadantes ti' jump'éel túumben tubo microcentrífuga. Etiquetar le analitos yéetel conservar - 20oC.
• Le sonotrodo ultrasónico ku páajtal cho'oik púustik tu belil yéetel alcohol wa sonicado ti' jump'éel vaso u precipitados Chuup yéetel alcohol, je'ebix, 70 ti chúumuk etanol. Tuláakal le sondas ultrasónicas hechas u titanio le autoclavables.

• Enjuague u wa'ak'al yéetel PBS síis (0,01 pm pH-7,4) utia'al tselik le exceso k'i'ik'el hemólisis yiit.
• Pesar u wa'ak'al (yis, puksi'ik'al, pulmón, bazo, etc.) yéetel macerar ti' trozos mejen, ba'ax ku homogeneizan ti' PBS. Le volumen PBS requerido u ti' le peso u wa'ak'al. Bix u regla tuláakal 1g wa'ak'al k'a'abet aprox. 9mL PBS. Recomienda u añadir biin inhibidor le proteasa ti' le PBS. (RIPA wa tampón lelisis hipotónica ba'ax ku taasik proteasa yéetel cóctel inhibidor ti' le fosfatasa ku páajtal utilizar alternativamente.).
• Dependiendo de le Buka'aj u wa'ak'al, jump'éel Ts'a'akal corto vórtice (aprox. 1-2 min. ti' 15 seg. pulsos) u páajtal u útil utia'al u k'aax ku u wa'ak'al.
• K'áax jump'éel micro-punta, je'ebix S26d2, ti' u ultrasonicador. Coloque le tubo muestra yéetel u wa'ak'al ti' jump'éel wichkíil hielo.
• Sonicar le muestra yéetel u ultrasonicador je'ebix, UP200St (80 ti chúumuk amplitud) ichil 1 min. tu modo pulso (kex teen jo'olajun segundos encendido, kex teen jo'olajun segundos pausa). Mantenga le muestra ti' táankab hielo.
• Le homogeneizatos ku centrifugan tia'al piscinas específicas (citosólicas, nucleares, mitocondriales wa lisosomales) con el fin de jejelas miatsilo'ob yano'ob le proteína utia'al u análisis. Yaan u centrifugar le muestra ichil 5 minutos u 5000×g, u recupera le sobrenadante.

Kaambalil yo'osal u temperatura fiable ti' le sonicación

Le temperatura jach jump'éel crucial factor ku influye ti' le tuukula' k'a'ana'an especialmente utia'al u Ts'a'akal muestras biológicas, je'ebix, utia'al Je'e bix u páajtale' le degradación térmica ti' proteínas. Bey tuláakal le kaambalilo'ob mecánicas ti' wa u muestras yilik, le sonicación crea ooxoj. Ba'ale' le temperatura le muestras u páajtal u ma'alob controlada ken u utilizan le dispositivos Hielscher Ultrasonics. Ti' presentamos ya'abkach opciones yo'osal monitorear yéetel controlar u temperatura u muestras ka' jo'op' le preparamos yéetel le ultrasonicador bin yano'ob sonda wa u VialTweeter pre-analíticamente.

1. Maak le temperatura le muestra: Tuláakal le procesadores ultrasónicos digitales Hielscher táan equipados yéetel juntúul software na'at yéetel juntúul sensor temperatura conectable. Conecte le sensor temperatura ti' le dispositivo ultrasónico (p'el. ej., UP200Ht, UP200St, VialTweeterUIP400MTP) yéetel inserte xnuk le sensor temperatura ti' le tubos muestra. Ti' le pantalla táctil u boonil digital, u configurar ti' le menú procesador ultrasónico jump'éel rango temperatura específico utia'al u sonicación muestra. Le ultrasonicador ku detendrá automáticamente ka u alcance le wóolis temperatura ka u detenga tak ka temperatura le muestra baje ti' le je'o' asab t'okik ti' le temperatura establecida ∆. Tu continuación le sonicación ku Revolución automáticamente ka'a. Le función na'at evita le degradación inducida tumen le ooxoj.
2. En cuanto a le unidad multimuestra ultrasónica VialTweeter ti', le bloque titanio, u sostiene le tubos muestra, je'el u páajtal u preenfriar. Coloque le bloque VialTweeter (chéen le sonotrodo ma' transductor!) ti' le refrigerador wa congelador utia'al u preenfriar le bloque titanio ku yáantik posponer le aumento ti' le temperatura ti' le muestra. Wa páajtal, le muestra ti' yan xan ku páajtal preenfriar.
3. Use jump'éel wichkíil ti' hielo wa hielo tikin utia'al u síistal ichil le sonicación. Coloque le (le) tubo (s) ku muestra ichil le sonicación ti' jump'éel wichkíil hielo. Utia'al u VialTweeter, meyaj juntúul bandeja Jach taam Chuup yéetel hielo tikin ka coloque le VialTweeter yóok'ol le hielo tikin utia'al u le ooxoj béeyak disipar ku jáan.

Le clientes le yóok'ol kaaba' utilizan le sonda-ultrasonidos Hielscher, bey le kúuchilo'ob sonicación multimuestra VialTweeter yéetel UIP400MTP utia'al u meyaj Sáansamal wa u muestras ti' laboratorios biológicos, bioquímicos, médicos yéetel clínicos yilik. Le software na'at yéetel le kaambalil yo'osal temperatura le procesadores Hielscher, le temperatura ku controla bix fiable yéetel u evita u degradación le muestra inducida tumen ooxoj. Wa u muestras ultrasónicas yéetel soluciones ultrasónicas Hielscher ku ya'ala'al máaxo'ob máano'ob ma'alob fiables yéetel reproducibles!