Ma'alo'obtal u ultrasonido Hielscher

Wa u muestras ultrasónicas utia'al u ensayos ELISA yilik

Le ensayos bey ELISA ku utilizan ampliamente utia'al u diagnóstico in vitro, le detección proteínas relacionadas yéetel k'aas k'oja'anilo'obo' yéetel le kaambalil yo'osal calidad (je'ebix, le monitoreo alérgenos alimentarios). Wa u muestras ultrasónicas yilik jach jump'éel láaka rápida, fiable yéetel reproducible utia'al u análisis celulares yéetel aislar proteínas intracelulares, ADN, ARN yéetel orgánulos. Hielscher Ultrasonidos k'u'ubul ya'abkach soluciones ultrasónicas utia'al u conveniente wa u yilik muestras individuales, ya'ab k'oja'ano'ob viales, bey je'el bix ti' placas microtíter yéetel placas 96 pozos.

Elisa – Ensayo inmunoabsorbente ligado enzimas

ELISA u ensayo inmunoabsorbente ligado enzimas yéetel le jump'éel láaka análisis bioquímico ampliamente utilizada categoría ensayos unión ligandos. Ti' ELISA, ku añade jump'éel muestra líquida ti' jump'éel fase sólida estacionaria yéetel propiedades u unión especiales. Normalmente, le fase sólida estacionaria ku aplica bey recubrimiento ti' jump'éel placa ti' ch'e'eno' wa placa ELISA. Tu continuación ya'ab reactivos ts'a'abal u añaden, incuban yéetel ku lavan secuencialmente, ti' modo u finalmente u yaantal jump'éel k'eexpajal óptico (je'ebix, le ma'alo'ob u boonil tuméen le producto jump'éel reacción enzimática) tu líquido xuul ichil le ch'e'eno'. Le k'eexpajal óptico ku cha'antik P'iis le cantidad analito tumen juntúul llamado “xookik". Utia'al le xooko' cuantitativa, ku meyajtiko'ob juntúul espectrofotómetro, fluorómetro wa luminómetro yo'osal detectar yéetel P'iis le intensidad le sáasilo' transmitida. Le sensibilidad u detección u influenciada tumen le amplificación le señal ichil le reacciones analíticas. Dado ti' le reacciones enzimáticas táan ma'alob investigadas yéetel u utilizan procesos u amplificación fiables, le enzimas ku utilizan ch'a'iko'ob le señal. Le enzimas táan vinculadas ti' le reactivos detección ti' proporciones fijas utia'al u permitir jump'éel cuantificación precisa, ku tsool xan u k'aaba' ensayo inmunoabsorbente "ligado ti' enzimas".
Bey le ensayos ELISA u ku beetiko'ob ti' placas microtíter leti' placas 96 pozos, u leti'e', k'ajolo'on bey láaka ensayo ku ti' placas yéetel ku meyajtiko'ob, je'ebix, tu diagnóstico clínico in vitro, investigación, ma'alo'ob fármacos, etc. yo'osal detectar yéetel cuantificar anticuerpos, péptidos, proteínas yéetel hormonas.
Tu láaka ELISA ku meyajtiko'ob con frecuencia bey nu'ukula' diagnóstico ti' ts'aak, biotecnología, patología vegetal yéetel xan le Páaybe'en medición kanik ti' ya'ab k'oja'ano'ob industrias.

Chukbesik le instalación VialTweeter: xooko'obo' u VialTweeter ti' le procesador ultrasónico UP200St

Le unidad wa u muestras ultrasónicas wa u meyaj VialTweeter Ku meyajtiko'ob yo'osal le lelisis t'aan yéetel le extracción proteínas bey ma' ensayos ELISA

Solicitud a'alajil t'aan




Yanak ti' tu yilaje' k Política yojeta'al mixba'al.


Wa u muestras ultrasónicas yilik tu taan ELISA

Ma'ili' ti' u u páajtal u le ensayo ELISA, le muestras requieren wook preparación tales como le lysis t'aan yéetel le extracción proteínas intracelulares, ADN, ARN, etc. Ventaja le lysis t'aan ultrasónica yéetel le aislamiento proteico jach u ka'anal eficiencia, fiabilidad yéetel reproducibilidad. Le ba'ax ku importantes tia'al diagnósticos u ka'anal calidad yéetel ya'ala'al máaxo'ob máano'ob investigación

Ventajas le lísis ultrasónica tu taan ELISA

  • Ti' muestras homogéneos
  • Lelisis completa
  • Extracción completa u proteínas (je'ebix, anticuerpos, ADN).
  • Adaptación óptima ti' le bin yano'ob celda
  • Utia'al u je'el Buka'aj muestra
  • reproducibles
  • temperatura controlada
  • Protocolo automático u datos ti' le tarjeta SD

Protocolo utia'al u lísis t'aan ultrasónica pre-ELISA

Sonda bin yano'ob insonifier UP200St utia'al u lisis

  • Utia'al u cultivos celulares: Bey ma' u lysis t'aan ultrasónica, células centrífugas ichil 5 minutos u 270 x g ti' jump'éel microcentrífuga. Retire le sobrenadante yo'osal células aspiración yéetel resuspendida ti' 30 – 100 l tampón RIPA. Ts'o'okole', incubar le pellet t'aan yo'osal hielo ti' 30 min.
  • Bejla'e', le muestra celda táan ts'o'ok utia'al u lílisis ultrasónica:
    Meyaj juntúul ultrasonicador bin yano'ob sonda (je'ebix. UP200Ht yéetel sonda S26d2) wa jump'éel dispositivo ultrasónico multimuestra (je'ebix, VialTweeter utia'al u sonicación simultánea u tak 10 viales wa UIP400MPT utia'al u placas microtíter leti' placas 96 pozos) dependiendo de cantidad muestras ku necesite mentik.
    Utia'al u sonicación bin yano'ob sonda jump'éel tin juunal muestra, coloque le células ti' tubos microcentrífuga 1,5 ml.
  • Ajuste ku u ku bisik ultrasónica, yaan tu energía total, modo ciclo yéetel leti' wa límites temperatura ti' le menú digital ti' le ultrasonicador. Le ba'ala' garantiza jump'éel sonicación yéetel repetibilidad ma'alob fiables.
  • Inset le sonotrodo yéetel encienda le dispositivo ultrasónico. Suavemente u mueva u micro-xnuk le sonda ultrasónica ti' le muestra utia'al u sonicar le muestra uniformemente.
    Utia'al u óol tuláakal le máasewáalo'obo' ti' le células, le lysis ultrasónica u completará ka' 2 - 4 ciclos sonicación 10 seg.
  • Ka' sonicación, retire u sonotrodo le muestra. Le muestras k'a'abéet u incubadas ti' hielo ichil 5 min. Ts'o'okole', centrifugar u 10.000 x g ti' 20 minutos utia'al u peletizar le escombros. Transfiera le sobrenadantes ti' jump'éel túumben tubo microcentrífuga. Etiquetar le analitos yéetel conservar - 20oC.
  • Le sonotrodo ultrasónico ku páajtal cho'oik púustik tu belil yéetel alcohol wa sonicado ti' jump'éel vaso u precipitados Chuup yéetel alcohol, je'ebix, 70 ti chúumuk etanol. Tuláakal le sondas ultrasónicas hechas u titanio le autoclavables.

Utia'al Homogeneizar jach:

  • Enjuague u wa'ak'al yéetel PBS síis (0,01 pm pH-7,4) utia'al tselik le exceso k'i'ik'el hemólisis yiit.
  • Pesar u wa'ak'al (yis, puksi'ik'al, pulmón, bazo, etc.) yéetel macerar ti' trozos mejen, ba'ax ku homogeneizan ti' PBS. Le volumen PBS requerido u ti' le peso u wa'ak'al. Bix u regla tuláakal 1g wa'ak'al k'a'abet aprox. 9mL PBS. Recomienda u añadir biin inhibidor le proteasa ti' le PBS. (RIPA wa tampón lelisis hipotónica ba'ax ku taasik proteasa yéetel cóctel inhibidor ti' le fosfatasa ku páajtal utilizar alternativamente.).
  • Dependiendo de le Buka'aj u wa'ak'al, jump'éel Ts'a'akal corto vórtice (aprox. 1-2 min. ti' 15 seg. pulsos) u páajtal u útil utia'al u k'aax ku u wa'ak'al.
  • K'áax jump'éel micro-punta, je'ebix S26d2, ti' u ultrasonicador. Coloque le tubo muestra yéetel u wa'ak'al ti' jump'éel wichkíil hielo.
  • Sonicar le muestra yéetel u ultrasonicador je'ebix, UP200St (80 ti chúumuk amplitud) ichil 1 min. tu modo pulso (kex teen jo'olajun segundos encendido, kex teen jo'olajun segundos pausa). Mantenga le muestra ti' táankab hielo.
  • Le homogeneizatos ku centrifugan tia'al piscinas específicas (citosólicas, nucleares, mitocondriales wa lisosomales) con el fin de jejelas miatsilo'ob yano'ob le proteína utia'al u análisis. Yaan u centrifugar le muestra ichil 5 minutos u 5000×g, u recupera le sobrenadante.
Le sonotrodo MTP-24-8-96 u waxak sondas ultrasónicas utia'al u sonicación pozos placas microtíter.

Le sonotrodo MTP-24-8-96 u waxak sondas ultrasónicas utia'al u sonicación pozos placas microtíter.

Kaambalil yo'osal u temperatura fiable ti' le sonicación

Le temperatura jach jump'éel crucial factor ku influye ti' le tuukula' k'a'ana'an especialmente utia'al u Ts'a'akal muestras biológicas, je'ebix, utia'al Je'e bix u páajtale' le degradación térmica ti' proteínas. Bey tuláakal le kaambalilo'ob mecánicas ti' wa u muestras yilik, le sonicación crea ooxoj. Ba'ale' le temperatura le muestras u páajtal u ma'alob controlada ken u utilizan le dispositivos Hielscher Ultrasonics. Ti' presentamos ya'abkach opciones yo'osal monitorear yéetel controlar u temperatura u muestras ka' jo'op' le preparamos yéetel le ultrasonicador bin yano'ob sonda wa u VialTweeter pre-analíticamente.

  1. Maak le temperatura le muestra: Tuláakal le procesadores ultrasónicos digitales Hielscher táan equipados yéetel juntúul software na'at yéetel juntúul sensor temperatura conectable. Conecte le sensor temperatura ti' le dispositivo ultrasónico (p'el. ej., UP200Ht, UP200St, VialTweeterUIP400MTP) yéetel inserte xnuk le sensor temperatura ti' le tubos muestra. Ti' le pantalla táctil u boonil digital, u configurar ti' le menú procesador ultrasónico jump'éel rango temperatura específico utia'al u sonicación muestra. Le ultrasonicador ku detendrá automáticamente ka u alcance le wóolis temperatura ka u detenga tak ka temperatura le muestra baje ti' le je'o' asab t'okik ti' le temperatura establecida ∆. Tu continuación le sonicación ku Revolución automáticamente ka'a. Le función na'at evita le degradación inducida tumen le ooxoj.
  2. En cuanto a le unidad multimuestra ultrasónica VialTweeter ti', le bloque titanio, u sostiene le tubos muestra, je'el u páajtal u preenfriar. Coloque le bloque VialTweeter (chéen le sonotrodo ma' transductor!) ti' le refrigerador wa congelador utia'al u preenfriar le bloque titanio ku yáantik posponer le aumento ti' le temperatura ti' le muestra. Wa páajtal, le muestra ti' yan xan ku páajtal preenfriar.
  3. Use jump'éel wichkíil ti' hielo wa hielo tikin utia'al u síistal ichil le sonicación. Coloque le (le) tubo (s) ku muestra ichil le sonicación ti' jump'éel wichkíil hielo. Utia'al u VialTweeter, meyaj juntúul bandeja Jach taam Chuup yéetel hielo tikin ka coloque le VialTweeter yóok'ol le hielo tikin utia'al u le ooxoj béeyak disipar ku jáan.

Le clientes le yóok'ol kaaba' utilizan le sonda-ultrasonidos Hielscher, bey le kúuchilo'ob sonicación multimuestra VialTweeter yéetel UIP400MTP utia'al u meyaj Sáansamal wa u muestras ti' laboratorios biológicos, bioquímicos, médicos yéetel clínicos yilik. Le software na'at yéetel le kaambalil yo'osal temperatura le procesadores Hielscher, le temperatura ku controla bix fiable yéetel u evita u degradación le muestra inducida tumen ooxoj. Wa u muestras ultrasónicas yéetel soluciones ultrasónicas Hielscher ku ya'ala'al máaxo'ob máano'ob ma'alob fiables yéetel reproducibles!

Ti' máax ku yéetel to'on! Leti' k'áatiko'ob k!

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Meyaj le uláak' formulario utia'al solicitar a'alajil t'aan adicional yo'osal procesadores ultrasónicos, aplicaciones yéetel tojol. K encantados u discutir u tuukula' yéetel tech ka ofrecer ti' jump'éel ultrasónico yaan u cumpla yéetel u requisitos!









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Ultrasonic high-shear homogenizers are used in lab, bench-top, pilot and industrial processing.

Hielscher Ultrasonidos fabrica homogeneizadores ultrasónicos u ka'anal rendimiento utia'al u aplicaciones mezcla, dispersión, emulsión yéetel extracción ti' laboratorio, piloto yéetel escala industrial.

Literatura leti' Referencias



Hechos u tojol le su'utalil K'ajóolt

Tipos de ELISA

Yaan ya'ab tipos ELISA, u distinguen tumen u principio funcionamiento. U yojelo'ob chan bey ELISA directa, ELISA indirecto, sándwich ELISA, ELISA competitivo yéetel ELISA inversa. Tu continuación ti' presentamos jump'éel visión tuláakal le distintos tipos ELISA yéetel u k'ajle' yáantajo'ob ka diferencias.
ELISA u ejecutar u ti' jump'éel formato cualitativo wa cuantitativo. Ya'ala'al máaxo'ob máano'ob cualitativos proporcionan jump'éel resultado positivo wa negativo simple, ka' jo'op' u ti' le ELISA cuantitativo le densidad óptica (OD) ti' le muestra ku compara yéetel juntúul curva estándar, u suele u jump'éel dilución tu serie jump'éel solución u concentración conocida ti' le molécula diana.

ELISA beetaj ich

Le ELISA beetaj ich le u páajtalil ensayo asab simple ti' Elisa, tu'ux jump'éel anticuerpo primario etiquetado ti' enzimas Chéen ku yéetel ma' u requieren anticuerpos secundarios. Le anticuerpo primario yéetel etiqueta enzimática ku une Jun ti' le ba'ax ku kaxtik, es decir antígeno. Le solución antígeno tamponado añade Amal ch'e'eno' jump'éel placa microtíter (ku placas u 96 pozos, placas ELISA), tu'ux ku adhiere ti' le superficie plástico yéetel interacciones kuuch. Le ken u enzima vinculada anticuerpo primario reacciona yéetel u sustrato, u yaantal jump'éel visible señal ba'ax ku páajtal P'iis yéetel le espectrofotómetro, le fluorómetro wa le luminómetro.

ELISA indirecto

Utia'al u prueba ELISA indirecta, u requieren tuukulo'oba' jump'éel anticuerpo primario bey juntúul anticuerpo secundario. Ba'ale' contrariamente ti' le ELISA beetaj ich, ma' u anticuerpo primario, ba'ale' le anticuerpo secundario táan etiquetado yéetel juntúul enzima. Le antígeno ku inmoviliza u placa le ch'e'eno' yéetel u une tumen le anticuerpo primario. Posteriormente, le anticuerpo secundario etiquetado ti' enzimas u une ti' le anticuerpo primario. Finalmente, le enzima vinculada anticuerpo secundario reacciona yéetel u sustrato utia'al u producir jump'éel visible señal ba'ax u páajtal u detectar.

Sandwich ELISA

Ka' jo'op' u ti' le pruebas ELISA directas yéetel indirectas, le antígeno ku inmoviliza yéetel u recubre u superficie u placa le ch'e'eno', ti' le sándwich ELISA le anticuerpo ku inmoviliza ti' le superficie plástica ti' le placa ELISA. Le anticuerpos inmovilizados ti' le sándwich ELISA u yojelo'ob chan bey anticuerpos captura. Beyxan ti' kaambalilo'ob le anticuerpos captura, tu sándwich xan u requieren le llamados anticuerpos detección. Le anticuerpos detección incluyen jump'éel anticuerpo detección p'iskaambal xma' etiquetar yéetel juntúul anticuerpo detección p'iskaambal etiquetado ti' enzimas.
Paso in paso, le antígeno k'ana'an ju'uno'ob u une ti' le anticuerpo captura inmovilizado ti' le placa. Ts'o'okole', le anticuerpo detección p'iskaambal u une ti' le antígeno. Ts'o'okole', le anticuerpo detección secundario ku une ti' le anticuerpo detección p'iskaambal. Ti' le paso reacción final, le enzima reacciona yéetel u sustrato utia'al u producir jump'éel visible señal ba'ax ku páajtal detectar ópticamente.

ELISA competitivo

Le ELISA competitivo, bey xan k'ajóolta'an je'el bix inhibición ELISA, leti' le bin yano'ob ELISA asab complejo tumen implica u búukinta'al jump'éel antígeno inhibidor. Jujuntúulal ti' le óoxp'éel formatos, beetaj ich, indirecto yéetel sándwich ELISA, ku páajtal adaptar ti' le competitivo formato ELISA. Ti' le ELISA competitivo, antígeno inhibidor yéetel le antígeno k'ana'an ju'uno'ob compiten tumen le unión ti' le anticuerpo primario.
Utia'al u ELISA competitivo, le anticuerpos ma' etiquetados ku incuban tu meyajo'ob u antígeno, es decir ye'esik. Le complejos anticuerpos leti' antígenos enlazados añaden jump'éel ch'e'en recubierto u antígeno.
Le placa ku p'o'obol, ti' modo u eliminan le anticuerpos ma' unidos. ElISA competitivo yaan u k'aaba' debido a u jaajile' u cuanto asab antígeno yaan ti' le muestra, asab complejos antigen-anticuerpos ku táakpajalo'ob. Lela' u k'áat u ya'al yaan menos anticuerpos ma' unidos disponibles utia'al u unir u antígeno ichil le ch'e'eno' yéetel le antígenos k'a'abéet u competir tumen juntúul anticuerpo disponible. Ku añade jump'éel anticuerpo secundario, ku coincide yéetel le anticuerpo primario. Le ka' anticuerpo u ti' le enzima. Le ken u añade le sustrato, le enzimas restantes ku ts'áiko'ob jump'éel señal cromogénica wa fluorescente.
Ti' le ch'aaj, le reacción ku je'elsik utia'al Jech le saturación final ti' le señal.
Yaan kits ELISA competitivos incluyen jump'éel antígeno ligado enzimas kúuchil jump'éel anticuerpo ligado enzimas. Le antígeno etiquetado compite tumen le lu'umo'. lelo'oba' u unión p'iskaambal u anticuerpos yéetel le antígeno muestra (xma' etiquetar). Cuanto bey antígeno yanak ti' le muestra, asab antígeno etiquetado conservará ichil le ch'e'eno' ka asab k'a'an yaan le señal.

Rever u ELISA

Rever ku ELISA ma' meyajtiko'ob placas ch'e'eno', ba'ale' P'at le antígenos suspendidos ti' le líquido prueba. Le prueba ELISA inversa je'el u cantidad anticuerpos enlazados ti' le antígeno. J-desarrollado específicamente ti' detectar yéetel investigar le proteína envoltura u virus le Nilo Occidental yéetel bix le capaz u kaxtik anticuerpos específicos ti' le virus.

Marcador enzimático utilizado utia'al u ELISA

Le uláak' lista ye'esik le marcadores enzimáticos asab náats'al utilizados ti' le ensayos ELISA, u permiten P'iis ya'ala'al máaxo'ob máano'ob u ensayo le ken ts'o'okok.

  • OPD (dihidrocloruro o-fenilenimina) ku ku ámbar utia'al u detectar HRP (Peroxidasa u Rábano páapo'), ka tu menudo u meyajtiko'ob bey jump'éel proteína conjugada.
  • TMB (3,3′,5,5′-tetrametilbenzidina) ku ku ch'ooj le detectar HRP u ku ka'a k'an ka' u adición ácido sulfúrico wa fosfórico.
  • ABTS (2,2′-Azinobis [3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfónico]-ta'ab diamonio) ku ku ya'ax le detectar HRP.
  • PNPP (Fosfato ti' Nitrofenilo, ta'ab Disódica) ku ku k'an le detectar fosfatasa alcalina.