Ma'alo'obtal u ultrasonido Hielscher

Lisis tumen sonicación: Interrupción t'aan & Extracción

Desintegración ti' le célula wa lisis jach jump'éel tu'ux común u cotidiana wa u yilik muestras ti' laboratorios biotecnología. U lisis le alterar le pak'chaje' le pak'o' t'aan wa u célula kuuch utia'al u liberar le moléculas biológicas. Le llamado lisado je'el u páajtal u consistir tumen ejemplo, plásmido, ensayos ti' receptores, proteínas, DNA, RNA etcetera. Je'ela' wook le lisis le ku ti', aislamiento organelas wa leti' ka extracción proteínas yéetel depuración. Le xooko'obo' extraído (= lisado) yaan u beel separado yéetel táan sujeto ti' uláak' investigaciones wa aplicaciones, je'ebix, utia'al investigaciones proteómicas. Homogeneizadores ultrasónicos le jump'éel nu'ukula' común utia'al u lisis acertado ti' le célula. Bix u intensidad ultrasónica u nivelar u ajustando le parámetros le tuukula', le intensidad óptima u sonicación u taj susulkij u jach Chich u ajustar u individualmente utia'al u Amal sustancia junsáap' le utia'al u beetik le requisito u yutsil meyáajtiko'ob específico.

Ba'ax le célula

Le células táan protegidas tumen juntúul membrana plasmática semipermeable ku consiste ti' jump'éel bicapa Fosfo-lípidos (xan bicapa u proteínas-lípidos; formada tumen lípidos hidrofóbicos ka joop hidrofílico moléculas yéetel le moléculas proteínas integrado) yéetel crea jump'éel barrera ichil le interior ti' le célula (citoplasma) yéetel le jeets' extracelular. Células procariotas yéetel le células vegetales u rodeadas tumen juntúul pak'o' t'aan. Debido a ya'ab k'oja'ano'ob capas xtóop' pak'o' t'aan u celulosa ti', le células vegetales ku asab talam u lisar le células animales. Yaan tu ts'u' le célula bey orgánulos, núcleo, mitocondria, jach u estabilizado tumen le citoesqueleto.
Tuméen lisis ti' le células, ku ts'aabal extraer yéetel separar le organelos, proteínas, ADN, ARNm jump'éel uláak' biomoléculas.

Le sonicación ku meyajtiko'ob comúnmente utia'al wa u muestra u t'aan yo'olal yilik.

Figura 1: Extracción ultrasónica ti' le células: le sección transversal microscópica (TS) ti' le tallo apical ti' menta (Mentha piperita) ye'esik meyaj meyajo'ob ichil le extracción ultrasónica ti' le células (ampliación x 2000) [recurso: Vilkhu et el., 2011]

Métodos

Yaan ya'ab métodos utia'al u lisado células, ba'ax u páajtal ja'atsal ti' métodos mecánicos yéetel químicos, u incluyen u búukinta'al detergentes wa solventes, le ka'anatako'ob ka'anal presión, wa u búukinta'al jump'éel molino u grano wa ti' jump'éel prensa francesa. Le desventaja asab problemática ti' le métodos jach talam kanik ka ajuste le parámetros u tal modo impacto.
Le k'ajle' desventajas ti' le métodos náats'al ti' lisis:

Yo'osal jejelas lisis

Tabla: Le métodos convencionales ti' lisis t'aan yaan nukuch desventajas

Tuméen le contrario, le sonicación jach jump'éel nu'ukula' jach eficiente yéetel confiable utia'al u desintegración le célula ba'ax ku cha'antik jump'éel kanik total yóok'ol le parámetros sonicación. Le ba'ala' asegura jump'éel ka'anal selectividad ti' materiales pureza versión yéetel producto. [Balasundaram et el. 2009] Le adecuado utia'al tuláakal bin yano'ob t'aan yéetel uchik aplicable te' chan yéetel nuxi' escala. Ultrasonicators ku fáciles u cho'oik. Juntúul homogenizador ultrasónico yile' Mantats' kin púusik-ti'-kúuchil (CIP) yéetel esterilización in situ (SIP) función. Le sonda consiste ti' jump'éel cuerno titanio masiva u páajtal u limpiado wa lavado ichil ja' wa solvente (bin u ka'a meyaj). Le mantenimiento ultrasonicators jach debido a u robustez óol neglectable.

lisis u

Lisis jach jump'éel tuukula' sensible. Ichil le lisis u protección u membrana u célula le destruida, ba'ale' le inactivación, desnaturalización yéetel degradación le proteínas extraídas tumen juntúul jeets' unphysiological (desviación le je'o' pH) k'a'abéet Jech u. Tune', tu general lisis ku bisik ka'ansaj ti' jump'éel solución tampón. Asab toopo'ob interrupción t'aan u incontrolada u ts'áaik kúuchil ti' jump'éel liberación ma' focalizada u xooko'obo' intracelular tuláakal o leti' ka u desnaturalización le producto objetivo.

Lisis t'aan u ultrasónico táan u béeytal u utilizado utia'al wa u muestras yilik ti' le laboratorio yéetel utia'al producción nukuch volúmenes. Beetik click utia'al u agrandar!

Homogeneizador ultrasónico potente u Fig. 1:200 vatios UP200Ht yéetel kaambalil yo'osal digital yéetel automática datos grabación lisis t'aan confiable ka reproducible.

Lisis ultrasonidos

Ba'axten lo general, u yaan u lisis le muestras ti' le laboratorio ichil kex teen jo'olajun segundos yéetel 2 minutos. Bix u intensidad táankab ultrasonidos ch'a'abil jach u ajustar tumen juntúul k'iin sonicación amplitud, bey ti' le elegir le nu'ukulil le yáax, le páajtal alterar le membranas celulares táaj O'olkij wa jach abruptamente dependiendo de le ba'ax t'aan yéetel le propósito lisis () je'ebix, le extracción ADN k'a'abet asab O'olkij sonicación, extracción proteína completa ti' bacterias k'a'abet jump'éel Ts'a'akal asab ku ts'tantik u ultrasonido). Le temperatura ichil le tuukula' je'el u páajtal u monitoreada tumen juntúul sensor u temperatura integrado yéetel je'el u páajtal u uchik controlada tumen refrigeración (hielo wichkíil flujo ti' le células wa yéetel chaquetas enfriamiento) wa tumen sonicación ti' modo pulsado. Ichil u sonicación le modalidad impulso, sonicación kóom explosión ciclos ku bisik 1 u 15 segundos permiten utia'al u disipación ooxoj ka kaambal ti' le chowaktako'ob periodos intermitentes.
Tuláakal le procesos basados ti' le ecografía ku linealmente escalable yéetel jaatsatako'ob reproducible.

Homogeneizador ultrasónico VialTweeter utia'al u kaxtik wa u yilik le muestra simultánea u tak 10 tubos u ensayo. (Click utia'al agrandar!).

Le dispositivo ultrasónico VialTweeter Cha' wa u le muestra simultánea u tak 10 viales yáanal meyajo'ob condiciones tuukula' yilik.

Homogeneizadores ultrasónicos

Ya'ab tipos ti' Aparatos ultrasonidos permiten utia'al u emparejar u wa u le muestra yilik yéetel utia'al asegurar u comodidad u meyajo'ob yéetel facilidad búukinta'al. Ultrasonicators bin yano'ob sonda le le dispositivos asab náats'al ti' le laboratorio. Asab adecuados le utia'al u preparación muestras mejen yéetel Buka'aj mediano yéetel juntúul volumen 0,1 mL tak 1000 mL. Sonotrodos ka potencia jejeláas tamaños permiten utia'al u adaptar le ultrasonicador utia'al u volumen muestra yéetel le buque utia'al u asab eficaces yéetel eficientes resultados sonicando. Le dispositivo xnuk prueba ultrasónica jach le utsil opción ka le muestras chéen yaan u yaantal preparados.

Wa asab muestras yaan u yaantal preparados, je'ebix, 8 frascos ti' solución t'aan, dispositivos bey le VialTweeter wa jump'éel cuphorn ultrasónico táan u homogeneizador asab yáax utia'al u lisis. Ku sonicó ya'ab frascos ti' le k'iino' je'el xano' k'iin, ti' le ti' jump'éelili' kuchil-intensidad. Este ahorra ma' chéen k'iin, ba'ale' xan asegura le k'iino' je'el xano' Ts'a'akal tuláakal le muestras, ku beetik u ya'ala'al máaxo'ob máano'ob ichil le muestras confiables yéetel comparables. Ku ts'o'okole', ku evita contaminación sumergiendo le ultrasónico sonda (sonda ultrasónica xan k'ajóolta'an bix, cuerno, xnuk wa yaal). Tu ts'áaj u utilizan frascos, desperdiciador k'iin limpieza yéetel asab muestra debido a u decantación le buques ku omiten.
Utia'al u mayores volúmenes, je'ebix, utia'al u producción comercial u extractos celulares, sistemas ultrasónicos continuo yéetel juntúul reactor celda flujo ku asab convenientes. Le flujo continuo yéetel xan u le xooko'obo' procesado asegura jump'éel sonicación páajtal. Tuláakal le parámetros le tuukula' desintegración ultrasónica táan u béeytal u optimizados ka ajustados le requerimientos le ka'anatako'ob yéetel le xooko'obo' específico ti' le célula.

Procedimiento ejemplar utia'al u ultrasonidos lisis le células bacterianas:

  • Wa u suspensión t'aan yilik: gránulos le célula k'a'abéet u jaatsatako'ob suspendidas ti' jump'éel solución tampón tumen homogeneización (elija u solución compatible yéetel le uláak' análisis, método u cromatografía je'ebix específico buffer). Añadir lisozimas yéetel leti' jump'éel uláak' aditivos, wa k'a'abéet (k'a'ana'an u xan compatibles yéetel separación leti' medios purificación). Mezcla leti' homogeneizar le solución suavemente yáanal O'olkij sonicación tak logra jump'éel suspensión completa.
  • Lisis ultrasonidos: colocar le muestra ti' jump'éel wichkíil hielo. Utia'al u interrupción le célula, someter u ultrasonidos le suspensión ti' 60-90 segundos estalla (usando modo pulso u ultrasonicador).
  • Separación: Centrifugar le lisado (je'ebix 10 min in 10.000 x g; ti' 4degC). Separar u sobrenadante u precipitado u células cuidadosamente. Le sobrenadante jach le lisado nu'ukul-t'aan total. Ka' ts'o'ok u filtración le sobrenadante, tech kéen p'áatak jump'éel líquido clarificado ti' le proteína soluble ti' le célula.

Le aplicaciones jach náats'al ti' ultrasonicators ti' biología yéetel biotecnología ku:

  • Wa u extracto t'aan yilik
  • Interrupción u levadura, bacterias, células le páak'alo' O'olkij & tejido célula chuchul, u xooko'obo' nucleico
  • Extracción proteínas
  • Preparación ka aislamiento enzimas
  • Producción u antígenos
  • Extracción ADN yéetel / wa fragmentación dirigida
  • wa u liposomas yilik
Homogeneizadores ultrasonidos ka'anal potencia je'el bix u UIP1000hd le utilizados utia'al u interrupción ti' le célula yéetel extracción ti' batch wa continuo - kex le modo. (Click utia'al agrandar!).

Sistemas ultrasonido sobremesa bey le UIP1000hd (1kW) je'el u páajtal u procesar mayores volúmenes biológico xooko'obo'.

Le ya'ab k'oja'ano'ob aplicaciones le ultrasonido ramifica tak náachil ti' meatsil u biotecnología, bioingeniería, microbiología, biología molecular, bioquímica, Inmunología, bacteriología, virología, proteómica, genética, fisiología, biología t'aan, hematología, yéetel le botánica.

Utia'al u yila'al yéetel u optimización aplicaciones le clientes, ultrasonidos Hielscher k'u'ubul jump'éel k'iini' equipamiento Laboratorio tuukula' ultrasónico. Búukint u ti' máax ku To'one' utia'al a wojeltik!

Literatura leti' referencias

  • Balasundaram ti', B.; Harrison ti', S.; Bracewell, D. G. (2009): Avances ti' producto yo'osal ch'iino' u impacto ti' le diseño bioprocesos. Tendencias tu biotecnología 27 leti' 8, 2009. PP. 477-485.
  • Vilkhu, k'uj.; Manasés, r.; Mawson, r.; Ashokkumar, M. (2011): ingredientes ultrasónico recuperación yéetel uchik u péeksa'al u janalbe'eno'ob. Ti': Feng leti' Barbosa-Cánovas leti' Weiss (2011): tecnologías ultrasonido yo'osal le alimentación yéetel bioprocesamiento. Nueva York: Springer ti', 2011. págs. 345-368.

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T'aan yéetel to'on yóok'ol u kajtalo'ob ichil u procesamiento. Recomendamos le parámetros configuración yéetel u le tuukula' asab adecuados utia'al u tsol.





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