Producción ultrasónica u betaglucanos esquizofilano ma'alob purificados

Le esquizofialano jach jump'éel hongo β-glucano yéetel propiedades inmunomoduladoras. Tia'al táanil ku ts'aakankil ma'alob activos, le esquizofilano k'a'ana'an yaantal jump'éel peso molecular t'okik utia'al we'esik jump'éel biodisponibilidad mejorada. U ts'o'ok demostrado ti' le ultrasonicación reduce le peso molecular ti' le esquizofilano. Bey método fiable yéetel xoknáalo'obo', u sonicación u aplicar u uchik utia'al u producción esquizofilano t'okik peso molecular.

Hongos Schizophyllum yéetel extracción ultrasónica u betaglucano

Le ba'alche'obo' le hongo Schizophyllum nuuktalo'ob ti' le ku ti' k'áaxo'ob tu descomposición ka' le estaciones lluviosas. Le wíinklil fructíferos u recolectan le uláak' estación tijil. Le ba'alche'obo' Schizophyllum le xíimbalto'ob ti' compuestos bioquímicos bey le glucanos yéetel, tune', ku ken tijik u k'aab especialmente ti' le noj lu'umilo'obo' tropicales bey alimento yéetel ts'aak. Debido a u propiedades inmunomoduladoras, antifúngicas, antineoplásicas yéetel antivirales, le Schizophyllum commune, bey xan k'ajóolta'an je'el bix hongo branquia, u atraído ti' biotecnológicas yéetel farmacéuticas.
Le polisacárido esquizofilano, bey xan k'ajóolta'an bix sizofiran, sonifilan wa sizofilan, leti' le noj bejo' β-glucano u Kula'an ti' le hongos Schizophyllum, ku ts'abal le esquizofilano bioactivo β-glucano ma'alob efectivo.
Le hongos Schizophyllum commune nuuktalo'ob ti' le ku ti' le che'obo', le micelio xan ku páajtal cultivar ti' k'aab fermentación. Utia'al u aplicaciones farmacéuticas yéetel cosméticas, le esquizofilano t'okik peso molecular jach ya'ab asab xoknáalo'obo' u le esquizofilano ka'anal peso molecular. Le ba'ala' k'a'ana'an u jaajile' ti' u le esquizofilano t'okik peso molecular ye'esik tasas biodisponibilidad yéetel absorción significativamente ti'. Ku ts'o'okole', le esquizofilano ka'anal peso molecular suele u problemático ti' le aplicaciones, ts'o'ok u ts'aik kúuchil ti' ka'anal viscosidad u soluciones acuosas.
Le reducción Buka'aj tumen ultrasonidos u ti'al jump'éel láaka jach xoknáalo'obo' yéetel fiable xu'ulsiko'ob le peso molecular ti' le esquizofilano, aumentando bey le ma'alobil le molécula β-glucano.

Protocolo utia'al u producción esquizofilano t'okik peso molecular

Dado ti' le esquizofilano peso molecular ku ye'esik jump'éel biodisponibilidad yéetel Jayp'éel propiedades ka'anatako'ob drásticamente ti', le nu'ukulil investigación Smirnou investigó le ultrasonicación utia'al u escisión yéetel u reducción le Buka'aj u molécula β-glucano esquizofilano.

Ultrasonidos esquizofilano

β-1.3 (1.6)-Glucan schizophyllan (SPG) ku produjo yo'osal le yéetel sumergido ti' le hongo S. commune ti' jump'éel biorreactor utilizando sacarosa bey sustrato.
Jump'éel finalizado le yéetel, u k'aab yéetel ku diluyó yéetel ja' desmineralizada tak jump'éel concentración esquizofilano 2 g leti' L yéetel ku ultrasonicó yéetel le procesador ultrasónico UIP2000hdT (Hielscher Ultrasonics GmbH, Alemania) tu modo reciclaje yéetel le je'ela' parámetros yéetel condiciones: caudal chúumuk 50 mL leti' Guatemala mina'an u yotocho'ob, frecuencia 20 kHz, potencia 2000 W, sonotrodo bin yano'ob BS2d22 ti', booster bin yano'ob B2-1.4 yéetel amplitud 100 ti chúumuk. Le temperatura u k'aab yéetel le Chúunul le sonicación bin u 25 ° kuxtal U k'aab yéetel ultrasónico (yaan tu energía específica 100 Ws leti' mL) ku filtró ti' le filtro taamil Seitz HS800 ti' jump'éel presión 1,5 bar ti' 40 ° kuxtal Le esquizofilano ultrasónico (uSPG) utia'al u caracterización química ku precipitó ti' le filtrado yéetel triple cantidad alcohol isopropílico ti' temperatura laboratorio, ka tijik u 60 ° C ichil 12 h le soluciones uSPG utia'al u inmunológicos xook u tu beetajo'ob ya'abkach u uláak' bix ken: (1). le filtrado u k'aab yéetel ultrasónico ku diafiltró ti' jump'éel casete PES ti' le serie t'aano' Pall Centramate u 0,1 m2 (corte 100 kDa) u 0,8 bar yéetel le diafiltración continuó tak ka conductividad le retenido j-20 μS leti' cm; (2). le solución ku concentró tumen diafiltración ti' jump'éel concentración uSPG 1 g leti' L yéetel u esterilizó ti' autoclave u 120 ° C leti' 20 min. Le uSPG desnaturalizado u beet u kin tuukul similar, excepto ti' u agregó NaOH ti' le filtrado u k'aab yéetel ti' jump'éel concentración 0,2 M yéetel le solución alcalinizada ku incubó ichil 30 min u temperatura laboratorio bey ma' u diafiltración.

Métodos analíticos

Le rendimiento micelio ku estimó gravimétricamente: u k'aab yéetel diluyó yéetel ja' 1:4, u centrifugó 10000 × g 25 ° C ti' 20 min, le precipitado ku p'o'ik yéetel triple cantidad ja', tijik 60 ° C yéetel u pesó. Le esquizofilano ku precipitó ichil jump'éel sobrenadante yéetel triple cantidad alcohol isopropílico, tijik u 60 ° C ti' 24 h yéetel u rendimiento u determinó gravimétricamente. Le pO2 ti' u k'aab yéetel u p'í elaj yéetel le sonda óptica Hamilton-Visiferm DO 120 (Hamilton, Suiza).
Le viscosidad dinámica ti' u k'aab yéetel u p'íis ti' HAAKE Visco Tester 6L yéetel husillos 1L yéetel 2L 4 ° C yéetel velocidad rotación 30 rpm. Le velocidad filtración ku calculó ichil le k'iin filtración 500 mL chakbil yéetel ti' jump'éel filtro taamil Seitz HS800 (Pall, EE. UU.) ti' 200 × 200 mm ti' jump'éel presión 1,5 bar yéetel 40 ° kuxtal
Le peso molecular ti' uSPG u p'íis yo'osal SEC-MALLS ti' le yaan HPLC Alliance (Waters) yéetel columnas PL aquagel OH60 yéetel PL aquagel OH40 conectadas ti' serie, yéetel le detector miniDAWN TREOS (Wyatt) ku concentró tumen diafiltración ti' jump'éel concentración uSPG 1 g leti' L yéetel u esterilizó ti' autoclave u 120 ° C leti' 20 min. Le uSPG desnaturalizado u beet u kin tuukul similar, excepto ti' u agregó NaOH ti' le filtrado u k'aab yéetel ti' jump'éel concentración 0,2 M yéetel le solución alcalinizada ku incubó ichil 30 min u temperatura laboratorio bey ma' u diafiltración.

Ya'ala'al máaxo'
Le Ts'a'akal ultrasonidos ku aplicó Jun ti' u k'aab pak'al S. commune u 144 h yéetel micelio utia'al u facilitar le procesamiento posterior ti' le SPG.
 
Yáantajo'ob ti' le esquizofilano sonicado: Le esquizofilano ultrasónico (uSPG) ku precipitó ichil jump'éel chakbil yéetel filtrado tumen alcohol yéetel u caracterizó. SEC-MALLS estimó u Mw uSPG ka'ach u paach u 1 MDa. Le peso molecular chúumuk le esquizofilano procedente ti' le fermentación líquida jach u yan 5 MDa, ka' jo'op' u ti' le yéetel tu estado sólido je'el chukpachtik tak 10 MDa. Comparando le peso molecular ti' le esquizofilano ultrasonicado yéetel le peso molecular ti' le esquizofilano nativo ma' tratado, ku páajtal uts' jump'éel reducción le peso molecular u 5 u 10 Óoxten óolal ti' Jaajal le ultrasonicación.
Le polisacárido sonicado uSPG contenía jump'éel 0,7 ti chúumuk proteína p'el leti' p'el yéetel juntúul 1,0 ti chúumuk p'el leti' p'el u residuo ka' u ignición. Le hidrolizado ku uSPG consistió ti' glucosa yéetel asab ti' le 99 ti chúumuk. Ya'ala'al máaxo'ob máano'ob analíticos indican ti' le sonicación escinde aleatoriamente le columna vertebral ti' le β-glucano yéetel k'ab laterales permanecen intactas, reduciendo bey le Buka'aj yéetel le peso molecular ti' le esquizofilano. Xook inmunológicos yóok'ol uSPG esencialmente libre proteínas yéetel endotoxinas mostraron ti' le esquizofilano t'okik Mw ultrasonicado yaan jump'éel actividad inmunomoduladora pronunciada.

 
Viscosidad reducida: Le ultrasonicación tu kúuchil ti' jump'éel disminución significativa u viscosidad u k'aab yéetel. Ichil le ultrasonicación, le viscosidad u k'aab yéetel k'éexel bix ma' lineal: le disminución le viscosidad bin rápida u principio le ultrasonicación, ba'ale' ts'o'okole' ku ralentizó. Le aporte energía específica u 100 Ws leti' mL bin suficiente utia'al u xu'ulsiko'ob u viscosidad u k'aab yéetel óol 7 Óoxten.

Filtración mejorada: U k'aab yéetel tratado yéetel ultrasonidos fluyó ti' le filtro asab séeba'an u u k'aab yéetel ma' tratado (yaan tu energía específica 0 Ws leti' mL) yéetel SPG ka'anal peso molecular. Ku ts'o'okole', le ultrasonicación redujo significativamente le asab producto ti' le filtración. Le filtrado u k'aab yéetel ma' tratado yéetel SPG ka'anal peso molecular (aporte energía específica 0 Ws leti' mL) contenía 0,3 ± 0,07 g leti' L u SPG, ka' jo'op' u concentración SPG bey ma' u filtración tu taamil j-2 g leti' L. Tuméen le contrario, le filtrado le yéetel ultrasónico u 100 Ws leti' mL contenía SPG ti' jump'éel concentración 2,2 ± 0,2 g leti' L, ku ichil jump'éel asab producto óol nula.

Conclusión: Ti' u conclusión, le nu'ukulil investigación resume procesamiento ultrasónico ba'axi' jump'éel ma'alo'obtal xoknáalo'obo' utia'al u fabricación esquizofilano t'okik peso molecular, ku ts'o'okole' u utilizar u ti' cosmética yéetel ts'aak. Le ultrasonicación, le kéen u aplica ti' jump'éel chakbil yéetel k'iini' yéetel micelio, aporta ciertas ventajas ti' le producción esquizofilano. Reduce le pérdidas producto ti' le procesamiento posterior yéetel ku páajtal le producción polisacáridos ma'alob purificados debido a u búukinta'al eficiente le ultrafiltración.
Ku ts'o'okole', le investigadores descubrieron ti' le procesamiento ultrasónico ti' le esquizofilano jach uchik escalable. Jump'éel unidad le desintegrador ultrasónico u páak'alo' piloto UIP2000hdT procesó 1 litro k'aab k'aab yéetel ichil 110 Guatemala mina'an u yotocho'ob ti' modo flujo. Productividad le u páajtal ya'abtal uchik yo'osal le conexión secuencial ti' u kúuchilo'ob ti' ultrasonido adicionales.

 
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Nu'ukulo'ob ultrasónicos u ka'anal rendimiento utia'al u procesamiento glucanos fúngicos

Le fragmentación ku polisacáridos, bey le glucanos, bey je'el bix ti' uláak' compuestos bioactivos, bey le quitina yéetel le quitosano, u procesar u bix fiable yéetel le nu'ukulo'ob ultrasónicos ka'anal rendimiento Hielscher. K ultrasonidos táan u béeytal u suministrar nukuch amplitudes, ku ts'abal jump'éel kaambalil yo'osal preciso u parámetros le tuukula' yéetel páajtal u meyaj le 24 horas k'iin, 7 k'iin ti' le k'iino'ob yáanal kuuch pesadas yéetel tu entornos exigentes. Le gama ti' u Hielscher Ultrasonics k'iin k'aaba' le requisitos bix fiable. Beyxan ti' kaambalilo'ob jump'éel excelente rendimiento ti' ultrasonidos, le ultrasonidos Hielscher kisbuts' jump'éel ka'anal eficiencia energética, ku supone jump'éel Páaybe'en ventaja leti' – especialmente ken u emplea ti' le producción comercial tu gran escala.
Le ultrasonidos Hielscher le kaambalilo'ob ti' ka'anal rendimiento ku páajtal equipar u yéetel accesorios bey sonotrodos, boosters, reactores wa celdas flujo utia'al u adaptar u bix u óptima u kajtalo'ob ichil u u tuukula'. Yéetel u pantalla digital u boonil ti', u opción u preestablecer le ejecuciones sonicación, le registro automático ti' datos ti' jump'éel tarjeta SD integrada, le kaambalil yo'osal remoto ti' le navegador yéetel ya'ab asab noj, ku garantiza le máximo kanik le tuukula' yéetel le facilidad búukinta'al. Yéetel le robustez yéetel le nuxi' Buka'aj u ba'al u kuuch, le kaambalilo'ob ultrasónicos u Hielscher le u tsíimin batalla fiable ti' le producción. Reducción le peso molecular ti' le β-glucanos, bey le esquizofilano, k'a'abet jump'éel potente ultrasonido tia'al le escisión deseada yéetel juntúul producto final ti' esquizofilano ka'anal calidad, u pajtal utilizar u utia'al aplicaciones farmacéuticas.
 
Kaxáant a wojeltik yóok'ol le extracción ultrasónica u betaglucano le hongos, incluidas le t'aano'ob paso in paso, waye'.
 
Le uláak' tabla ku ts'aik ti' jump'éel indicación le Buka'aj u ba'al u procesamiento aproximada u k ultrasonidos: