Hielscher Ultrasonics
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Extracción ultrasónica proteínas a partir de tejidos ne cultivos celulares

  • Extracción proteínas ge 'nar bi thogi esencial jar nt'ot'e muestras jar proteómica.
  • Ya proteínas xi extraer ar tejidos vegetales ne me̲ti, levaduras ne microorganismos.
  • Ar sonicación ge 'nar nt'ot'e ár extracción ar proteínas fiable ne ya nt'ot'e xi hño da proporciona ya altos rendimientos proteínas ja 'nar hingi maa pa extracción.

Extracción proteínas tejidos ne células

Extracción proteínas tejidos ne células cultivadas ge 'nar bi thogi esencial ar nt'ot'e muestra realiza Nxoge xingu ya técnicas bioquímicas ne analíticas komongu ar ELISA, PAGE, Western blot, espectrometría masas wa purificación proteínas. Ar disrupción, ar lisis ne ar extracción celular ultrasónica ge 'nar técnica hingi térmica controlable ko precisión pa garantizar mar hñets'i 'nar rendimiento ar proteínas.

Nu'bu da 'yadi ungumfädi




Pets'i ja ma Nt'eje privacidad.




Ya ultrasonidos ar klase sonda, komongu ar UP200St ya homogeneizadores tejidos fiables ne ampliamente utilizados pa jar nt'ot'e muestras ár nthoni genética ne ar proteómica.

Extracción proteínas ya células ko ar sonda ultrasónica UP200St

Ventajas ar lisis ar ultrasónica ne ar extracción proteínas
 

  • Ngutha
  • Altos rendimientos
  • Altamente nt'ot'e xi hño
  • Control preciso ya parámetros
  • Resultados reproducibles
  • Escalabilidad lineal

Instrucciones Nxoge pa ar lisis ar ultrasónica ne ar extracción proteínas

  • Control mpat'i: Pa garantizar 'nar mar hñets'i rendimiento proteico hinda desnaturalización térmica, ar da controlar ar mpat'i Nxoge ar extracción. Homogeneizadores ultrasónicos thuhú generación Hielscher – 'Nehe llamado desintegrador ultrasónico wa ya ultrasonificador – ya controlables ko ya precisión. Ba ko 'nar sensor mpat'i enchufable. Ja ya opciones ar za ar homogeneizador ultrasónico, ar to da t'ot'e 'nar mpat'i máxima. Nu'bu̲ ar alcanza xí mpat'i máxima, ar ultrasonido ar detiene automáticamente asta ar muestra ar xi enfriado.
  • Búfer: Ar jwahni 'nar tampón ar adecuado ne ar volumen adecuado tampón varía ja 'nar tejido jar ma'na ne da jäts'i ar ir nge ya pruebas ya ensayo ne ya error.
  • Aislamiento yá purificación: Ya lisados proteínas xi contener 'nar exceso biomoléculas komongu ar ADN wa ya hidratos carbono, nä'ä xi da hñäki da ir nge ya precipitación proteínas (ácido desoxicolato — tricloroacético) wa ir nge ar mpa̲ti tampones.

Chittapalo ne Noomhorm (2009) informaron jar ár estudio da rendimiento ya proteínas aumentaba ir nge ar sonicación ne da proceso ya homogeneización ne ya lisis ya tejidos ya ultrasonidos to mejorar significativamente ya procesos ar extracción 'bui – habilitando ya 'ra'yo hño extracción yá 'ma.
 

CupHorn ultrasónico pa jar nt'ot'e simultánea muestras múltiples muestras da ehese̲ ya nkohi pa ar aislamiento ar proteínas ne ar fragmentación ar ADN.

cupHorn ultrasónico pa ar nt'ot'e simultánea ne altamente xi hño muestras múltiples muestras jar da ehese̲ ya nkohi pa ar aislamiento ar proteínas ne ar fragmentación ar ADN.

Extracción proteínas tejidos animales

Ultrasonido UP100H ge 'nar homogeneizador laboratorio nä'ä da gi japu̲'be̲fi tso̲kwa menudo pa jar nt'ot'e muestras placas cultivo celular.Pa ar nt'ot'e tejido tamaño entero (nt'udi, riñón, mu̲i, pulmón, etcétera muscular), ar tejido da diseccionar ar jar trozos xi t'olo ko bo̲jä nu'u̲ limpias, preferiblemente jar hielo, ne nä'ä mäs rápidamente dar tsa̲ da nu'bu ar degradación ya proteasas (nt'udi, tampón ar lisis komongu RIPA wa tampón lisis hipotónica da contiene 'nar cóctel inhibidores proteasa ne fosfatasa). 'Mefa xta disección, ar muestra bí sumerge jar nitrógeno líquido pa ár congelación ar instantánea. La muestra puede almacenarse a -80 °C para su uso posterior o mantener ar hielo para una homogeneización inmediata. Ngut'a 'be̲tho ar extracción ultrasónica, ar añade rápidamente ma tubo muestra 'nar tampón ar lisis helado (ko inhibidores de proteasa DTT, ar leupeptina ne ar aprotinina) (por ~10 mg de tejido, se recomiendan aproximadamente ~600 μL de tampón). Ar recomiendan aprox. 20 — 60 mg ar tejido ya tubo muestra.
Ar homogeneización, ar lisis ne ar extracción ultrasónica ar realiza ko 'nar homogeneizador ultrasónico komongu ar UP100H wa ar UP200Ht, equipado ko 'nar sonotrodo micropunta. Ar duración ar sonicación ar 60 — 90 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i ja 'nar modo ciclo ultrasónico 15 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i ar sonicación ne ar 10 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i ya pa reposo. Ar muestra da zeti jar hielo nga̲tho ar pa.
'Me̲fa ar homogeneización yá extracción ultrasónica, ar lisado bí centrifuga bí 27.000 ar g Nxoge 'ra 20 t'olo ora. Tso̲kwa continuación, bí recoge ar sobrenadante ja modo da concentración proteínas to jäts'i ar ir nge 'nar ensayo proteínas komongu ar ensayo proteínas BCA ar Pierce.

Extracción proteínas ar suero sanguíneo

Da uni 'nar mezcla homogénea ar suero ne ar tampón fosfato, ar muestra bí vórtice 'me̲t'o 'be̲tho ar lisis celular ultrasónica. Pa ar lisis ultrasónica, ar muestra bí sonica ko 'nar homogeneizador laboratorio ultrasónico komongu ar UP100H Nxoge 8 ciclos jar ar 20% ar amplitud, pa ciclos ku̲t'a ya 'na̲te ya mfe̲ts'i kadu 'na encendido ne 15 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i apagados. Extracción proteínas ar lleva da t'ot'e xi hño ir nge ya sonicación jar ciclos (modo ar pulsación) ne colocando ar muestra hielo pa nu'bu ar sobrecalentamiento ne ar degradación térmica ar muestra. Dado ne ar suero contiene 'nar Nar dätä hño yá 'bede ya proteínas alto peso molecular (komongu albúmina, α1-antitripsina, transferrina, haptoglobulina, inmunoglobulina G e inmunoglobulina A), da interfieren ko ar separación proteínas hñets'i'i be̲xu molecular Nxoge ar IEF, ar recomienda agotar ya ja ar suero utilizando 'nar columna depleción.

Extracción proteínas a partir de tejidos vegetales

Ar tejido vegetal xi 'ru̲ki ne blando, ngu, musgo, etcétera, pe alterar ar hingi hembi da simplemente colocando ar he̲'mi muestra picado 'nar tampón lisis pa ar sonicación. Ya tejidos vegetales duros ne leñosos, komongu ar semillas, agujas abeto, etcétera, tsa ju̲ní ar jar seco. 'Ra ya materiales vegetales duros ne leñosos tsa da congelar ne ju̲ní ar jar nitrógeno líquido nu'bu da extraídos ya sonicación. Ts'ut'ubi nu'bu ya suspensiones cultivos células vegetales, 'nar nt'ot'e ultrasónico de entre 30 ne 150 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i ja 'nar tampón lisis ge xingu. Ya materiales mäs duros, komongu ya semillas calabaza, requieren 'nar sonicación mäs intensa, ngu ar pede tso̲kwa continuación.
 

Nuna tutorial gi mä Temu̲ ar klase ar sonicador ge ar mäs xi hño pa yá tareas ya nt'ot'e muestras, komongu ar lisis, ar disrupción celular, aislamiento proteínas, ar fragmentación ya ADN ne ya ARN jar laboratorios, análisis ne nthoni. Elija ar klase ar sonicador ideal pa ár nt'ot'e, volumen muestra, ya 'bede ya muestra ne ya rendimiento. Hielscher Ultrasonics pe̲ts'i ar homogeneizador ultrasónico ideal pa gí.

Tema tingigi mbo jar sonicador perfecto pa ar disrupción ar celular ne ar extracción proteínas jar ciencia ne análisis

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Nthuts'i nkohi pa extracción ultrasónica albúmina semillas calabaza

Homogeneizador ultrasónico tejidos UP400St ko S24d40 — pa ar extracción proteínas tejidos vegetales ne me̲ti ('yot'e clic pa ntu̲ngi!)Pa ar extracción ultrasónica proteínas albúmina a partir de polvo semillas ar calabaza finamente molidas, ar añaden 10 g polvo semillas ar calabaza desgrasadas ne 100 ml ar dehe desionizada komongu disolvente ja 'nar Baso ar precipitados vidrio 250 ar ml. Extracción proteínas tsu̲di hñu ya yoho ya pasos: jar ndu̲i lugar, ar muestra bí sonica ko 'nar ultrasonido ar klase sonda UP400St (400W, 24kHz) equipado ko sonotrodo S24d7. Ar Baso vidrio ar coloca ja 'nar nsaha ar dehe fría Nxoge ar homogeneización ultrasónica. Sensor mpat'i enchufable ne ya ajustes control mpat'i ultrasonido UP400St garantizan ke ar mpat'i ar muestra bí mantenga nzäm'bu̲ por debajo de ya 30°c.ndunthe Ir nge ar control preciso ar mpat'i Nxoge jar sonicación, bí evita ar desnaturalización ar albúmina. Jar segundo lugar, la extracción se realizó con un mezclador a un velocidad de 200 rpm y a 30°C. Tso̲kwa continuación, ar Baso ar precipitados bí transfiere ja 'nar agitador termostático. Ar globulina ar extrae ir nge ya diálisis ko ar dehe destilada. 'Me̲fa ar eliminación ar globulina, ar xi muestrear ar extracto proteico pa ar tsa da jäts'i perfil albúmina ne 'mefa da ajusta ya pI = 3,0 utilizando 0,1 M HCl pa ar coagulación ar albúmina. Ar fase sólida separa ya centrifugación 5000 g, 20 °C ne se vuelve a disolver en agua desionizada. Ar coagulación albúmina ar realiza yoho ya 'nandi pa aumentar nä'ä da 'yadi wa ya proteínas ja ar concentrado ar albúmina.

Extracción ultrasónica proteínas alcalinas pa jar nt'ot'e concentrado proteínas a partir de salvado Arros gi 'ñudi ke ár nt'ot'e ultrasónico xta komongu ar nt'uni 'nar dätä rendimiento proteico ja 'nar pa extracción significativamente mäs corto – ja ar comparación ko ya nt'ot'e ar extracción convencionales.

Nuna ar videoclip gi 'ñudi ar homogeneizador ultrasónico UP100H ar Hielscher, ultrasonido ampliamente utilizado pa jar nt'ot'e muestras jar laboratorios.

homogeneizador ultrasónico UP100H

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Nthuts'i nkohi nt'ot'e muestras pa ar enzima iNOS funcional

Da uni 'nar enzima iNOS completamente funcional (nt'udi, pa ar cribado fármacos), bí recomienda ar Xtí nthuts'i nkohi: ar suspensión celular da hoki hielo ne sonicarse ko 'nar UP100H 'nar amplitud 10μ m jar modo ciclo ku̲t'a ya 'na̲te ya mfe̲ts'i ar sonicación ne ar 25 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i ar reposo jar hielo. Ar nt'ot'e da 'yo̲t'e ar aprox. 3 ya 'nandi. Ar pa reposo ja ya ciclos sonicación reduce aumento mpat'i ne, ir reducirá riesgo desnaturalización.

Solubilización ultrasónica proteínas

Ar sonicación ar tsa̲ da acelerar ar proceso solubilización proteínas, ne nu'bu̲ da nthe̲hu̲ 'ra requiere ndunthe ya ora. Pa hingi sobrecalentar jar muestra ne nu'bu ar degradación proteínas ne nyokwi jar soluciones da contienen ya urea, ya nangu̲ndähi ultrasónicas hingi tsa durar mäs de 'ra pocos ya 'na̲te ya mfe̲ts'i.

Ar VialTweeter ge 'nar ko ya ultrasónico único pa sonicación simultánea asta 10 viales jar exactamente da ehese̲ ya nkohi hinda contaminación cruzada.

UP200St ko VialTweeter pa ar sonicación viales cerrados

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Ultrasonido UP200Ht ko microtip S26d2 pa lisis ultrasónica muestras biológicas

ultrasonido UP200Ht ko microtip S26d2 ar 2 mm pa ar sonicación muestras t'olo.

Equipos ultrasónicos pa ar extracción proteínas

Hielscher Ultrasonics ofrece 'nar nt'ot'e ho 'bui ndunthe gama homogeneizadores ultrasónicos pa ar desintegración ar células, tejidos, bacterias, microorganismos, levaduras ne ar esporas.
Ya ultrasonidos laboratorio Hielscher ya potentes ne ya fáciles ya 'ye̲. Construidos da funcionar ya 24 ora ar pa, 7 ya pa ar su̲mänä gi 'bu̲hu̲ diseñados komongu dispositivos laboratorio ne sobremesa robustos ne eficientes. Pa nga̲tho ya dispositivos, ár nts'edi salida ne ar amplitud ar xi controlar ko ya precisión. Ar nt'ot'e ho 'bui ndunthe gama accesorios gi xoki mäs opciones configuración. Ya ultrasonidos digitales, komongu ar VialTweeter, ar UP200Ht, ar UP200St ne ar UP400St, pe̲ts'i 'nar control ar mpat'i mfaxte ne 'nar tarheta SD incorporada pa ar registro automático datos.
Pa ar sonicación indirecta, simultánea ne hinda contaminación cruzada ndunthe ya muestras, ofrecemos ar VialTweeter wa ar CupHorn ultrasónico.
Xtí tabla bí ofrece ar 'nar visión Nxoge HMUNTS'UJE ultrasonidos pa jar nt'ot'e muestras, ar disrupción ar celular ne ar extracción. 'Yot'e clic jar ar klase ar dispositivo da uni mäs ungumfädi dige ya homogeneizador ultrasónico. Ma jä'i técnico, xi hño mí pe̲ts'i 're̲t'a ne ko ndunthe ya mfeni, da encantado ar bí da 'BATS'I da 'ñets'i ar ultrasonido xí adecuado pa jar nt'ot'e yá muestras.
 

Volumen lote Gasto Dispositivos recomendados
Ga 10 ar viales wa ya tubos n.d. VialTweeter
Placas multipocillo yá microtitulación n.d. UIP400MTP
Múltiples tubos yá recipientes n.d. Cuphorn
Ar 1 jar 500 ml Ar 10 200 ml yá min UP100H
Ar 10 da 1000 ml Ar 20 200 ml yá min UP200Ht, UP200St
Ar 10 da 2000 ml Ar 20 400 ml yá min UP400St

Dependiendo de ár nt'ot'e, hñei ne volumen muestra, bí recomendaremos ar configuración xí adecuada pa ár nt'ot'e muestras. Ga japi ar jar contacto ko ngekagihe nu'bya!

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Utilice da ku̲hu̲ formulario pa da 'yadi ungumfädi adicional dige ya homogeneizadores ultrasónicos, ya aplicaciones jar biotecnología ne proteómica, nja'bu ngu ya precios. Estaremos encantados ñä ko nu'i dige ár proceso disrupción celular ne extracción ar proteínas ne ar ofrecer bí 'nar ultrasonido da cumpla yá ndu.









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Ar vídeo gi 'ñudi ko ya nt'ot'e muestras ya ultrasonidos UIP400MTP, da permite ar nt'ot'e fiable muestras 'na placa multipocillo estándar ir nge ya ultrasonidos mextha ar intensidad. Ya aplicaciones típicas ar UIP400MTP incluyen ar lisis celular, ar cizallamiento ar ADN, ar ARN ne ar cromatina, nja'bu Komo ar extracción proteínas.

Ultrasonidos UIP400MTP pa ar sonicación placas multipocillos

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Ya ultrasonidos Hielscher xi controlar bí ma mbi a través de ar control ar navegador. Ya parámetros sonicación ar xi monitorear ne ajustar ko ya precisión ja ya requisitos ar proceso.

Ya ultrasonidos digitales Hielscher pede yá 'bede ko 'nar mando mbi ya navegador ne 'nar nthuts'i nkohi automático ar datos 'na jar tarheta SD 'mui.

Dispositivo ultrasónico VialTweeter pa ar extracción proteínas muestras tejido ('yot'e clic pa ntu̲ngi!)

VialTweeter pa ar sonicación indirecta.



Datos da Bale ar penä ga pädi

proteómica

Ar proteómica ge hwähi nthoni da investiga ya proteínas ne ar proteoma. Ya proteínas cumplen 'nar nt'ot'e ho 'bui ndunthe gama 'befi vitales mbo ja ya hmunts'i. Ar proteoma ge nga̲tho ar conjunto proteínas xi hño ir nge 'nar genoma, célula, tejido wa organismo ja 'nar t'olo ora determinado. Ar proteoma varía ko ar pa ne ko ya 'na'ño requisitos, wa tensiones, ya nä'ä bí somete 'nar célula wa ya organismo. Mäs específicamente, ar conjunto proteínas xi hño jar determinado 'nar klase ar célula wa organismo, nu'bu̲ 'nar t'olo ora dado, jár nkohi njäts'i. Ar ngäts'i ge 'nar mezcla ya proteínas ne ya genoma. Ar proteómica ge ar estudio ar proteoma.

proteína

Ya proteínas ya dätä biomoléculas, llamadas ya macromoléculas – ne gi compuestos ir nge 'nar wa mäs cadenas largas ar residuos aminoácidos. Ya proteínas gi 'bu̲hu̲ 'bui nga̲tho ya Hmunts'i, tanto 'rini vegetal komongu me̲ti, ne ya cruciales pa mäs ndunthe ja yá 'befi ar biológicas. Dado ke ya proteínas contienen 'nar Nar dätä hño yá 'bede ya ungumfädi biológica, bí extraen ko ar ngäts'i ar analíticos, ngu, pa ár nthoni proteómica. Ar función mäs mahyoni da realizan ya proteínas mfa̲ts'i 'bu̲i ar catálisis ya reacciones metabólicas, ar replicación ar ADN, ar respuesta estímulos ne ar transporte moléculas 'nar lugar ma ma'na. Ya proteínas 'na'ño entre hä principalmente jar ár secuencia aminoácidos, nä'ä kä dictada ya secuencia nucleótidos yá genes, ne da nu'bu̲ da nthe̲hu̲ 'ra resulta jar plegamiento ar proteína 'nar estructura tridimensional específica da determina ár nt'ot'e. Ya proteínas ya – 'Nehe péptidos – 'na ya componentes clave ya nts'i. Ir ar proteómica ge 'nar poderosa herramienta jar ciencia ya nts'i da optimizar ya procesos, ár Ntsuni ar alimentaria ne ar evaluación nutricional.

Cloud Point Extraction

Cloud Point Extraction ge 'nar nt'ot'e preanalítico pa separar ne preconcetrar analitos. Ja ar combinación ko ar ultrasonicación, ar extracción puntos enturbiamiento to intensificar, o̲t'e ne ar proceso da mäs nt'ot'e xi hño, rápido ne respetuoso ko ar nt'uni mbo jar ximha̲i. Ko ar ultrasonicación, ar extracción puntos enturbiamiento ge 'nar nt'ot'e significativamente mäs xi hño nt'ot'e analitos. Mäs ungumfädi dige ár extracción ar puntos enturbiamiento asistida ya ultrasonidos.

Electroforesis

Ar electroforesis gel ar principal ár nt'ot'e ya separación ne ya análisis macromoléculas komongu ar ADN, ar ARN ne ya proteínas, nja'bu Komo yá fragmentos, ir nge ár tamaño ne carga. Ar gi japu̲'be̲fi química clínica pa separar proteínas ya carga y/o tamaño (AIEF agarosa, esencialmente Ndäse̲ ja ar tamaño) ne bioquímica, biología molecular ne proteómica pa separar 'nar nthogi mixta fragmentos ADN ne ARN ya longitud, pa nda estimar tamaño fragmentos ADN ne ARN wa da separar ya proteínas ya carga.

Cultivos celulares

Ar cultivo ar celular ar proceso crecimiento controlado ir nge nuna ya células ar cultivan jar nkohi controladas. Ya nkohi cultivo celular varían pa kadu̲ ar klase ar célula. Da general, entorno 'nar cultivo celular ir bo̲ni jar 'nar recipiente adecuado (nt'udi, 'nar placa ar Petri) ko sustrato wa nt'uni da suministra ya nutrientes esenciales (aminoácidos, carbohidratos, vitaminas, minerales), factores crecimiento, hormonas ne gases (CO2, Wa2), ne regula ar entorno físico-químico (tampón ar pH, presión osmótica, mpat'i). Mäs xingu ya células necesitan 'nar superficie wa 'nar sustrato artificial, mente ne ma'ra ya cultivos celulares xi cultivar ar flotando nthegi ja 'nar nt'uni cultivo (cultivo jar suspensión, suspensión celular).
Ya cultivos masivos líneas celulares animales ar utilizan jar producción industrial vacunas virales ne ma'ra productos derivados ar biotecnología. Ya células nänä humanas ar cultivan pa ntu̲ngi hñuts'i ya células ne diferenciar ya jar varios xingu ya células somáticas ko ar ngäts'i ar trasplante.

Muestras tejido

Ar ngäts'i tejido pede 'nar intermediario celular, ho ar hñei celular o 'mu̲i 'nar za̲ ár nthe̲ organizativo ja ya células ne 'nar jar completo. Ja ya tejidos, ar ensamblan células similares, ar ár xkagentho 'rini, da juntas cumplen 'nar función específica. Ir nge ar agrupación funcional múltiples ar tejidos, ar o̲t'e ya estructuras complejas ya Ts'ut'ubi.
Ar toman muestras tejido pa ár nthoni jar biología, histología yá histopatología, parasitología, bioquímica, inmunohistoquímica, nja'bu̲ Komo pa cultivar ne extraer ADN. Ar tsa̲ da distinguir ja ya tejido animal (subdivisión: tejido mamíferos) ne tejido vegetal. Ya tejidos animales ar agrupan jar goho xingu hontho ya tejido conectivo, ar muscular, ya nervioso ne ya epitelial. Ar tejido ar vegetal bí subdivide jar nuya ya hñu sistemas tejidos: ar epidermis, ar tejido xi hño 'na ne ar tejido vascular.
Ya muestras tejido ar xi hoki a partir de ya xeni me̲ti wa ya do̲ni, ngu, hueso, músculo, hojas, etcétera.

Fluidos corporales

Ar ya ji, ar suero, ar plasma, ar líquido cefalorraquídeo, ar saliva ne ar líquido sinovial ya fluidos corporales da ofrecen 'nar Nar dätä hño fuente ungumfädi relevante pa ar diagnóstico. Ir ar mahyoni 'nar nt'ot'e sofisticada muestras fluidos corporales pa ár análisis. Ar ndui dificultad xi asociada ko ar nthegi xi hño. rango dinámico ar componentes 'bui ja ya fluidos corporales.

Njäts'i concentración proteínas

Ensayo Bradford, ensayo Lowry ne ar ensayo ácido bicinconínico (BCA) ya ensayos pa ngatho pa ar tsa da jäts'i concentración proteínas. Ar albúmina sérica bovina (BSA) ge 'na ya estándares proteicos mäs utilizados.

tampón lisis

Tampón lisis da da 'ñets'i ar ir nge ar hñei celular wa tejido (cultivo ar tejidos, do̲ni, bacterias, hongos, etcétera), ne nu'bu̲ ya células gi 'bu̲hu̲ 'nar estructura ne ar klase ar estructura. 'Nar nt'ot'e ho 'bui ndunthe gama tampones lisis pa ar extracción proteínas, membranas ne orgánulos gi formulados ko 'natho wa mäs detergentes. Ar detergente nu'bu̲ da nthe̲hu̲ 'ra ar selecciona a través de pruebas ntsa̲ ne error wa – Nu'bu̲ xi disponible – ir nge 'nar nthuts'i nkohi ar extracción ar proteínas existente. Ar detergente da da compatible ar fuente tejido ne ya proteínas. Da general, ar gi jwahni ar detergente mäs za̲tho da funciona pa 'nar tejido yá proteína específica pa da zeti ar máxima funcionalidad ar extracto. 'Nehe, nu'bu ar extracción membranas ne orgánulos, 'nar detergente za̲tho mantiene ar membrana intacta. Ya detergentes comúnmente utilizados ja ya tampones lisis ya da su mayoría hingi iónicos wa zwitteriónicos, ngu, CHAPS, desoxicolato, Triton™ X — 100, NP40 ne Tween 20.
Ngu, tejidos komongu ar cerebro, ar hígado, ar intestino, ar riñón, ar bazo, etcétera, ar xi amortiguar hingi hembi da ko RIPA – wat'i, tsa incluir bí inhibidores ar proteasa ne ar DTT (nt'udi, pa ar electroforesis jar gel).
Tampón lisis pa tejido muscular esquelético (helado): 20 mM Tris (pH 7,8), 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 1 mM MgCl2, 1% ar Triton X — 100, 10% (p/v) ar glicerol, 1 mM EDTA, 1 mM ditiotreitol suplementado ko cóctel proteasa ne inhibidores ar fosfatasa
Tabla tampones pa ngatho ne ár rango ar pH. Da general, nuya tampones ar utilizan normalmente jar concentraciones 20 — 50 mM.
 

búfer Rango pH
Ácido cítrico – NaOH 2.2 – 6.5
Citrato sodio – Ácido cítrico 3.0 – 6.2
Acetato sodio – ácido acético 3.6 – 5.6
Ácido cacodílico sal sódica – Hcl 5.0 – 7.4
AR ZÄNÄ – NaOH 5.6 – 6.8
Dihidrógeno fosfato sodio – Hidrogenofosfato disódico 5.8 – 8.0
imidazol – Hcl 6.2 – 7.8
MOPS – KOH 6.6 – 7.8
Clorhidrato trietanolamina – NaOH 6.8 – 8.8
Tris – Hcl 7.0 – 9.0
HEPES – NaOH 7.2 – 8.2
Tricina – NaOH 7.6 – 8.6
Tetraborato sodio – Ácido bórico 7.6 – 9.2
Bicine – NaOH 7.7 – 8.9
glicina – NaOH 8.6 – 10.6

Mäs xingu ya tampones muestran 'nar dependencia pH ko ar mpat'i. Esto es hontho makwäni pa ya búferes Tris. El pKa cambia de 8,06 a 25 °C a 8,85 a 0 °C.
(pH ne pKa 'nar tampón: ar pH mide ar concentración iones hidrógeno ja 'nar njäts'i acuosa. pKa (= nzäm'bu̲ disociación ácida) ge 'nar medida relacionada, pe mäs específica, ya da ayuda predecir Temu̲ actuará 'nar molécula 'nar hmädi pH específico).

TRIzol

TRIzol ge 'nar njäts'i química utilizada pa extraer ARN yá ADN yá proteína Nxoge ar extracción tiocianaato — fenol — cloroformo ar guanidinio. Njapu'befi ar extracción TRIzol asistida ya ultrasonidos xta komongu ar nt'uni altos rendimientos ADN, ARN ne proteínas a partir de xkagentho muestra ne, ir supera ja ya nt'ot'e extracción.

Bibliografía yá Referencias

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