Extracción u proteínas ultrasónica jach yéetel cultivos celulares

• Extracción proteínas jach jump'éel paso wa u le tuukulo'obo' ti' proteómica muestra yilik.
• Proteínas páajtal extraer u paak'alo'ob yéetel jach animales, levaduras yéetel microorganismos.
• Sonicación jach jump'éel método extracción proteína confiable, eficiente ts'áaik rendimientos proteínas ichil jump'éel k'iin u extracción corto.

Extracción proteínas u jach yéetel células

Le extracción proteínas jach yéetel células cultivadas jach jump'éel paso tuukulo'obo' wa u muestras Meyajta'ab ichil ya'ab yo'osal bioquímicas yéetel analíticas bey ELISA, PAGE, Western blotting, espectrometría ti' masas wa purificación proteínas yilik. Le disrupción, lisis yéetel extracción t'aan ultrasónica u ti'al jump'éel láaka ma' térmica controlable yéetel precisión garantizar ka'anatako'ob rendimientos proteínas.

T'aano'ob generales utia'al u lisis ultrasónica yéetel u extracción proteínas

• Kaambalil yo'osal u temperatura: Utia'al asegurar jump'éel rendimiento ka'anal ku proteico ma' desnaturalización térmica, k'a'ana'an controlar u le temperatura ichil le extracción. Homogeneizadores ultrasónicos u noj u yila'ob Hielscher – Bey xan u k'aaba' desintegrador ultrasónico wa ultrasonificador – le precisamente controlable. Ku talo'ob yéetel juntúul sensor temperatura extraible. Ti' le opciones configuración homogenizador ultrasónico, ku páajtal establecer jump'éel wóolis temperatura. Le kéen u chukik le k'aas temperatura ti', le ultrasonicador utia'al automáticamente tak ka u muestra u yaantal enfriado.
• Almacenador intermediario: Le elección jump'éel buffer yáax ka le volumen correcto ti' búfer varían u wa'ak'al u wa'ak'al ka k'a'abéet u calculado-out tumen pruebas ensayo yéetel ba'alo'.
• Aislamiento leti' purificación: Lisados u proteína páajtal xu'ulsa'al jump'éel exceso ti' biomoléculas bey le ADN wa carbohidratos, le ju'unil táan u béeytalo'ob u removidos tumen precipitación proteínas (ácido tricloroacético desoxicolato) wa k'eexpajal buffer.

Chittapalo ka Noomhorm (2009) informaron ti' u xook ti' le rendimiento proteínas aumentó yo'osal sonicación yéetel u le tuukula' homogeneización yéetel lisis jach ultrasónicos u ma'alo'obkíinsiko'ob significativamente le procesos u extracción existentes. – habilitación u túumben kúuchil meyajo'ob yaan extracción comercial.
 

Extracción proteínas u wa'ak'al ba'alche'o'

Utia'al wa u tuláakal Buka'aj yilik jach (yis, puksi'ik'al, pulmón, músculo, etc.), u wa'ak'al k'a'ana'an u disecado ti' trozos jach mejen yéetel nu'ukulo'ob limpias, yóok'ol hielo preferiblemente yéetel lo ka'ache' posible utia'al Jech le degradación tumen proteasas (p'el. ej. tampón lisis bey). RIPA wa lisis hipotónica buffer ba'ax ku taasik proteasa ka fosfatasa u inhibidor cóctel). Ka' le disección, le muestra ku sumerge tu nitrógeno líquido utia'al congelar séeba'an. Le muestra u conservar u u-80 ° C uti'al u posterior wa u cuidadas ti' le hielo homogeneización inmediata. Inmediatamente bey ma' u extracción ultrasónica, tampón u lisis frío ti' hielo (yéetel inhibidores le proteasa TDT, leupeptin yéetel aprotinina) jáan u agrega ti' le tubo muestra (tumen ~ 10 mg wa'ak'al u recomiendan yan ~ 600 μL tampón). Aprox. 20 ti'-60mg wa'ak'al le recomendado tumen le tubo muestra.
Le homogeneización, lisis yéetel extracción ultrasónica Meyajta'ab yéetel juntúul homogeneizador ultrasónico bey le UP100H wa UP200Ht, equipado yéetel juntúul sonotrodo micropunta. Le ku bisik le sonicación jach u 60-90 segundos ti' jump'éel modo ciclo ultrasónico u kex teen jo'olajun segundos sonicación yéetel 10 segundos k'iin chan je'elel. Le muestra k'a'ana'an mantener u ti' hielo Láalajk'iin.
Ka' ts'o'ok u homogeneización ultrasónica leti' extracción, lisada u centrifuga u 27.000 g ti' aprox 20 minutos ts'o'okole' ku Mool le supernatent utia'al u concentración proteína je'el u páajtal u determinada tumen juntúul análisis proteína tales como ensayo Pierce proteína BCA.

Extracción proteínas suero k'i'ik'el

Utia'al u jump'éel mezcla homogénea ti' le suero yéetel le tampón fosfato, le muestra ku vórtice táanil bey ma' le lisis t'aan ultrasónica. Utia'al u lisis ultrasónica, le muestra ku soniliza yéetel juntúul homogeneizador laboratorio ultrasónico bey le UP100H ti' 8 ciclos ti' jump'éel amplitud le 20 ti chúumuk, utia'al ciclos Amal 5 segundos encendido yéetel kex teen jo'olajun segundos apagado. Le sonocación ku bisik ka'ansaj tumen sonicación ti' ciclos yéetel je'ela' le muestra ti' hielo utia'al Jech jump'éel sobrecalentamiento yéetel degradación térmica ti' le muestra. Dado ti' le suero ku taasik nuxi' cantidad proteínas ka'anal peso molecular (bey albúmina, α1-antitripsina, transferrina, haptoglobulina, inmunoglobulina G yéetel inmunoglobulina U), ku interfieren yéetel le separación proteínas t'okik peso molecular ichil le IEF, ku recomienda agotar le ti' le suero utilizando jump'éel columna agotamiento.

Extracción proteínas u wa'ak'al le chan páak'alo'

Wa'ak'al vegetal ts'o'onota', O'olkij, je'ebix, musgo, etc., u interrumpir u uchik je'ela' le xooko'obo' le muestra picada ti' tampón lisis tumen sonicación. Duro ti', ligenous le jach u vegetales bey neek'o'obo', agujas abeto etc.,, k'a'ana'an u beel tikin lu'um. Yaan duros, materiales paak'alo'ob leñosas k'a'abéet u congelados yéetel nitrógeno líquido antes u obtuvieron tumen sonicación. Chan t'aan miatsil suspensiones, jump'éel Ts'a'akal ultrasonido ichil 30 yéetel lelo' ku segundos ti' jump'éel tampón lisis sobre todo suficiente. Xooko'obo' asab resistente bey le neek'o'ob k'úum requieren jump'éel asab intensa sonicación bix u describe in continuación.

Protocolo extracción ultrasónica u albúmina le neek'o'ob k'úum

Utia'al u extracción ultrasónica u proteínas albúmina juuch'bil juuch'bil k'úum molida finamente, u agregan 10 g juuch'bil u juuch'bil k'úum desgrasada yéetel 100 ml ja' desionizada bey solvente ti' jump'éel vaso u precipitados u vidrio 250 ml. Le extracción proteínas consta u ka'ap'éel wook: táanile', le muestra ku soniliza yéetel jump'éel ultrasonido bin yano'ob sonda UP400St (400W, 24kHz) equipado yéetel sonotrodo S24d7. Vaso u precipitados u vidrio u coloca jump'éel wichkíil ja' fría ichil le homogeneización ultrasónica. Le ajuste le ultrasonido UP400St yéetel le sensor temperatura enchufable aseguró u temperatura le muestra Mantats' u mantenga ti' a yáanal 30 ° kuxtal Yo'osal u kanik preciso ti' le temperatura ichil le sonicación, ku evita jump'éel desnaturalización le albúmina. Tu ka' kúuchil, le extracción ku beetajo' yéetel juntúul mezclador 200 rpm velocidad yéetel 30 ° kuxtal Posteriormente, vaso u precipitados ku transfiere ti' jump'éel agitador termostático. Le globulina ku elimina yo'osal diálisis yéetel destilada ja'. Ka' ts'o'ok u eliminación globulina, extracto proteico ku páajtal muestrear utia'al u determinar le perfil albúmina yéetel posteriormente ku ajusta pI = 3.0 utilizando HCl 0.1 M utia'al u coagulación le albúmina. Le fase sólida ku separa tumen centrifugación u 5000 g, 20 ° C yéetel u redisuelve ichil desionizada ja'. Coagulación le albúmina Meyajta'ab ka'atéen utia'al u ya'abtal le proporción proteínas ti' le concentrado albúmina.

Extracción proteínas alcalinas ultrasónico utia'al wa u proteína yilik concentrado arroz salvado ku ye'esik u ya'ala'al máaxo'ob máano'ob u Ts'a'akal ultrasónico ti' proteínas asab ka'anal rendimiento ti' jump'éel k'iin significativamente asab corto ti' le extracción – Comparado yéetel métodos u extracción convencionales.

Protocolo wa u muestra utia'al u enzima iNOS funcional yilik

Tia'al le enzima iNOS completamente funcional (je'ebix, utia'al u detección drogas), ku recomienda le uláak' protocolo: le suspensión t'aan k'a'ana'an colocar u yo'osal hielo yéetel u sonicada yéetel juntúul UP100H ti' jump'éel amplitud 10 μm ti' modo ciclo sonicación 5 segundos yéetel 25 segundos chan je'elel yóok'ol hielo. Le procedimiento k'a'ana'an repetir ku aprox. 3 Óoxten. Le k'iin chan je'elel ichil ciclos sonicación reduce le aumento temperatura yéetel, tune', reducirá le ku desnaturalización.

Solubilización proteína ultrasónico

Sonicación je'el u páajtal u acelerar le tuukula' solubilización proteína, ba'ax ku k'a'abet u ya'abkach horas. Utia'al ma' sobrecalentar le muestra yéetel Jech le degradación proteínas yéetel modificaciones ti' soluciones u contengan urea, le explosiones ultrasónicas ma' k'a'abéet durar asab u yaan segundos.

Nu'ukulil ultrasónico utia'al u extracción proteínas

Hielscher Ultrasonics ku ts'abal jump'éel amplia gama Homogenizadores ultrasónicos utia'al u desintegración le células, tejidos, bacterias, microorganismos, levaduras yéetel esporas.
Le ultrasonidos laboratorio Hielscher le potentes yéetel fáciles u operar. Construidos utia'al u meyaj le 24 horas k'iin, 7 k'iin ti' le k'iino'ob, u diseñados bey dispositivos laboratorio u sobremesa robustos yéetel eficientes. Utia'al tuláakal le dispositivos, tíip'ik energía yéetel le amplitud ku páajtal controlar yéetel precisión. Le amplia gama accesorios Jaap asab opciones configuración. Le ultrasonidos digitales bey VialTweeter, UP200Ht, UP200St yéetel UP400St yaan ti' jump'éel kaambalil yo'osal u temperatura integrado yéetel juntúul tarjeta SD incorporada utia'al u registro automático u datos.
Utia'al u sonicación indirecta, libre contaminación cruzada yéetel simultánea ti' ya'ab k'oja'ano'ob muestras, ofrecemos u VialTweeter wa u ultrasónico CupHorn.
Le uláak' tabla k'u'ubul ti' jump'éel visión tuláakal u k ultrasonidos utia'al wa u muestras, le interrupción t'aan yéetel le extracción. Beetik clic ti' le bin yano'ob dispositivo tia'al a wojeltik yóok'ol Amal homogeneizador ultrasónico. K máaxo'ob técnico ma'alob kanasaj yéetel yaan tak úuch yéetel encantado u wáantik u elegir le ultrasonido asab yáax utia'al wa u u muestra yilik!
 

A recomendamos le configuración asab úuchuk utia'al wa u le muestra yilik dependiendo de u ka'anatako'ob, le yéetel le volumen muestra, Contactar k bejla'e' wéet!