Extracción u proteínas ultrasónica jach yéetel cultivos celulares

• Extracción proteínas jach jump'éel paso wa u le tuukulo'obo' ti' proteómica muestra yilik.
• Proteínas páajtal extraer u paak'alo'ob yéetel jach animales, levaduras yéetel microorganismos.
• Sonicación jach jump'éel método extracción proteína confiable, eficiente ts'áaik rendimientos proteínas ichil jump'éel k'iin u extracción corto.

Extracción proteínas u jach yéetel células

Extracción proteínas le jach yéetel células cultivadas le jump'éel paso preparación tuukulo'obo' ti' le muestra ku beeta'al ichil ya'ab yo'osal bioquímicas yéetel analíticas bey ELISA ti', PAGE, Le borrar occidental, espectrometría masas, wa u purificación proteínas. Ultrasónico interrupción, lisis yéetel extracción le célula u ti'al jump'éel láaka precisamente controlable asegurar ka'anatako'ob rendimientos proteínas.

Extracción proteínas u wa'ak'al ba'alche'o'

Utia'al wa u tuláakal Buka'aj yilik jach (yis, puksi'ik'al, pulmón, músculo, etc.), u wa'ak'al k'a'ana'an u disecado ti' trozos jach mejen yéetel nu'ukulo'ob limpias, yóok'ol hielo preferiblemente yéetel lo ka'ache' posible utia'al Jech le degradación tumen proteasas (p'el. ej. tampón lisis bey). RIPA wa lisis hipotónica buffer ba'ax ku taasik proteasa ka fosfatasa u inhibidor cóctel). Ka' le disección, le muestra ku sumerge tu nitrógeno líquido utia'al congelar séeba'an. Le muestra u conservar u u-80 ° C uti'al u posterior wa u cuidadas ti' le hielo homogeneización inmediata. Inmediatamente bey ma' u extracción ultrasónica, tampón u lisis frío ti' hielo (yéetel inhibidores le proteasa TDT, leupeptin yéetel aprotinina) jáan u agrega ti' le tubo muestra (tumen ~ 10 mg wa'ak'al u recomiendan yan ~ 600 μL tampón). Aprox. 20 ti'-60mg wa'ak'al le recomendado tumen le tubo muestra.
Homogeneización ultrasonidos, lisis yéetel extracción ku beeta'al yéetel juntúul homogenizador ultrasónico bey le UP200Ht o UP200St, equipado yéetel juntúul sonda xnuk. Sonicación ku bisik le 60-90 segundos ti' jump'éel modo ciclo ultrasónico ti' sonicación kex teen jo'olajun segundos ka k'iin descanso 10 segundos. Le muestra k'a'ana'an conservar u tu hielo le k'iin.
Ka' ts'o'ok u homogeneización ultrasónica leti' extracción, lisada u centrifuga u 27.000 g ti' aprox 20 minutos ts'o'okole' ku Mool le supernatent utia'al u concentración proteína je'el u páajtal u determinada tumen juntúul análisis proteína tales como ensayo Pierce proteína BCA.

Extracción proteínas suero k'i'ik'el

Utia'al u jump'éel mezcla homogénea ti' le suero yéetel le tampón fosfato, le muestra jach bok'ik u bey ma' lisis t'aan ultrasónico. Utia'al u lisis ultrasónica, u ye'esik u sonicó yéetel juntúul homogeneizador laboratorio ultrasonidos bey le UP100H 8 ciclos tu amplitud le 20 ti chúumuk, utia'al le ciclos Amal 5 segundos t'aba'an yéetel 15 segundos apagado. Sonocation ku bisik ka'ansaj tumen sonicationg ti' ciclos yéetel je'ela' le muestra ti' hielo tumen le ba'ax ku evita jump'éel degradación térmica yéetel sobrecalentamiento le muestra. Puesto ti' le suero ku taasik nuxi' cantidad proteínas ka'anal peso molecular (tales como albúmina, α1-antitripsina, transferrina, haptoglobulin, inmunoglobulina G yéetel inmunoglobulina U), ku interfieren yéetel le separación proteínas t'okik peso molecular ichil le IEF, le recomienda utia'al u agotar ti' le suero utilizando jump'éel columna agotamiento.

Extracción proteínas u wa'ak'al le chan páak'alo'

Wa'ak'al vegetal ts'o'onota', O'olkij, je'ebix, musgo, etc., u interrumpir u uchik je'ela' le xooko'obo' le muestra picada ti' tampón lisis tumen sonicación. Duro ti', ligenous le jach u vegetales bey neek'o'obo', agujas abeto etc.,, k'a'ana'an u beel tikin lu'um. Yaan duros, materiales paak'alo'ob leñosas k'a'abéet u congelados yéetel nitrógeno líquido antes u obtuvieron tumen sonicación. Chan t'aan miatsil suspensiones, jump'éel Ts'a'akal ultrasonido ichil 30 yéetel lelo' ku segundos ti' jump'éel tampón lisis sobre todo suficiente. Xooko'obo' asab resistente bey le neek'o'ob k'úum requieren jump'éel asab intensa sonicación bix u describe in continuación.

Protocolo extracción ultrasónica u albúmina le neek'o'ob k'úum

Utia'al u extracción ultrasónica proteína albúmina juuch'bil neek' k'úum u fina le lu'umo', ti' jump'éel vaso u precipitados vidrio 250mL ku añaden 10 g neek'o'ob k'úum desgrasada ti' juuch'bil yéetel 100 mL ja' desionizada bey solvente. Extracción le proteína consiste ti' ka'ap'éel wook: ti' yáax kúuchil, le muestra ku sonicó yéetel juntúul ultrasonicador bin yano'ob sonda UP400St (400W, 24kHz). yéetel sonda montada S24d7. Le vaso vidrio ku coloca jump'éel wichkíil síis ja' ichil le homogeneización ultrasónica. Le ajuste le ultrasonicador UP400St yéetel le sensor temperatura extraible asegura u temperatura le muestra ku mantiene Mantats' ti' a yáanal 30 ° kuxtal U kaambalil yo'osal preciso ti' le temperatura ichil le sonicación, evita u desnaturalización le albúmina. Tu ka' kúuchil, le extracción ku beetajo' yéetel juntúul batidora velocidad 200 rpm yéetel 30° kuxtal Ts'o'okole' ku transfiere le vaso ti' jump'éel agitador termostático. Globulina u elimina yo'osal diálisis yéetel destilada ja'. Ka' ts'o'ok u retiro globulina, le extracto proteína je'el u páajtal u muestreado utia'al u determinación u perfil le albúmina yéetel u ajusta posteriormente utia'al u pI = 3.0 utilizando 0.1 M HCl utia'al u coagulación albúmina. Le fase sólida separa tumen centrifugación 5000g, 20° C yéetel u redisuelve ti' desionizada ja'. Coagulación albúmina Meyajta'ab ka'atéen utia'al u ya'abtal le proporción proteína ti' le concentrado ku albúmina.

Extracción proteínas alcalinas ultrasónico utia'al wa u proteína yilik concentrado arroz salvado ku ye'esik u ya'ala'al máaxo'ob máano'ob u Ts'a'akal ultrasónico ti' proteínas asab ka'anal rendimiento ti' jump'éel k'iin significativamente asab corto ti' le extracción – Comparado yéetel métodos u extracción convencionales.

Protocolo wa u muestra utia'al u enzima iNOS funcional yilik

Tia'al le enzima iNOS completamente funcional (je'ebix utia'al u detección u drogas), ku recomienda le uláak' protocolo: le suspensión células k'a'ana'an colocar ti' hielo yéetel someter ultrasonidos yéetel jump'éel UP100H yéetel amplitud 10 ti' le modo ciclo 5 segundos sonicación yéetel 25 segundos ku je'esikuba'ob ti' le hielo. Le procedimiento k'a'ana'an repetir u yan 3 Óoxten. Le k'iin descanso ichil ciclos sonicación reduce u aumento le temperatura yéetel tune' reduce le ku desnaturalización.

Solubilización proteína ultrasónico

Sonicación je'el u páajtal u acelerar le tuukula' solubilización proteína, ba'ax ku k'a'abet u ya'abkach horas. Utia'al ma' sobrecalentar le muestra yéetel Jech le degradación proteínas yéetel modificaciones ti' soluciones u contengan urea, le explosiones ultrasónicas ma' k'a'abéet durar asab u yaan segundos.

T'aano'ob generales

Kaambalil yo'osal u temperatura: Utia'al asegurar jump'éel rendimiento ka'anal ku proteico ma' desnaturalización térmica, k'a'ana'an controlar u le temperatura ichil le extracción. Homogeneizadores ultrasónicos u noj u yila'ob Hielscher – xan llamado desintegrador ultrasónico wa sonificator – le precisamente controlable. Ku talo'ob yéetel juntúul sensor temperatura extraible. Ti' le opciones configuración homogenizador ultrasónico, ku páajtal establecer jump'éel wóolis temperatura. Le kéen u chukik le k'aas temperatura ti', le ultrasonicador utia'al automáticamente tak ka u muestra u yaantal enfriado.
Almacenador intermediario: Le elección jump'éel buffer yáax ka le volumen correcto ti' búfer varían u wa'ak'al u wa'ak'al ka k'a'abéet u calculado-out tumen pruebas ensayo yéetel ba'alo'.
Aislamiento leti' purificación: Lisados u proteína páajtal xu'ulsa'al jump'éel exceso ti' biomoléculas bey le ADN wa carbohidratos, le ju'unil táan u béeytalo'ob u removidos tumen precipitación proteínas (ácido tricloroacético desoxicolato) wa k'eexpajal buffer.

Chittapalo ka Noomhorm (2009) informaron ti' le rendimiento proteína aumentó utilizando sonicación yéetel u le tuukula' le homogeneización ultrasónica ti' u wa'ak'al yéetel lisis u ma'alo'obkíinsiko'ob significativamente le procesos u extracción existentes – habilitación u túumben kúuchil meyajo'ob yaan extracción comercial.

Nu'ukulil ultrasónico utia'al u extracción proteínas

Hielscher Ultrasonics ku ts'abal jump'éel amplia gama Homogenizadores ultrasónicos utia'al u desintegración le células, tejidos, bacterias, microorganismos, levaduras yéetel esporas.
Ultrasonicators laboratorio u Hielscher le potentes yéetel fáciles u operar. Construido ti' jump'éel funcionamiento 24 leti' 7, u diseñados bey dispositivos u sobremesa robusto yéetel eficiente laboratorio. Utia'al tuláakal le dispositivos, tíip'ik le energía yéetel le amplitud táan u béeytal u precisamente controladas. Le amplia gama ti' Accesorios Jaap u asab opciones configuración. Le dispositivos digitales tales bey VialTweeter, UP200Ht, UP200St, ka UP400St Yaan jump'éel kanik u temperatura integrado yéetel juntúul tarjeta SD incorporada utia'al u grabación datos automáticas.
Utia'al u sonicación indirecta, libre u contaminación cruzada yéetel simultáneo ya'ab k'oja'ano'ob muestras, ofrecemos le VialTweeter wa le Cuphorn ultrasónico.
A recomendamos le configuración asab úuchuk utia'al wa u le muestra yilik dependiendo de u ka'anatako'ob, le yéetel le volumen muestra, Contactar k bejla'e' wéet!