Ya ensayos komongu ar ELISA ar utilizan ampliamente pa ar diagnóstico in vitro, ar detección proteínas relacionadas ko ar enfermedades ne ar control ar hño (nt'udi, ar monitoreo ar alérgenos alimentarios). Ar nt'ot'e muestras ultrasónicas ge 'nar técnica ngut'a, fiable ne reproducible pa análisis celulares ne aislar proteínas intracelulares, ADN, ARN ne ar orgánulos. Hielscher Ultrasonidos ofrece ndunthe soluciones ultrasónicas pa jar nt'ot'e mahyoni muestras Nthuts'i, múltiples viales, nja'bu komongu pa placas microtíter ne placas 96 ar me̲he̲.

Elisa – Ensayo inmunoabsorbente ligado enzimas

ELISA ir bo̲ni ensayo inmunoabsorbente ligado enzimas ne ge 'nar técnica ar análisis bioquímico ampliamente utilizada ar categoría ensayos mfats'i jar ligandos. Jar ELISA, bí añade 'nar muestra líquida ja 'nar fase sólida estacionaria ko propiedades ar mfats'i hontho. Normalmente, ar fase sólida estacionaria da t'uni komongu recubrimiento ja 'nar placa pozo wa placa ELISA. Tso̲kwa continuación, varios ya reactivos líquidos ar añaden, incuban ne lavan secuencialmente, ja modo da ngäts'i da produce 'nar cambio óptico (nt'udi, ár nte njät'i ya producto 'nar reacción enzimática) jar líquido final ja ar pozo. Ar cambio óptico permite medir yá 'bede ya ar analito ja 'nar llamado “leyendo". Pa ar da cuantitativa, ar gi japu̲'be̲fi 'nar espectrofotómetro, fluorómetro wa luminómetro pa detectar ne medir ar intensidad da transmitida. Ar sensibilidad ar detección xí influenciada ir nge ar amplificación ar señal Nxoge ya reacciones analíticas. Dado da reacciones ya enzimáticas gi 'bu̲hu̲ xi hño investigadas ne ar utilizan procesos ar amplificación fiables, ya enzimas ar utilizan pa da t'ot'e jar señal. Ya enzimas gi 'bu̲hu̲ vinculadas ja ya reactivos detección jar proporciones fijas pa hegi nuna ar Hmunts'i 'nar cuantificación precisa, nä'ä gi mä 'nehe thuuhu ensayo inmunoabsorbente "ligado enzimas jar hmä".
Komo ya ensayos ELISA ar realizan jar placas microtíter yá placas ya 96 me̲he̲, pädi komongu técnica ensayo basado jar placas ne bí gi japu̲'be̲fi, ngu, jar diagnóstico clínico in vitro, nthoni, nte fármacos, etc. pa detectar ne cuantificar anticuerpos, péptidos, proteínas ne ar hormonas.
Ar técnica ELISA ar gi japu̲'be̲fi xi frecuencia komongu herramienta diagnóstico jar 'ñithi, biotecnología, patología vegetal ne 'nehe ge 'nar mahyoni t'e̲ni ya control hño jar múltiples ar industrias.

Nt'ot'e muestras ultrasónicas hontho ELISA

Ante nda pa ga OT'UJE ar ensayo ELISA, ya muestras requieren pasos mfädi tales como ar lysis ar celular ne ar extracción ar proteínas intracelulares, ADN, ARN, etc. Ar ventaja ar lysis celular ultrasónica ne ar aislamiento proteico ge ár mextha dätä nt'ot'e, ar fiabilidad ne ar reproducibilidad. Nuya factores mahyoni pa da diagnósticos mextha ar hño ne resultados nthoni

Nthuts'i nkohi pa ar lísis celular ultrasónica pre-ELISA

• Pa cultivos celulares: 'Bu̲ 'be̲tho ar lysis celular ultrasónica, células centrífugas Nxoge 5 ya t'olo ora da 270 x g jar 'na microcentrífuga. Retire sobrenadante ir nge ya células ya aspiración ne ya resuspendida jar 30 — 100 l tampón RIPA. Ne gem'bu̲ bí incubar ar pellet celular dige ar hielo Nxoge 30 ar min.
• Nu'bya, ar muestra celda xi hñoki pa ar lílisis ultrasónica:
  Utilice 'nar ultrasonicador ar klase sonda (nt'udi. UP200Ht ko sonda S26d2) wa 'nar dispositivo ultrasónico multimuestra (nt'udi, VialTweeter pa sonicación simultánea asta 10 viales wa ar UIP400MPT pa placas microtíter yá placas ya 96 me̲he̲) dependiendo de yá 'bede ya muestras da necesite hoki.
  Pa ar sonicación ar klase sonda sola 'nar muestra, coloque ya células tubos ar microcentrífuga 1,5 ar ml.
• Ajuste mpakuthuu ár duración ultrasónica, entrada energía Nxoge, modo ciclo ne / wa ntsoni mpat'i jar menú 'bede ar ultrasonicador. 'Me̲hna garantiza 'nar sonicación ne repetibilidad altamente fiables.
• Inset ar sonotrodo ne ar encienda ar dispositivo ultrasónico. Mueva suavemente ar micro-punta ar sonda ultrasónica a través de muestra pa sonicar dá gi 'ñudi uniformemente.
  Mäs xingu ya células, pa ar lysis ultrasónica ar completará 'mefa xta 2 — 4 ciclos sonicación 10 ar seg.
• 'Mefa xta sonicación, retire ar sonotrodo ar muestra. Ya muestras tsa da incubadas jar hielo Nxoge 5 ar min. Ne gem'bu̲ bí centrifugar bí 10.000 x g Nxoge 20 ya t'olo ora pa ar peletizar ya escombros. Transfiera ya sobrenadantes ja 'nar 'ra'yo tubo ar microcentrífuga. Etiquetar ya analitos ne conservar jar — 20oC.
• Ar sonotrodo ar ultrasónico ar tsa̲ da limpiar limpiando bí correctamente ko alkol wa sonicado ja 'nar Baso ar precipitados lleno alkol, ngu, 70% etanol. Ga̲tho ya sondas ultrasónicas nu'u̲ xi hokya ar titanio ya autoclavables.

• Enjuague ar tejido PBS helado (0, 01M, pH — 7, 4) pa da hñäki ya exceso ya ji hemólisis ts'o̲e.
• Pesar tejido (riñón, mu̲i, pulmón, bazo, etc.) ne macerar nä'ä jar trozos t'olo, da homogeneizan jar PBS. Volumen PBS requerido xi relacionado ko ar be̲xu ar tejido. Ngu t'uni jar nt'ot'e Nxoge, 1g tejido requiere aprox. 9mL PBS. Ar recomienda añadir 'nar inhibidor ar proteasa ja ar PBS. (RIPA wa tampón lelisis hipotónica da contiene ya proteasa ne cóctel inhibidor ar fosfatasa ar tsa̲ da utilizar alternativamente.)
• Dependiendo de ar tamaño ar tejido, 'nar nt'ot'e hingi maa ar vórtice (aprox. 1 — 2 min. jar 15 seg. pulsos) to da útil pa japi mpakuthuu ar tejido.
• Monte 'nar micro-punta, ngu S26d2, ko ár ultrasonicador. Coloque tubo muestra ko ar tejido 'nar nsaha hielo.
• Sonicar dá gi 'ñudi ko ár ultrasonicador, ngu, UP200St (80% amplitud) Nxoge 1 min. jar modo pulso (15 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i encendido, 15 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i ar pausa). Mantenga ar muestra jar nsaha hielo.
• Ya homogeneizatos ar centrifugan pa da piscinas específicas (citosólicas, nucleares, mitocondriales wa lisosomales) jar 'mui enriquecer proteína pa ár análisis. Ya ar centrifugar ar muestra Nxoge 5 ya t'olo ora da 5000×g, bí recupera ar sobrenadante.

Control mpat'i fiable Nxoge ar sonicación

Ar mpat'i ge 'nar factor crucial da influye jar proceso ar hontho mahyoni pa ar nt'ot'e ya muestras biológicas, ngu, pa da mä 'met'o degradación térmica proteínas. Ga̲tho ya técnicas mecánicas nt'ot'e muestras, komongu ar sonicación crea pa. Wat'i, ar mpat'i ya muestras to da xi hño controlada nu'bu̲ da utilizan ya dispositivos Hielscher Ultrasonics. Bí presentamos ndunthe ya opciones pa monitorear ne controlar ar mpat'i yá muestras Mente ya preparamos ko ar ultrasonicador ar klase sonda wa ar VialTweeter pre — analíticamente.

1. Monitorización ar mpat'i ar muestra: ga̲tho ya procesadores ultrasónicos digitales Hielscher gi 'bu̲hu̲ equipados 'nar software inteligente ne 'nar sensor mpat'i conectable. Conecte sensor mpat'i ja ar dispositivo ultrasónico (hne. ej.,) UP200Ht, UP200St, VialTweeterUIP400MTP) ne inserte ár nts'ä sensor mpat'i jar 'na ya tubos muestra. A través de ar pantalla táctil ar njät'i 'bede, pe configurar jar menú ar procesador ultrasónico 'nar rango ar mpat'i específico pa ár sonicación ar muestra. Ar ultrasonicador ar detendrá automáticamente nu'bu̲ ar alcance ar mpat'i máxima ne detenga asta ar mpat'i ar muestra baje ár hmädi mäs hñets'i'i ar mpat'i establecida ∆. Tso̲kwa continuación, ar sonicación ar gi du̲i automáticamente ar nuevo. Nuna ar función inteligente evita degradación inducida ir nge ar pa.
2. Dige ar ar xe̲ni multimuestra ultrasónica VialTweeter, bloque titanio, da sostiene ya tubos muestra, ar tsa̲ da preenfriar. Coloque bloque VialTweeter (ho̲ntho ar sonotrodo hinda transductor!) jar ar refrigerador wa congelador pa preenfriar bloque titanio ayuda bí posponer ar aumento ar mpat'i ja ar muestra. Nu'bu̲ xähmä, muestra jar hä 'nehe ar tsa̲ da preenfriar.
3. Use 'nar nsaha hielo wa hielo seco pa enfriar Nxoge ar sonicación. Coloque ar (ya) tubo (s) ar muestra Nxoge ar sonicación 'nar nsaha hielo. Pa ar VialTweeter, utilice 'nar bandeja tx'u̲tho profunda ár ñut'i ko xingu ya hielo seco ne coloque VialTweeter dige ar hielo seco pa ndi ar pa tsa disipar ar rápidamente.

Ya clientes nga̲tho utilizan ar sonda-ultrasonidos Hielscher, nja'bu̲ komongu ya unidades sonicación multimuestra VialTweeter ne UIP400MTP pa ár 'be̲fi diario nt'ot'e muestras jar laboratorios biológicos, ar bioquímicos, ya médicos ne ya clínicos. Ar software ar inteligente ne ar control mpat'i ya procesadores Hielscher, ar mpat'i controla dets'e fiable ne bí evita ar degradación muestra inducida ya pa. Ar nt'ot'e muestras ultrasónicas ko soluciones ultrasónicas Hielscher ofrece resultados altamente fiables ne reproducibles!