Producción ultrasónica u betaglucanos esquizofilano ma'alob purificados
Le esquizofialano jach jump'éel hongo β-glucano yéetel propiedades inmunomoduladoras. Tia'al táanil ku ts'aakankil ma'alob activos, le esquizofilano k'a'ana'an yaantal jump'éel peso molecular t'okik utia'al we'esik jump'éel biodisponibilidad mejorada. U ts'o'ok demostrado ti' le ultrasonicación reduce le peso molecular ti' le esquizofilano. Bey método fiable yéetel xoknáalo'obo', u sonicación u aplicar u uchik utia'al u producción esquizofilano t'okik peso molecular.
Hongos Schizophyllum yéetel extracción ultrasónica u betaglucano
Le ba'alche'obo' le hongo Schizophyllum nuuktalo'ob ti' le ku ti' k'áaxo'ob tu descomposición ka' le estaciones lluviosas. Le wíinklil fructíferos u recolectan le uláak' estación tijil. Le ba'alche'obo' Schizophyllum le xíimbalto'ob ti' compuestos bioquímicos bey le glucanos yéetel, tune', ku ken tijik u k'aab especialmente ti' le noj lu'umilo'obo' tropicales bey alimento yéetel ts'aak. Debido a u propiedades inmunomoduladoras, antifúngicas, antineoplásicas yéetel antivirales, le Schizophyllum commune, bey xan k'ajóolta'an je'el bix hongo branquia, u atraído ti' biotecnológicas yéetel farmacéuticas.
Le polisacárido esquizofilano, bey xan k'ajóolta'an bix sizofiran, sonifilan wa sizofilan, leti' le noj bejo' β-glucano u Kula'an ti' le hongos Schizophyllum, ku ts'abal le esquizofilano bioactivo β-glucano ma'alob efectivo.
Le hongos Schizophyllum commune nuuktalo'ob ti' le ku ti' le che'obo', le micelio xan ku páajtal cultivar ti' k'aab fermentación. Utia'al u aplicaciones farmacéuticas yéetel cosméticas, le esquizofilano t'okik peso molecular jach ya'ab asab xoknáalo'obo' u le esquizofilano ka'anal peso molecular. Le ba'ala' k'a'ana'an u jaajile' ti' u le esquizofilano t'okik peso molecular ye'esik tasas biodisponibilidad yéetel absorción significativamente ti'. Ku ts'o'okole', le esquizofilano ka'anal peso molecular suele u problemático ti' le aplicaciones, ts'o'ok u ts'aik kúuchil ti' ka'anal viscosidad u soluciones acuosas.
Le reducción Buka'aj tumen ultrasonidos u ti'al jump'éel láaka jach xoknáalo'obo' yéetel fiable xu'ulsiko'ob le peso molecular ti' le esquizofilano, aumentando bey le ma'alobil le molécula β-glucano.

Le ultrasonido UIP2000hdT Ku utilizó belal utia'al u xu'ulsiko'ob le peso molecular ti' le esquizofilano, jump'éel hongo β-glucano
Protocolo utia'al u producción esquizofilano t'okik peso molecular
Dado ti' le esquizofilano peso molecular ku ye'esik jump'éel biodisponibilidad yéetel Jayp'éel propiedades ka'anatako'ob drásticamente ti', le nu'ukulil investigación Smirnou investigó le ultrasonicación utia'al u escisión yéetel u reducción le Buka'aj u molécula β-glucano esquizofilano.
Ultrasonidos esquizofilano
β-1.3 (1.6)-Glucan schizophyllan (SPG) ku produjo yo'osal le yéetel sumergido ti' le hongo S. commune ti' jump'éel biorreactor utilizando sacarosa bey sustrato.
Jump'éel finalizado le yéetel, u k'aab yéetel ku diluyó yéetel ja' desmineralizada tak jump'éel concentración esquizofilano 2 g leti' L yéetel ku ultrasonicó yéetel le procesador ultrasónico UIP2000hdT (Hielscher Ultrasonics GmbH, Alemania) tu modo reciclaje yéetel le je'ela' parámetros yéetel condiciones: caudal chúumuk 50 mL leti' Guatemala mina'an u yotocho'ob, frecuencia 20 kHz, potencia 2000 W, sonotrodo bin yano'ob BS2d22 ti', booster bin yano'ob B2-1.4 yéetel amplitud 100 ti chúumuk. Le temperatura u k'aab yéetel le Chúunul le sonicación bin u 25 ° kuxtal U k'aab yéetel ultrasónico (yaan tu energía específica 100 Ws leti' mL) ku filtró ti' le filtro taamil Seitz HS800 ti' jump'éel presión 1,5 bar ti' 40 ° kuxtal Le esquizofilano ultrasónico (uSPG) utia'al u caracterización química ku precipitó ti' le filtrado yéetel triple cantidad alcohol isopropílico ti' temperatura laboratorio, ka tijik u 60 ° C ichil 12 h le soluciones uSPG utia'al u inmunológicos xook u tu beetajo'ob ya'abkach u uláak' bix ken: (1). le filtrado u k'aab yéetel ultrasónico ku diafiltró ti' jump'éel casete PES ti' le serie t'aano' Pall Centramate u 0,1 m2 (corte 100 kDa) u 0,8 bar yéetel le diafiltración continuó tak ka conductividad le retenido j-20 μS leti' cm; (2). le solución ku concentró tumen diafiltración ti' jump'éel concentración uSPG 1 g leti' L yéetel u esterilizó ti' autoclave u 120 ° C leti' 20 min. Le uSPG desnaturalizado u beet u kin tuukul similar, excepto ti' u agregó NaOH ti' le filtrado u k'aab yéetel ti' jump'éel concentración 0,2 M yéetel le solución alcalinizada ku incubó ichil 30 min u temperatura laboratorio bey ma' u diafiltración.
Métodos analíticos
Le rendimiento micelio ku estimó gravimétricamente: u k'aab yéetel diluyó yéetel ja' 1:4, u centrifugó 10000 × g 25 ° C ti' 20 min, le precipitado ku p'o'ik yéetel triple cantidad ja', tijik 60 ° C yéetel u pesó. Le esquizofilano ku precipitó ichil jump'éel sobrenadante yéetel triple cantidad alcohol isopropílico, tijik u 60 ° C ti' 24 h yéetel u rendimiento u determinó gravimétricamente. Le pO2 ti' u k'aab yéetel u p'í elaj yéetel le sonda óptica Hamilton-Visiferm DO 120 (Hamilton, Suiza).
Le viscosidad dinámica ti' u k'aab yéetel u p'íis ti' HAAKE Visco Tester 6L yéetel husillos 1L yéetel 2L 4 ° C yéetel velocidad rotación 30 rpm. Le velocidad filtración ku calculó ichil le k'iin filtración 500 mL chakbil yéetel ti' jump'éel filtro taamil Seitz HS800 (Pall, EE. UU.) ti' 200 × 200 mm ti' jump'éel presión 1,5 bar yéetel 40 ° kuxtal
Le peso molecular ti' uSPG u p'íis yo'osal SEC-MALLS ti' le yaan HPLC Alliance (Waters) yéetel columnas PL aquagel OH60 yéetel PL aquagel OH40 conectadas ti' serie, yéetel le detector miniDAWN TREOS (Wyatt) ku concentró tumen diafiltración ti' jump'éel concentración uSPG 1 g leti' L yéetel u esterilizó ti' autoclave u 120 ° C leti' 20 min. Le uSPG desnaturalizado u beet u kin tuukul similar, excepto ti' u agregó NaOH ti' le filtrado u k'aab yéetel ti' jump'éel concentración 0,2 M yéetel le solución alcalinizada ku incubó ichil 30 min u temperatura laboratorio bey ma' u diafiltración.

UIP2000hdT utia'al u reducción le peso molecular ti' le esquizofilano

ultrasonicador UP400St (400 W, 24 kHz). utia'al u procesamiento esquizofila
Le Ts'a'akal ultrasonidos ku aplicó Jun ti' u k'aab pak'al S. commune u 144 h yéetel micelio utia'al u facilitar le procesamiento posterior ti' le SPG.
Yáantajo'ob ti' le esquizofilano sonicado: Le esquizofilano ultrasónico (uSPG) ku precipitó ichil jump'éel chakbil yéetel filtrado tumen alcohol yéetel u caracterizó. SEC-MALLS estimó u Mw uSPG ka'ach u paach u 1 MDa. Le peso molecular chúumuk le esquizofilano procedente ti' le fermentación líquida jach u yan 5 MDa, ka' jo'op' u ti' le yéetel tu estado sólido je'el chukpachtik tak 10 MDa. Comparando le peso molecular ti' le esquizofilano ultrasonicado yéetel le peso molecular ti' le esquizofilano nativo ma' tratado, ku páajtal uts' jump'éel reducción le peso molecular u 5 u 10 Óoxten óolal ti' Jaajal le ultrasonicación.
Le polisacárido sonicado uSPG contenía jump'éel 0,7 ti chúumuk proteína p'el leti' p'el yéetel juntúul 1,0 ti chúumuk p'el leti' p'el u residuo ka' u ignición. Le hidrolizado ku uSPG consistió ti' glucosa yéetel asab ti' le 99 ti chúumuk. Ya'ala'al máaxo'ob máano'ob analíticos indican ti' le sonicación escinde aleatoriamente le columna vertebral ti' le β-glucano yéetel k'ab laterales permanecen intactas, reduciendo bey le Buka'aj yéetel le peso molecular ti' le esquizofilano. Xook inmunológicos yóok'ol uSPG esencialmente libre proteínas yéetel endotoxinas mostraron ti' le esquizofilano t'okik Mw ultrasonicado yaan jump'éel actividad inmunomoduladora pronunciada.

Máak u AFM (tu superior) yéetel perfil topográfico (tu inferior) esquizofilano nativo u ultrasónico. Medición tu modo semi-Contacto yéetel resolución 512 × 512 pxs2. Condiciones: recubrimiento táak'iin, constante resorte 15,3 N leti' pm ángulo le cono xnuk <22°.r />(picture and study: ©Smirnou et al., 2017)
Viscosidad reducida: Le ultrasonicación tu kúuchil ti' jump'éel disminución significativa u viscosidad u k'aab yéetel. Ichil le ultrasonicación, le viscosidad u k'aab yéetel k'éexel bix ma' lineal: le disminución le viscosidad bin rápida u principio le ultrasonicación, ba'ale' ts'o'okole' ku ralentizó. Le aporte energía específica u 100 Ws leti' mL bin suficiente utia'al u xu'ulsiko'ob u viscosidad u k'aab yéetel óol 7 Óoxten.

Ultrasonidos u k'aab pak'al S.commune, ba'ax ku obtuvo yo'osal u pak'al hongos tu biorreactor ichil 144 h. Efecto le período ultrasonidos (expresado bey yaan tu energía específica ti' Ws leti' mL) yóok'ol le velocidad filtración taamil u k'aab yéetel (columna box) yéetel le concentración esquizofilano (SPG) ti' le filtrado (columna gris). Condiciones u ultrasonidos: Procesador ultrasónico UIP2000hd (20 kHz, 2000W)., sonotrodo BS2d22 ti', booster B2-1.4, amplitud 100 ti chúumuk, caudal 50 mL leti' s.
(wíimbala' ka xook: ©Smirnou et ti' le., 2017).
Filtración mejorada: U k'aab yéetel tratado yéetel ultrasonidos fluyó ti' le filtro asab séeba'an u u k'aab yéetel ma' tratado (yaan tu energía específica 0 Ws leti' mL) yéetel SPG ka'anal peso molecular. Ku ts'o'okole', le ultrasonicación redujo significativamente le asab producto ti' le filtración. Le filtrado u k'aab yéetel ma' tratado yéetel SPG ka'anal peso molecular (aporte energía específica 0 Ws leti' mL) contenía 0,3 ± 0,07 g leti' L u SPG, ka' jo'op' u concentración SPG bey ma' u filtración tu taamil j-2 g leti' L. Tuméen le contrario, le filtrado le yéetel ultrasónico u 100 Ws leti' mL contenía SPG ti' jump'éel concentración 2,2 ± 0,2 g leti' L, ku ichil jump'éel asab producto óol nula.

Ultrasonidos u k'aab pak'al S.commune, ba'ax ku obtuvo yo'osal u pak'al hongos tu biorreactor ichil 144 h. Efecto le período ultrasonidos (expresado bey yaan tu energía específica ti' Ws leti' mL) yóok'ol le velocidad filtración taamil u k'aab yéetel (columna box) yéetel le concentración esquizofilano (SPG) ti' le filtrado (columna gris). Condiciones u ultrasonidos: Procesador ultrasónico UIP2000hd (20 kHz, 2000W)., sonotrodo BS2d22 ti', booster B2-1.4, amplitud 100 ti chúumuk, caudal 50 mL leti' s.
(wíimbala' ka xook: ©Smirnou et ti' le., 2017).

Máak u AFM (tu superior) yéetel perfil topográfico (tu inferior) u esquizofilano ultrasónico desnaturalizado. Medición tu modo semi-Contacto yéetel resolución 512 × 512 pxs2. Condiciones: recubrimiento táak'iin, constante resorte 15,3 N leti' pm ángulo le cono xnuk < 22°.
(wíimbala' ka xook: ©Smirnou et ti' le., 2017).
Ku ts'o'okole', le investigadores descubrieron ti' le procesamiento ultrasónico ti' le esquizofilano jach uchik escalable. Jump'éel unidad le desintegrador ultrasónico u páak'alo' piloto UIP2000hdT procesó 1 litro k'aab k'aab yéetel ichil 110 Guatemala mina'an u yotocho'ob ti' modo flujo. Productividad le u páajtal ya'abtal uchik yo'osal le conexión secuencial ti' u kúuchilo'ob ti' ultrasonido adicionales.
A wojeltik yóok'ol le sencilla ampliación extracción hongos!
Nu'ukulo'ob ultrasónicos u ka'anal rendimiento utia'al u procesamiento glucanos fúngicos
Le fragmentación ku polisacáridos, bey le glucanos, bey je'el bix ti' uláak' compuestos bioactivos, bey le quitina yéetel le quitosano, u procesar u bix fiable yéetel le nu'ukulo'ob ultrasónicos ka'anal rendimiento Hielscher. K ultrasonidos táan u béeytal u suministrar nukuch amplitudes, ku ts'abal jump'éel kaambalil yo'osal preciso u parámetros le tuukula' yéetel páajtal u meyaj le 24 horas k'iin, 7 k'iin ti' le k'iino'ob yáanal kuuch pesadas yéetel tu entornos exigentes. Le gama ti' u Hielscher Ultrasonics k'iin k'aaba' le requisitos bix fiable. Beyxan ti' kaambalilo'ob jump'éel excelente rendimiento ti' ultrasonidos, le ultrasonidos Hielscher kisbuts' jump'éel ka'anal eficiencia energética, ku supone jump'éel Páaybe'en ventaja leti' – especialmente ken u emplea ti' le producción comercial tu gran escala.
Le ultrasonidos Hielscher le kaambalilo'ob ti' ka'anal rendimiento ku páajtal equipar u yéetel accesorios bey sonotrodos, boosters, reactores wa celdas flujo utia'al u adaptar u bix u óptima u kajtalo'ob ichil u u tuukula'. Yéetel u pantalla digital u boonil ti', u opción u preestablecer le ejecuciones sonicación, le registro automático ti' datos ti' jump'éel tarjeta SD integrada, le kaambalil yo'osal remoto ti' le navegador yéetel ya'ab asab noj, ku garantiza le máximo kanik le tuukula' yéetel le facilidad búukinta'al. Yéetel le robustez yéetel le nuxi' Buka'aj u ba'al u kuuch, le kaambalilo'ob ultrasónicos u Hielscher le u tsíimin batalla fiable ti' le producción. Reducción le peso molecular ti' le β-glucanos, bey le esquizofilano, k'a'abet jump'éel potente ultrasonido tia'al le escisión deseada yéetel juntúul producto final ti' esquizofilano ka'anal calidad, u pajtal utilizar u utia'al aplicaciones farmacéuticas.
Kaxáant a wojeltik yóok'ol le extracción ultrasónica u betaglucano le hongos, incluidas le t'aano'ob paso in paso, waye'.
Le uláak' tabla ku ts'aik ti' jump'éel indicación le Buka'aj u ba'al u procesamiento aproximada u k ultrasonidos:
Volumen lote | Gasto | Dispositivos recomendados |
---|---|---|
U 1 u 500 ml | U 10 ti' 200 ml leti' min | UP100H |
U 10 ti' 2000 ml | Ti' 20 u 400 ml leti' min | UP200Ht, UP400St |
0. 1 u 20L | 0. 2 u 4L leti' min | UIP2000hdT |
U 10 u 100L | U 2 u 10 l leti' min | UIP4000hdT |
n.d. | U 10 ti' 100 L leti' min | UIP16000 |
n.d. | Mayor | Racimo u UIP16000 |
Xook k! Leti' k'áatiko'ob k!
Bibliografía leti' Referencias
- Smirnou, Dzianis; Knotek, Petr; Nesporova, Kristina; Smejkalova, Daniela; Pavlik, Vojtech; Franke, Lukas; Velebny, Vladimir (2017): Ultrasound-assisted production of highly-purified β-glucan schizophyllan and characterization of its immune properties. Process Biochemistry 2017.
- Zhong, Kui; Tong, Litao; Liu, Liya; Zhou, Xianrong; Liu, Xingxun; Zhang, Qi; Zhou, Sumei (2015): Immunoregulatory and antitumor activity of schizophyllan under ultrasonic treatment. International Journal of Biological Macromolecules, 80, 2015. 302–308.
- Kengo Tabata, Wataru Ito, Takemasa Kojima, Shozo Kawabata, Akira Misaki (1981): Ultrasonic degradation of schizophyllan, an antitumor polysaccharide produced by Schizophyllum commune fries. Carbohydrate Research, Volume 89, Issue 1, 1981. 121-135.
Datos u tojol le su'utalil K'ajóolt
esquizofilano – Jump'éel hongo β-glucano
Le esquizofilano, bey xan k'ajóolta'an je'el bix sizofiran, SPG, sonifilan, sizofilan, jach jump'éel polisacárido extracelular neutro producido tumen le hongo Schizophyllum commune Fries, jump'éel especie hongo Basidiomycetes. Le esquizofilano jach jump'éel beta-Mulix-glucano soluble, cuyo meyaj asab exacto láayli' ma' táan completamente dilucidado, ba'ale' le β-glucano específico ye'esik táanil inmunomoduladores ka antitumorales. Kex meyaj asab exacto ti' le sizofiran láayli' ma' u ts'o'ok dilucidado tumen k'iini', Le aj nu'uktaj bey xan le yaan inmunológico u ya'abtal le producción citoquinas, activar le macrófagos yéetel le células Langerhans yéetel ma'alo'obkíinsiko'ob u actividad le leucocitos polimorfonucleares (PML) yéetel le células asesinas meyaj (NK). Tu yilubáa u Sizofiran ka'ach bastante ineficaz xu'ullsa'al le k'ak'as k'oja'anil cáncer gástrico, ba'ale' tu jayaj le k'iin supervivencia ti' k'oja'ano'ob yéetel k'ak'as k'oja'anil cáncer u pool yéetel kaal. Ti' le k'ak'as k'oja'anil cáncer u kaal uterino, Sizofiran prolongó le supervivencia yéetel le k'iin tak le recurrencia ichil le ti' estadio II, ba'ale' ma' tu estadio III, ka tu ye'esaj jump'éel eficacia adicional ka u inyectó Jun ti' le juuch'o' tumoral. Sonifilan ku meyajtiko'ob bey modificador u núukik biológica (BRM) yéetel le radioterapia utia'al u Ts'a'akal le k'ak'as k'oja'anil cáncer ti' Japón. Lanzó utia'al le k'ak'as k'oja'anil cáncer u kaal uterino Koda u nojol ti' 1998.

Hielscher Ultrasonics fabrica homogeneizadores ultrasónicos u ka'anal rendimiento ichil laboratorio Utia'al Buka'aj industrial.