Aplicaciones ultrasónicas ti' le virus MonkeyPox
Le ultrasonicación jach jump'éel método procesamiento k'a'abéet utia'al u aislamiento u virus u k'áak' ti' le maaxo' (MPXV) tu muestras analíticas, utia'al u fragmentación u ADN le virus, bey je'el bix ti' le fabricación vacunas xu'ullsa'al le viruela le maaxo'. Utia'al u wa u muestras yilik bey ma' le diagnóstico yéetel análisis (PCR, ELISA, etc.) ku meyajtiko'ob ultrasonido utia'al u lisar le células con el fin de liberar u virus u k'áak' ti' le maaxo' tak yaan tu ts'u' le célula yéetel leti' o utia'al fragmentar le ADN. Ti' le producción vacunas, le aplicaciones ku bino'ob tak wa u partículas virus yilik leti' ADN, le encapsulación ti' portadores medicamentos yéetel u formulación le inóculo.
Tu continuación u kaxtik a'alajil t'aan detallada yo'osal wa u muestras ultrasónicas u virus u k'áak' le maaxo' yilik, bey le producción vacunas MPXV asistidas tumen ultrasonidos.
Ku encontrarás ti' le linki abas kaambal:
- Lisis ultrasónica utia'al u extracción le virus monkeypox
- Fragmentación ultrasónica u ADN u virus u k'áak' ti' le maaxo'
- Aplicaciones ultrasónicas ti' le producción vacunas MPXV
Le t.u.m 2 ultrasonidos 1kW utia'al operación flujo continuo ku instala jump'éel instalación producción vacunas.
Lisis ultrasónica yéetel fragmentación le ADN bey ma' u reacción ti' tsolokbal ti' le polimerasa (PCR).
Jump'éel infección tumen le virus u k'áak' k'áak' le maaxo' ku detecta yo'osal pruebas amplificación ácido nucleico (NAAT), utilizando u reacción ti' tsolokbal ti' le polimerasa (PCR) convencional wa tu k'iinil xíimbal tumen, utia'al u detección secuencias únicas u ADN viral. Le muestra (je'ebix, u intercambio nasofaríngeo wa biopsias yoot'el) ku taasik le virus ti' le células.
Utia'al le análisis, le virus k'a'ana'an liberar u ti' le células yéetel le ADN viral k'a'ana'an fragmentar u utia'al PCR.
Lisis ultrasónica:
Le disrupción leti' lisis t'aan ultrasónica u ti'al jump'éel método confiable yéetel eficiente aislar virus muestras celulares yéetel, tune', jump'éel láaka preferible ti' le agentes químicos, bey le lisozima, le proteinasa k'uj yéetel jejeláas detergentes ku utilizan alternativamente utia'al u kaxta'al u yúuchul le lisis t'aan yéetel le liberación ADN.
Ba'ale' u búukinta'al tales reactivos químicos k'a'abet jump'éel wa u le muestra k'a'abet ya'ab k'iin ti' ya'ab wook bey ma' análisis PCR yilik utia'al Jech inhibición le reacción PCR. Dado ti' le inhibidores PCR afectan u eficiencia le amplificación, mejen variaciones le cantidad inhibidores ma' u eliminan páajtal conducir u nukuch variaciones ti' le amplificación le producto PCR (Diaco, 1995).
Ventaja le ultrasonicación utia'al u lisis jach u jach deseable le interrupción completa ti' le ka'ansaj celulares yéetel le liberación ku ADN ma' u necesidad u reactivos u lisado yéetel wa u muestras láaj jáabal u moots ya'ab k'iin yilik. (cf. Fykse et ti' le., 2003).
Fragmentación ultrasónica ti' le ADN:
Le fragmentación ultrasónica ti' le ADN jach simple yéetel confiable, ts'o'ok u yaantal fragmentos u ADN sintonizables ti' longitud (pares bases, bp). Usando ultrasonido, le ADN je'el u páajtal u efectivamente fragmentado ti' le longitud ADN objetivo. U kaambalil yo'osal preciso yóok'ol le parámetros ultrasónicos yéetel le sofisticadas opciones enfriamiento evitan u degradación le ADN.
Lea asab yóok'ol le fragmentación ultrasónica ti' le ADN!
Aplicaciones ultrasónicas ti' le vacuna xu'ullsa'al le virus u k'áak' ti' le maaxo'
Le vacunas utilizadas xu'ullsa'al le virus u k'áak' le maaxo' le bejla'e' vacunas virus vivos. Le vacunas ts'oonak desarrolladas k'a'ana'antal u biilankiltej uláak' plataformas bey le basadas ti' ADN bejla'e' ku taasik jump'éel Vaccinia Ankara viurs juubulo'ob, jump'éel orthopoxvirus atenuado yéetel ma' replicante. Xan ku taasik Tris (tris-aminometano) yéetel cloruro sodio. Le vacuna xan u xu'ulsa'al mejen yaan xan ya'abach ADN yéetel proteínas le células fibroblastos embrionarios u káax, ka u utilizan utia'al u cultivar u virus le vacuna, le benzonasa yéetel le compuestos antibióticos bey le gentamicina yéetel le ciprofloxacina.
Le homogeneización ultrasónica ku meyajtiko'ob ti' le producción vacunas virus vivos atenuados, vacunas ADN ti', cócteles ADN multivalente, vacunas ARNm, vacunas proteínas recombinantes, vacunas partículas similares ti' virus, etc.
- dispersión partículas yéetel agentes virus
- emulsificación
- inactivación virus
- formulación portadora fármacos (NLC, SLN).
- encapsulación
- disolución agentes
- wa u adyuvantes yáalab
- Desgasificación leti' u-Aireación
Protocolo utia'al u aislamiento ultrasónico ti' le virus Monkeypox
Le nu'ukulil investigación Stittelaar (2005) utilizó le lisis ultrasónica ti' liberar u virus u k'áak' ti' le maaxo' u pak'al células huésped tuméen, bey je'el bix ti' le células obtenidas yéetel intercambios kaal primates infectados.
Wa u vacuna xu'ullsa'al le k'áak' ti' le maaxo' yilik:
Le virus u k'áak' ti' le maaxo' ku cultivaron células fibroblastos embrionarios u libres u patógenos específicos káax. Ka' ts'o'ok u incubación ti' 1 u 2 k'iino'ob, le suspensión células ti' le virus ku recolectó yo'osal jump'éel ronda congelación-descongelación ka ts'o'okole' ku concentró tumen centrifugación. Le pellet bin resuspendido ka sometido ya'abkach rondas homogeneización ultrasónica.
Aislamiento u virus u k'áak' ti' le maaxo' macacos vacunados:
Le muestras ku congelaron yéetel descongelaron Óoxten yéetel ku sonicaron ti' jump'éel CupHorn ultrasónico. Tu utilizaron ka'atúul diluciones (1:10 yéetel 1:100) chúumuk transporte suplementadas yéetel suero bovino fetal ti' le 1 ti chúumuk utia'al inocular monocapas células Vero ti' placas 6 pocillos. Ka' 1 h incubación ti' 37 ° C, le inóculos bino'ob retirados ka reemplazados tumen juntúul ka'a yéetel suplementado yéetel suero bovino fetal ti' le 1 ti chúumuk. Le monocapas ku cultivaron ichil 5 k'iino'ob u 37 ° C yéetel u tiñeron yéetel juntúul solución violeta jach.
(cf. Stittelaar et ti' le., 2005).
Ultrasonidos utia'al u análisis virus yéetel producción vacunas
Le amplia cartera yik'áalil Hielscher Ultrasonics k'u'ubul le beetike' uts utia'al laboratorios investigación yéetel análisis ultrasonido, bey je'el bix ti' le fabricación industrial u vacunas.
Hielscher Ultrasonics táan especializada ti' le diseño, fabricación yéetel distribución ultrasonidos yéetel sonobiorreactores ka'anal rendimiento uti'al u ti' laboratorios investigación yéetel análisis, bey je'el bix utia'al u implementación ti' le producción industrial u vacunas (je'ebix, vacunas, Apis).
Le sonicación ku páajtal aplicar u recipientes abiertos, reactores cerrados agitación continua yéetel reactores flujo continuo. Tuláakal le tu'ux le kaambalilo'ob ultrasónicos, ku yokol ti' máax ku le chúumuk líquido, u hechas u acero inoxidable, titanio wa vidrio. Le páajtal a autoclavables yéetel le accesorios sanitarios garantizan producción t'okik condiciones u grado farmacéutico.
Registro automático u datos: Le software na'at registra parámetros le tuukula' sonicación automáticamente ti' le tarjeta memoria SD integrada. U kaambalil yo'osal preciso ti' tuláakal le parámetros le tuukula' garantiza u le Reproducibilidad, normalización le producción, ka facilita u cumplimiento le normas ti' seguridad le yik'áalil farmacéuticos.
Hielscher Ultrasonics’ Le procesadores ultrasónicos ku ma'alob confiables yéetel u páajtal controlar yéetel precisión. Tuláakal le ultrasonidos industriales ku páajtal ajustar utia'al u ofrecer le rango k'iini' u amplitudes asab bajas u jach altas. Robustez le kaambalilo'ob ultrasónicos u Hielscher ku cha'antik jump'éel funcionamiento 24 leti' 7 tu entornos u mayaj aal ka exigentes.
Le uláak' tabla ku ts'aik ti' jump'éel indicación le Buka'aj u ba'al u procesamiento u aproximado k ultrasonicators:
| Volumen lote | Tasa flujo | Dispositivos recomendados |
|---|---|---|
| placas multipocillo leti' microtitulador | n/a | UIP400MTP |
| 1 u 500mL | 10 200 mL leti' min | UP100H |
| 10 u 2000mL | 20 400 mL leti' min. | UP200Ht, UP400St |
| 0.1 ti' 20L | 0.2 u 4 L leti' min | UIP2000hdT |
| 10 ti' 100L | 2 10 L leti' min | UIP4000hdT |
| n/a | 10 100 L leti' min | UIP16000 |
| n/a | asab nojoch | Cluster u UIP16000 |
Ti' máax ku yéetel to'on! Leti' k'áatiko'ob k!
Ultrasónico ADN corte
Tu'ux u Jkwchui yáanal CC-BY-SA.03
Literatura leti' Referencias
- Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
- Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidov in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
- J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
- Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
- Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.
Hechos u tojol le su'utalil K'ajóolt
Virus u k'áak' ti' le maaxo'
K'áak' ti' le maaxo' (MPV, MPXV wa hMPXV) leti' jump'éel especie virus ADN naaj tsolokbal, ku causa jump'éel k'oja'anil zoonótica viral. Le k'oja'anil u leti'e', k'ajolo'on bey infección tumen viruela le maaxo' yéetel u ocurrir ti' humanos yéetel ba'alche'ob. Pertenece ti' le género Orthopoxvirus u láak'o'ob Poxviridae. Le virus u k'áak' ti' le maaxo' jach juntúul ti' le virus ortopoxvirus yóolo'ob yéetel le virus ti' le variola (VARV), le k'áak' ti'ob bovina (CPX) yéetel le vaccinia (VACV). Le orthopoxvirus ku caracterizan tumen nukuch partículas virus ti' bix u ladrillo, ku ya'alik juntúul genoma ADN naaj tsolokbal yan 200,000 pb.
Ensayo ELISA
ELISA u Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay yéetel le jump'éel marcado inmunoensayo u considera le estándar táak'iin le inmunoensayos. ELISA jach jump'éel prueba inmunológica, valorada tumen u ka'anal sensibilidad diagnóstica, ba'ax ku meyajtiko'ob yo'osal detectar yéetel cuantificar moléculas, incluidos anticuerpos, antígenos, proteínas, glicoproteínas yéetel hormonas. Le principio ELISA ku basa jump'éel interacción antígeno-anticuerpo. Tuméen le interacción antígeno-anticuerpo, le anticuerpos específicos ku unen ti' u antígeno ba'ax ku kaxtik. Chéen ka yaantal le interacción, le sustrato u unir u ti' le enzima yéetel u páajtal uts' jump'éel tzeltalo'obo' posterior ti' le sustrato, ba'ax u k'áat u ya'al ku obtiene jump'éel resultado positivo.
Hielscher Ultrasonics fabrica homogeneizadores ultrasónicos u ka'anal rendimiento Laboratorio Utia'al Buka'aj industrial.