Producción ultrasónica u esquizofilanos ma'alob purificados β-glucanos

Schizophyallan jach jump'éel hongo β-glucano yéetel propiedades inmunomoduladoras. Utia'al u táanil ku ts'aakankil ma'alob activos, le esquizofilano k'a'ana'an yaantal jump'éel t'okik peso molecular utia'al we'esik jump'éel ma'alo'ob biodisponibilidad. U ts'o'ok demostrado ti' le ultrasonicación reduce le peso molecular ti' le esquizofilano. Bey método confiable yéetel xoknáalo'obo', le sonicación ku páajtal aplicar uchik utia'al u producción esquizofilán t'okik peso molecular.

Setas Schizophyllum

Le hongo Schizophyllum commune ku taasik le β-glucano schizpphyllan, bey xan k'ajóolta'an je'el bix Sizofiran, SPG, Sonifilan, SizofilanLe ba'alche'obo' le hongo Schizophyllum nuuktalo'ob ti' le ku ti' k'áaxo'ob tu descomposición ka' le estaciones lluviosas. Le wíinklil frutales u recogen le uláak' estación tikin. Le ba'alche'obo' Schizophyllum le xíimbalto'ob ti' compuestos bioquímicos bey le glucanos yéetel, tune', ku ken tijik u k'aab especialmente ti' le noj lu'umilo'obo' tropicales bey janalbe'eno'ob yéetel ts'aako'ob. Debido a u propiedades inmunomoduladoras, antifúngicas, antineoplásicas yéetel antivirales, Schizophyllum commune, bey xan conocida bey hongo Splitgill, u atraído compañías biotecnológicas yéetel farmacéuticas.
Le polisacárido esquizofilano, bey xan k'ajóolta'an bix sizofiran, sonifilan wa sizofilan, leti' le noj bejo' β-glucano u Kula'an ti' le hongos Schizophyllum, ku ts'abal le ma'alob efectivo bioactivo β-glucano esquizofilán.
Le hongos Schizophyllum commune nuuktalo'ob ti' le ku ti' le che'obo', le micelio xan ku páajtal cultivar ti' k'aab fermentación. Utia'al u aplicaciones farmacéuticas yéetel cosméticas, le esquizofilán t'okik peso molecular jach ya'ab asab xoknáalo'obo' u le esquizofilán ka'anal peso molecular. Le ba'ala' k'a'ana'an u jaajile' ti' u le esquizofilán t'okik peso molecular ye'esik jump'éel biodisponibilidad yéetel tasas absorción significativamente ti'. Ku ts'o'okole', le esquizofilán ka'anal peso molecular jach tu menudo problemático ti' le aplicaciones, ts'o'ok u ts'aik bey resultado ka'anal viscosidad u soluciones acuosas.
Le reducción ultrasónica le Buka'aj jach jump'éel láaka ma'alob efectiva ka confiable utia'al u xu'ulsiko'ob le peso molecular ti' le esquizofilán, aumentando bey le ma'alobil le molécula β-glucano.

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Procesador ultrasónico UIP2000hdT utia'al u reducción Buka'aj esquizofilán (sizofiran, SPG, sonifilan, sizofilan).

Le ultrasonicador UIP2000hdT Ku utilizó belal utia'al u xu'ulsiko'ob le peso molecular ti' le esquizofilano, jump'éel hongo β-glucano

Protocolo utia'al u producción esquizofilán t'okik peso molecular

Dado ti' le esquizofilán peso molecular ku ye'esik jump'éel biodisponibilidad yéetel propiedades ka'anatako'ob drásticamente ti', le nu'ukulil investigación Smirnou investigó le ultrasonicación utia'al u escisión yéetel u reducción le Buka'aj u molécula β-glucano esquizofilán.

Ultrasonicación u Schizophyllan

β-1.3 (1.6)-Glucan schizophyllan (SPG) ku produjo yo'osal le yéetel sumergido ti' le hongo S. commune ti' biorreactor utilizando sacarosa bey sustrato.
Ka' ts'o'ok u xuul le yéetel, u k'aab yéetel ku diluyó yéetel ja' desmineralizada concentración esquizofilán 2 g leti' L yéetel ku ultrasonicó yéetel le Procesador ultrasónico UIP2000hdT (Hielscher Ultrasonics GmbH, Alemania) tu modo reciclaje ti' le je'ela' parámetros yéetel condiciones: caudal chúumuk 50 mL leti' Guatemala mina'an u yotocho'ob, frecuencia 20 kHz, salida 2000 W, sonotrodo bin yano'ob BS2d22 ti', booster bin yano'ob B2-1.4 yéetel amplitud 100 ti chúumuk. Le temperatura u k'aab yéetel u comienzo le sonicación bin u 25 ° kuxtal U k'aab yéetel ultrasónico (yaan tu energía específica 100 Ws leti' mL) ku filtró ti' le filtro taamil Seitz HS800 ti' jump'éel presión 1,5 bar 40 ° kuxtal Le esquizofilán ultrasónico (uSPG) utia'al u caracterización química ku precipitó ichil le filtrado yéetel triple cantidad alcohol isopropílico ti' temperatura laboratorio, ka tijik u 60 ° C ti' 12 h le soluciones uSPG utia'al u inmunológicos xook u tu beetajo'ob ya'abkach u uláak' bix ken: (1). le filtrado k'aab yéetel ultrasónico ku diafiltraba yéetel cassette PES u 0,1 m2 Pall Centramate serie t'aano' (corte 100 kDa) u 0,8 bar yéetel le diafiltración continuó tak ka conductividad le retentado j-20 μS leti' cm; (2). le solución ku concentró tumen diafiltración concentración uSPG 1 g leti' L yéetel u esterilizó ti' autoclave u 120 ° C leti' 20 min. Le uSPG desnaturalizado u beet u kin tuukul similar, excepto ti' u agregó NaOH ti' le filtrado chakbil yéetel tu concentración 0,2 M yéetel le solución alcalinizada ku incubó ichil 30 min u temperatura laboratorio bey ma' u diafiltración.

Métodos analíticos

Le rendimiento micelio ku estimó gravimétricamente: u k'aab yéetel diluyó yéetel ja' 1:4, u centrifugaron 10000 × g 25 ° C ti' 20 min, le precipitado ku p'o'ik yéetel le triple cantidad ja', tijik 60 ° C yéetel ponderó. Le esquizofilán ku precipitó ichil sobrenadante yéetel triple cantidad alcohol isopropílico, tijik u 60 ° C ti' 24 h yéetel u rendimiento u determinó gravimétricamente. Le pO2 ti' u k'aab yéetel u p'í el yo'osal le sonda óptica Hamilton-Visiferm DO 120 (Hamilton, Suiza).
Le viscosidad dinámica ti' u k'aab yéetel u p'íis ti' HAAKE Visco Tester 6L yéetel husillos 1L yéetel 2L 4 ° C yéetel velocidad rotación 30 rpm. Le velocidad filtración ku calculó ichil le k'iin filtración u k'aab pak'al 500 ml yéetel 200 × filtro u taamil Seitz HS800 (Pall, EE. UU.) ti' 200 mm ti' jump'éel presión 1,5 bar yéetel 40 ° kuxtal
Le peso molecular ti' uSPG bin medido tumen SEC-MALLS ti' le yaan HPLC Alliance (Waters) yéetel columnas PL aquagel OH60 yéetel PL aquagel OH40 conectadas ti' serie, yéetel le detector miniDAWN TREOS (Wyatt) ku concentró tumen diafiltración concentración uSPG 1 g leti' L yéetel u esterilizó ti' autoclave u 120 ° C leti' 20 min. Le uSPG desnaturalizado u beet u kin tuukul similar, excepto ti' u agregó NaOH ti' le filtrado chakbil yéetel tu concentración 0,2 M yéetel le solución alcalinizada ku incubó ichil 30 min u temperatura laboratorio bey ma' u diafiltración.

Reducción ultrasónica ti' le peso molecular ti' le hongo β-glucano esquizofilano (Sizofiran, SPG, Sonifilan, Sizofilan).

UIP2000hdT utia'al u reducción le peso molecular esquizofilano


Le ultrasonicación jach jump'éel método ma'alob xoknáalo'obo' utia'al u producción esquizofilán t'okik peso molecular u grado farmacéutico.

ultrasonicador UP400St (400W, 24kHz). utia'al u procesamiento esquizofilanos

Ya'ala'al máaxo'ob máano'ob:
Le Ts'a'akal ultrasonido ku aplicó Jun ti' u k'aab pak'al S. commune 144-h yéetel micelio utia'al u facilitar le procesamiento posterior ti' SPG.
Yáantajo'ob ti' Sonicated Schizophyllan: Le esquizofilán ultrasónico (uSPG) ku precipitó ichil jump'éel filtrado k'aab yéetel tumen alcohol yéetel u caracterizó. SEC-MALLS estimó u Mw uSPG le u paach u 1 MDa. Le peso molecular promedio u esquizofilán le fermentación líquida jach u yan 5 MDa, ka' jo'op' u ti' le yéetel tu estado sólido je'el chukpachtik tak 10 MDa. Comparando le peso molecular ti' le esquizofilán ultrasónico yéetel le pesos moleculares ti' le esquizofilán nativo ma' tratado, u páajtal u yilo'ob jump'éel peso molecular reducido u 5 u 10 Óoxten debido a le ultrasonicación.
Le polisacárido sonicado uSPG contenía 0,7 ti chúumuk p'el leti' p'el u proteína yéetel 1,0 ti chúumuk p'el leti' p'el u residuos ka' u ignición. Le hidrolizado ku uSPG consistió ti' glucosa yéetel asab ti' le 99 ti chúumuk. Ya'ala'al máaxo'ob máano'ob analíticos indican ti' le sonicación escinde le columna vertebral ti' β-glucano u béeytal in k'a'atik yéetel k'ab laterales permanecen intactas, reduciendo bey le Buka'aj yéetel le peso molecular ti' le esquizofilano. Xook inmunológicos yóok'ol uSPG esencialmente libres proteínas yéetel endotoxinas mostraron ti' le esquizofilán ultrasónico u t'okik Mw yaan jump'éel actividad inmunomoduladora pronunciada.

Le ultrasonicación ku aplica belal utia'al u xu'ulsiko'ob le peso molecular ti' le esquizofilano yo'osal u escisión le molécula yo'osal cavitación acústica.

Máak AFM (tu superior) yéetel perfil topográfico (tu inferior) u esquizofilán ultrasónico nativo. Medición tu modo semicontacto yéetel resolución 512 × 512 pxs2. Condiciones: recubrimiento táak'iin, constante resorte 15.3 N leti' pm ángulo cono xnuk <22°.

Viscosidad reducida: Le ultrasonicación resultó ti' jump'éel disminución significativa u viscosidad u k'aab yéetel. Ichil le ultrasonicación, le viscosidad u k'aab yéetel k'éexel bix ma' lineal: le disminución le viscosidad bin rápida u comienzo le ultrasónica, ba'ale' ts'o'okole' ku ralentizó. Yaan tu energía específica u 100 Ws leti' ml jool bin suficiente utia'al u xu'ulsiko'ob u viscosidad u k'aab yéetel óol 7 Óoxten.

Le ultrasonido UIP2000hdT ku meyajtiko'ob utia'al xu'ulsiko'ob eficazmente le Buka'aj le compuesto fúngico esquizofilano

Ultrasonicación chakbil pak'al S.commune, ba'ax ku obtuvo yo'osal pak'al hongos tu biorreactor ichil 144 h. Efecto le período ultrasonido (expresado bey yaan tu energía específica ti' Ws leti' mL) yóok'ol le velocidad filtración taamil u k'aab yéetel (columna box) yéetel le concentración esquizofilán (SPG) ti' le filtrado (columna gris). Condiciones ultrasonicación: Procesador ultrasónico UIP2000hd (20 kHz, 2000W)., sonotrodo BS2d22, amplificador B2-1.4, amplitud 100 ti chúumuk, caudal 50 mL leti' s.
(wíimbala' ka xook: ©Smirnou et ti' le., 2017).

Filtración mejorada: U k'aab yéetel tratado yéetel ultrasonido fluyó ti' le filtro asab séeba'an u u k'aab yéetel ma' tratado (yaan tu energía específica 0 Ws leti' ml) yéetel SPG ka'anal peso molecular. Ku ts'o'okole', le ultrasonicación redujo significativamente le asab producto ti' le filtración. Le filtrado k'aab yéetel ma' tratado yéetel SPG ka'anal peso molecular (yaan tu energía específica 0 Ws leti' mL) contenía 0,3 ± 0,07 g leti' L SPG, ka' jo'op' u concentración SPG bey ma' u filtración tu taamil ka'ach u 2 g leti' L. Ti' contraste, le filtrado yéetel ultrasónico u 100 Ws leti' mL contenía SPG ti' concentración 2.2 ± 0.2 g leti' L, ku ichil jump'éel asab producto óol nula.

Le sonicación mejora significativamente le shizophyllan.

Ultrasonicación chakbil pak'al S.commune, ba'ax ku obtuvo yo'osal pak'al hongos tu biorreactor ichil 144 h. Efecto le período ultrasonido (expresado bey yaan tu energía específica ti' Ws leti' mL) yóok'ol le velocidad filtración taamil u k'aab yéetel (columna box) yéetel le concentración esquizofilán (SPG) ti' le filtrado (columna gris). Condiciones ultrasonicación: Procesador ultrasónico UIP2000hd (20 kHz, 2000W)., sonotrodo BS2d22, amplificador B2-1.4, amplitud 100 ti chúumuk, caudal 50 mL leti' s.
(wíimbala' ka xook: ©Smirnou et ti' le., 2017).

Le ultrasonicación ku meyajtiko'ob utia'al u xu'ulsiko'ob le peso molecular ti' le esquizofilán, jump'éel compuesto bioactivo derivado ti' le hongos.

Máak AFM (tu superior) yéetel perfil topográfico (tu inferior) u esquizofilán ultrasónico desnaturalizado. Medición tu modo semicontacto yéetel resolución 512 × 512 pxs2. Condiciones: recubrimiento táak'iin, constante resorte 15.3 N leti' pm ángulo cono xnuk < 22°.
(wíimbala' ka xook: ©Smirnou et ti' le., 2017).

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Conclusión: Ti' u conclusión, le nu'ukulil investigación resume procesamiento ultrasónico ba'axi' jump'éel ma'alo'obtal eficiente utia'al u fabricación esquizofilán t'okik peso molecular, ku ts'o'okole' ku páajtal utilizar ti' cosméticos yéetel ts'aak. Le ultrasonicación, le kéen u aplica ti' k'aab yéetel k'iini' yéetel micelio, aporta ciertas ventajas ti' le producción esquizofilanos. Reduce le pérdidas producto ti' le procesamiento posterior yéetel ku páajtal le producción polisacáridos ma'alob purificados debido a u búukinta'al eficiente le ultrafiltración.
Ku ts'o'okole', le investigadores tu kaxtajo'ob u le procesamiento ultrasónico u schizophyllan le uchik escalable. Jump'éel unidad le desintegrador ultrasónico ti' le páak'alo' piloto UIP2000hdT procesó 1 litro k'aab k'aab yéetel ichil 110 Guatemala mina'an u yotocho'ob tu modo flujo. Productividad le u páajtal ya'abtal uchik yo'osal le conexión secuencial ti' u kúuchilo'ob ti' ultrasonido adicionales.

Nu'ukulil ultrasónico u ka'anal rendimiento utia'al u procesamiento glucano fúngico

Le UIP4000hdT jach jump'éel potente mezclador ultrasónico ti' internet ichil 4000 vatios.Le fragmentación ku polisacáridos bey le glucanos, bey la compuestos bioactivos bey le quitina yéetel le quitosano, ku páajtal procesar u kin tuukul confiable yéetel le nu'ukulil ultrasónico u ka'anal rendimiento Hielscher. K ultrasonidos táan u béeytal u ofrecer altas amplitudes, ku ts'abal jump'éel controlabilidad precisa yóok'ol le parámetros le tuukula' yéetel u páajtal u operar 24 leti' 7 yáanal kuuch pesadas yéetel entornos exigentes. Le gama ti' u Hielscher Ultrasonics k'iin k'aaba' le requisitos bix fiable. Beyxan ti' kaambalilo'ob jump'éel rendimiento ultrasonido excepcional, le ultrasonidos Hielscher kisbuts' jump'éel ka'anal eficiencia energética, le ku jump'éel ventaja leti' significativa. – especialmente ken u emplea ti' le producción comercial tu gran escala.
Le ultrasonidos Hielscher le kaambalilo'ob ti' ka'anal rendimiento ku páajtal equipar u yéetel accesorios bey sonotrodos, amplificadores, reactores wa celdas flujo utia'al u satisfacer u kajtalo'ob ichil u tuukula' u bix ken óptima. Yéetel u pantalla digital u boonil, ku garantiza u opción u preestablecer le ejecuciones sonicación, le grabación yo'osal u datos ti' jump'éel tarjeta SD integrada, le kaambalil yo'osal remoto ti' le navegador yéetel ya'ab asab noj, le asab ka'anal kanik le tuukula' yéetel le facilidad búukinta'al. Yéetel le robustez yéetel le nuxi' Buka'aj u ba'al u kuuch, le kaambalilo'ob ultrasónicos u Hielscher le u tsíimin batalla confiable ti' le producción. Reducción le peso molecular ti' β-glucanos bey le esquizofilán k'a'abet jump'éel ultrasonido potente tia'al le escisión dirigida yéetel juntúul producto esquizofilano final u ka'anal calidad, ba'ax ku páajtal utilizar utia'al u aplicaciones farmacéuticas.

Le uláak' tabla ku ts'aik ti' jump'éel indicación le Buka'aj u ba'al u procesamiento u aproximado k ultrasonicators:

Volumen lote Tasa flujo Dispositivos recomendados
1 u 500mL 10 200 mL leti' min UP100H
10 u 2000mL 20 400 mL leti' min. UP200Ht, UP400St
0.1 ti' 20L 0.2 u 4 L leti' min UIP2000hdT
10 ti' 100L 2 10 L leti' min UIP4000hdT
N.a. 10 100 L leti' min UIP16000
N.a. asab nojoch Cluster u UIP16000

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Le homogeneizadores ultrasónicos u ka'anal cizallamiento ku utilizan ti' le laboratorio, le mayakche'o' meyaj, le piloto yéetel le procesamiento industrial.

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Literatura leti' Referencias

Hechos u tojol le su'utalil K'ajóolt

Esquizofilán – Jump'éel hongo β-glucano

Schizophyllan, bey xan k'ajóolta'an je'el bix sizofiran, SPG, sonifilan, sizofilan, jach jump'éel polisacárido extracelular neutro producido tumen le hongo Schizophyllum commune Fries, jump'éel especie hongo Basidiomycetes. Le esquizofilano jach jump'éel beta-Mulix-glucano soluble, cuyo meyaj asab exacto láayli' ma' táan completamente dilucidado, ba'ale' le β-glucano específico ye'esik táanil inmunomoduladores ka antitumorales. Kex meyaj asab exacto ti' sizofiran láayli' ma' u ts'o'ok dilucidado tumen k'iini', Le aj nu'uktaj bey xan le yaan inmunológico u ya'abtal le producción citoquinas, activar le macrófagos yéetel le células Langerhans yéetel ma'alo'obkíinsiko'ob u actividad le leucocitos polimorfonucleares (PML) yéetel le células asesinas meyaj (NK). Sizofiran tu yilubáa bastante ineficaz xu'ullsa'al le k'ak'as k'oja'anil cáncer gástrico, ba'ale' tu jayaj le k'iin supervivencia ti' k'oja'ano'ob yéetel k'ak'as k'oja'anil cáncer pool yéetel kaal. Ti' le k'ak'as k'oja'anil cáncer u kaal uterino, Sizofiran prolongó le supervivencia yéetel le k'iin tak le recurrencia utia'al le ku ti' estadio II, ba'ale' ma' ti' le estadio III, ka tu ye'esaj jump'éel eficacia adicional ka u inyectó Jun ti' le juuch'o' tumoral. Sonifilan ku meyajtiko'ob bey jump'éel modificador u núukik biológica (BRM) yéetel radioterapia utia'al u Ts'a'akal le k'ak'as k'oja'anil cáncer ti' Japón. J-lanzado utia'al le k'ak'as k'oja'anil cáncer u kaal uterino Koloa u nojol ti' 1998.


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