Schizophyallan jach jump'éel hongo β-glucano yéetel propiedades inmunomoduladoras. Utia'al u táanil ku ts'aakankil ma'alob activos, le esquizofilano k'a'ana'an yaantal jump'éel t'okik peso molecular utia'al we'esik jump'éel ma'alo'ob biodisponibilidad. U ts'o'ok demostrado ti' le ultrasonicación reduce le peso molecular ti' le esquizofilano. Bey método confiable yéetel xoknáalo'obo', le sonicación ku páajtal aplicar uchik utia'al u producción esquizofilán t'okik peso molecular.

Hongos Schizophyllum yéetel extracción ultrasónica u betaglucano

Le ba'alche'obo' le hongo Schizophyllum nuuktalo'ob ti' le ku ti' k'áaxo'ob tu descomposición ka' le estaciones lluviosas. Le wíinklil frutales u recogen le uláak' estación tikin. Le ba'alche'obo' Schizophyllum le xíimbalto'ob ti' compuestos bioquímicos bey le glucanos yéetel, tune', ku ken tijik u k'aab especialmente ti' le noj lu'umilo'obo' tropicales bey janalbe'eno'ob yéetel ts'aako'ob. Debido a u propiedades inmunomoduladoras, antifúngicas, antineoplásicas yéetel antivirales, Schizophyllum commune, bey xan conocida bey hongo Splitgill, u atraído compañías biotecnológicas yéetel farmacéuticas.
Le polisacárido esquizofilano, bey xan k'ajóolta'an bix sizofiran, sonifilan wa sizofilan, leti' le noj bejo' β-glucano u Kula'an ti' le hongos Schizophyllum, ku ts'abal le ma'alob efectivo bioactivo β-glucano esquizofilán.
Le hongos Schizophyllum commune nuuktalo'ob ti' le ku ti' le che'obo', le micelio xan ku páajtal cultivar ti' k'aab fermentación. Utia'al u aplicaciones farmacéuticas yéetel cosméticas, le esquizofilán t'okik peso molecular jach ya'ab asab xoknáalo'obo' u le esquizofilán ka'anal peso molecular. Le ba'ala' k'a'ana'an u jaajile' ti' u le esquizofilán t'okik peso molecular ye'esik jump'éel biodisponibilidad yéetel tasas absorción significativamente ti'. Ku ts'o'okole', le esquizofilán ka'anal peso molecular jach tu menudo problemático ti' le aplicaciones, ts'o'ok u ts'aik bey resultado ka'anal viscosidad u soluciones acuosas.
Le reducción ultrasónica le Buka'aj jach jump'éel láaka ma'alob efectiva ka confiable utia'al u xu'ulsiko'ob le peso molecular ti' le esquizofilán, aumentando bey le ma'alobil le molécula β-glucano.

Protocolo utia'al u producción esquizofilán t'okik peso molecular

Dado ti' le esquizofilán peso molecular ku ye'esik jump'éel biodisponibilidad yéetel propiedades ka'anatako'ob drásticamente ti', le nu'ukulil investigación Smirnou investigó le ultrasonicación utia'al u escisión yéetel u reducción le Buka'aj u molécula β-glucano esquizofilán.

Ultrasonicación u Schizophyllan

β-1.3 (1.6)-Glucan schizophyllan (SPG) ku produjo yo'osal le yéetel sumergido ti' le hongo S. commune ti' biorreactor utilizando sacarosa bey sustrato.
Ka' ts'o'ok u xuul le yéetel, u k'aab yéetel ku diluyó yéetel ja' desmineralizada concentración esquizofilán 2 g leti' L yéetel ku ultrasonicó yéetel le Procesador ultrasónico UIP2000hdT (Hielscher Ultrasonics GmbH, Alemania) tu modo reciclaje ti' le je'ela' parámetros yéetel condiciones: caudal chúumuk 50 mL leti' Guatemala mina'an u yotocho'ob, frecuencia 20 kHz, salida 2000 W, sonotrodo bin yano'ob BS2d22 ti', booster bin yano'ob B2-1.4 yéetel amplitud 100 ti chúumuk. Le temperatura u k'aab yéetel u comienzo le sonicación bin u 25 ° kuxtal U k'aab yéetel ultrasónico (yaan tu energía específica 100 Ws leti' mL) ku filtró ti' le filtro taamil Seitz HS800 ti' jump'éel presión 1,5 bar 40 ° kuxtal Le esquizofilán ultrasónico (uSPG) utia'al u caracterización química ku precipitó ichil le filtrado yéetel triple cantidad alcohol isopropílico ti' temperatura laboratorio, ka tijik u 60 ° C ti' 12 h le soluciones uSPG utia'al u inmunológicos xook u tu beetajo'ob ya'abkach u uláak' bix ken: (1). le filtrado k'aab yéetel ultrasónico ku diafiltraba yéetel cassette PES u 0,1 m2 Pall Centramate serie t'aano' (corte 100 kDa) u 0,8 bar yéetel le diafiltración continuó tak ka conductividad le retentado j-20 μS leti' cm; (2). le solución ku concentró tumen diafiltración concentración uSPG 1 g leti' L yéetel u esterilizó ti' autoclave u 120 ° C leti' 20 min. Le uSPG desnaturalizado u beet u kin tuukul similar, excepto ti' u agregó NaOH ti' le filtrado chakbil yéetel tu concentración 0,2 M yéetel le solución alcalinizada ku incubó ichil 30 min u temperatura laboratorio bey ma' u diafiltración.

Métodos analíticos

Le rendimiento micelio ku estimó gravimétricamente: u k'aab yéetel diluyó yéetel ja' 1:4, u centrifugaron 10000 × g 25 ° C ti' 20 min, le precipitado ku p'o'ik yéetel le triple cantidad ja', tijik 60 ° C yéetel ponderó. Le esquizofilán ku precipitó ichil sobrenadante yéetel triple cantidad alcohol isopropílico, tijik u 60 ° C ti' 24 h yéetel u rendimiento u determinó gravimétricamente. Le pO2 ti' u k'aab yéetel u p'í el yo'osal le sonda óptica Hamilton-Visiferm DO 120 (Hamilton, Suiza).
Le viscosidad dinámica ti' u k'aab yéetel u p'íis ti' HAAKE Visco Tester 6L yéetel husillos 1L yéetel 2L 4 ° C yéetel velocidad rotación 30 rpm. Le velocidad filtración ku calculó ichil le k'iin filtración u k'aab pak'al 500 ml yéetel 200 × filtro u taamil Seitz HS800 (Pall, EE. UU.) ti' 200 mm ti' jump'éel presión 1,5 bar yéetel 40 ° kuxtal
Le peso molecular ti' uSPG bin medido tumen SEC-MALLS ti' le yaan HPLC Alliance (Waters) yéetel columnas PL aquagel OH60 yéetel PL aquagel OH40 conectadas ti' serie, yéetel le detector miniDAWN TREOS (Wyatt) ku concentró tumen diafiltración concentración uSPG 1 g leti' L yéetel u esterilizó ti' autoclave u 120 ° C leti' 20 min. Le uSPG desnaturalizado u beet u kin tuukul similar, excepto ti' u agregó NaOH ti' le filtrado chakbil yéetel tu concentración 0,2 M yéetel le solución alcalinizada ku incubó ichil 30 min u temperatura laboratorio bey ma' u diafiltración.

Ya'ala'al máaxo'ob máano'ob:
Le Ts'a'akal ultrasonido ku aplicó Jun ti' u k'aab pak'al S. commune 144-h yéetel micelio utia'al u facilitar le procesamiento posterior ti' SPG.
 
Yáantajo'ob ti' Sonicated Schizophyllan: Le esquizofilán ultrasónico (uSPG) ku precipitó ichil jump'éel filtrado k'aab yéetel tumen alcohol yéetel u caracterizó. SEC-MALLS estimó u Mw uSPG le u paach u 1 MDa. Le peso molecular promedio u esquizofilán le fermentación líquida jach u yan 5 MDa, ka' jo'op' u ti' le yéetel tu estado sólido je'el chukpachtik tak 10 MDa. Comparando le peso molecular ti' le esquizofilán ultrasónico yéetel le pesos moleculares ti' le esquizofilán nativo ma' tratado, u páajtal u yilo'ob jump'éel peso molecular reducido u 5 u 10 Óoxten debido a le ultrasonicación.
Le polisacárido sonicado uSPG contenía 0,7 ti chúumuk p'el leti' p'el u proteína yéetel 1,0 ti chúumuk p'el leti' p'el u residuos ka' u ignición. Le hidrolizado ku uSPG consistió ti' glucosa yéetel asab ti' le 99 ti chúumuk. Ya'ala'al máaxo'ob máano'ob analíticos indican ti' le sonicación escinde le columna vertebral ti' β-glucano u béeytal in k'a'atik yéetel k'ab laterales permanecen intactas, reduciendo bey le Buka'aj yéetel le peso molecular ti' le esquizofilano. Xook inmunológicos yóok'ol uSPG esencialmente libres proteínas yéetel endotoxinas mostraron ti' le esquizofilán ultrasónico u t'okik Mw yaan jump'éel actividad inmunomoduladora pronunciada.

 
Viscosidad reducida: Le ultrasonicación resultó ti' jump'éel disminución significativa u viscosidad u k'aab yéetel. Ichil le ultrasonicación, le viscosidad u k'aab yéetel k'éexel bix ma' lineal: le disminución le viscosidad bin rápida u comienzo le ultrasónica, ba'ale' ts'o'okole' ku ralentizó. Yaan tu energía específica u 100 Ws leti' ml jool bin suficiente utia'al u xu'ulsiko'ob u viscosidad u k'aab yéetel óol 7 Óoxten.

Filtración mejorada: U k'aab yéetel tratado yéetel ultrasonido fluyó ti' le filtro asab séeba'an u u k'aab yéetel ma' tratado (yaan tu energía específica 0 Ws leti' ml) yéetel SPG ka'anal peso molecular. Ku ts'o'okole', le ultrasonicación redujo significativamente le asab producto ti' le filtración. Le filtrado k'aab yéetel ma' tratado yéetel SPG ka'anal peso molecular (yaan tu energía específica 0 Ws leti' mL) contenía 0,3 ± 0,07 g leti' L SPG, ka' jo'op' u concentración SPG bey ma' u filtración tu taamil ka'ach u 2 g leti' L. Ti' contraste, le filtrado yéetel ultrasónico u 100 Ws leti' mL contenía SPG ti' concentración 2.2 ± 0.2 g leti' L, ku ichil jump'éel asab producto óol nula.

Conclusión: Ti' u conclusión, le nu'ukulil investigación resume procesamiento ultrasónico ba'axi' jump'éel ma'alo'obtal eficiente utia'al u fabricación esquizofilán t'okik peso molecular, ku ts'o'okole' ku páajtal utilizar ti' cosméticos yéetel ts'aak. Le ultrasonicación, le kéen u aplica ti' k'aab yéetel k'iini' yéetel micelio, aporta ciertas ventajas ti' le producción esquizofilanos. Reduce le pérdidas producto ti' le procesamiento posterior yéetel ku páajtal le producción polisacáridos ma'alob purificados debido a u búukinta'al eficiente le ultrafiltración.
Ku ts'o'okole', le investigadores tu kaxtajo'ob u le procesamiento ultrasónico u schizophyllan le uchik escalable. Jump'éel unidad le desintegrador ultrasónico ti' le páak'alo' piloto UIP2000hdT procesó 1 litro k'aab k'aab yéetel ichil 110 Guatemala mina'an u yotocho'ob tu modo flujo. Productividad le u páajtal ya'abtal uchik yo'osal le conexión secuencial ti' u kúuchilo'ob ti' ultrasonido adicionales.

 
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Nu'ukulil ultrasónico u ka'anal rendimiento utia'al u procesamiento glucano fúngico

Le fragmentación ku polisacáridos bey le glucanos, bey je'el bix ti' uláak' compuestos bioactivos bey le quitina yéetel le quitosano, u procesar u bix fiable yéetel le nu'ukulo'ob ultrasonidos ka'anal rendimiento Hielscher. K ultrasonidos táan u béeytal u ofrecer nukuch amplitudes, ku ts'abal jump'éel kaambalil yo'osal preciso u parámetros le tuukula' yéetel páajtal u meyaj le 24 horas k'iin, 7 k'iin ti' le k'iino'ob yáanal kuuch pesadas yéetel tu entornos exigentes. Le gama ti' u Hielscher Ultrasonics k'iin k'aaba' le requisitos bix fiable. Beyxan ti' kaambalilo'ob jump'éel excelente rendimiento ti' ultrasonidos, le ultrasonidos Hielscher kisbuts' jump'éel ka'anal eficiencia energética, ku supone jump'éel Páaybe'en ventaja leti' – especialmente ken u emplea ti' le producción comercial tu gran escala.
Le ultrasonidos Hielscher le kaambalilo'ob ti' ka'anal rendimiento ku páajtal equipar u yéetel accesorios bey sonotrodos, amplificadores, reactores wa celdas flujo utia'al u satisfacer u kajtalo'ob ichil u tuukula' u bix ken óptima. Yéetel u pantalla digital u boonil, ku garantiza u opción u preestablecer le ejecuciones sonicación, le grabación yo'osal u datos ti' jump'éel tarjeta SD integrada, le kaambalil yo'osal remoto ti' le navegador yéetel ya'ab asab noj, le asab ka'anal kanik le tuukula' yéetel le facilidad búukinta'al. Yéetel le robustez yéetel le nuxi' Buka'aj u ba'al u kuuch, le kaambalilo'ob ultrasónicos u Hielscher le u tsíimin batalla confiable ti' le producción. Reducción le peso molecular ti' β-glucanos bey le esquizofilán k'a'abet jump'éel ultrasonido potente tia'al le escisión dirigida yéetel juntúul producto esquizofilano final u ka'anal calidad, ba'ax ku páajtal utilizar utia'al u aplicaciones farmacéuticas.
 
Kaxáant a wojeltik yóok'ol le extracción ultrasónica ti' betaglucanos setas, incluidas le t'aano'ob paso in paso, waye'.
 
Le uláak' tabla ku ts'aik ti' jump'éel indicación le Buka'aj u ba'al u procesamiento u aproximado k ultrasonicators: