Aplicaciones ultrasónicas jar virus ar viruela ar mono
Ar ultrasonicación ge 'nar nt'ot'e procesamiento mahyoni pa ar aislamiento ar virus ar viruela ar mono (MPXV) a partir de muestras analíticas, pa ar fragmentación ar ADN ar virus, nja'bu komongu ja ar fabricación vacunas kontra ar viruela ar mono. Pa ar nt'ot'e muestras 'be̲tho ar diagnóstico ne ar análisis (PCR, ELISA, etcétera), bí gi japu̲'be̲fi ar ultrasonicación da lisar ya células jar 'mui liberar ar virus ar viruela ar mono ar interior ar célula y/o fragmentar ar ADN. Ar producción vacunas, ja ya aplicaciones da ndezu̲ ar nt'ot'e partículas virus yá ADN, encapsulación jar portadores ar fármacos ne ar formulación ya inóculos.
Tso̲kwa continuación to tingigi mbo ungumfädi detallada dige ar nt'ot'e muestras ultrasónicas ar virus ar viruela ar mono, nja'bu komongu dige ar producción vacunas MPXV asistidas ya ultrasonidos.
Nä'ä gi tini jar xí página:
- Lisis ultrasónica pa ar extracción ar virus ar viruela ar mono
- Fragmentación ultrasónica ar ADN ar virus ar viruela ar mono
- Aplicaciones ultrasónicas jar producción vacunas MPXV
Lisis ultrasónica ne fragmentación ADN 'bu̲ 'be̲tho ar reacción cadena ar polimerasa (PCR)
'Nar infección ya virus ar viruela ar mono bí detecta ir nge ya pruebas amplificación ácidos nucleicos (NAAT), ir nge ar reacción cadena ar polimerasa (PCR) convencional wa jar pa real, ar detección secuencias únicas ADN viral. Muestra (nt'udi, ar mpa̲ti nasofaríngeo wa ya biopsias piel) contiene virus jar células.
Pa ar análisis, ar virus da da liberado ja ya células ne ar ADN viral da da fragmentado pa ar PCR.
Lisis ultrasónica:
Ar disrupción yá lisis celular ultrasónica ge 'nar nt'ot'e fiable ne xi hño pa aislar virus muestras celulares ne, ir tanto, 'nar técnica preferible ja ya agentes químicos, komongu ar lisozima, ar proteinasa ë ne ma'ra detergentes ar utilizan alternativamente pa da tsoni ya lisis ar celular ne ar liberación ADN.
Wat'i, njapu'befi nuya reactivos químicos requiere 'nar nt'ot'e muestra requiere xingu ya pa jar varios pasos 'bu̲ 'be̲tho ar análisis PCR pa nu'bu ar inhibición ar reacción PCR. Dado ke ya inhibidores ar PCR afectan bí eficacia ar amplificación, t'olo variaciones ja yá 'bede ya inhibidores nä'ä da hingi eliminan xi uni lugar jar dätä variaciones jar amplificación ar producto ar PCR (Diaco, 1995).
Ar ventaja ar ultrasonicación pa ar lisis ge da ar deseable disrupción nxo̲ge ya estructuras ar celulares ne ar liberación ADN hinda 'medi da ar reactivos lisis ne 'nar nt'ot'e muestras da requiere xingu ya pa. (cf. Fykse et jar el., 2003)
Fragmentación ultrasónica ar ar ADN:
Fragmentación ultrasónica ar ADN xí sencilla ne ya fiable, ya da produce ya fragmentos ar ADN ajustables jar longitud (pares bases, bp). Ir nge njapu'befi ya ultrasonidos, ar ADN ar tsa̲ da fragmentar ar bí efectiva bí longitud ar ADN objetivo. Control preciso parámetros ya ultrasónicos ne ya sofisticadas opciones refrigeración evitan ar degradación ar ADN.
Mäs ungumfädi dige ar fragmentación ultrasónica ar ADN.
Aplicaciones ultrasónicas jar ar bakunä kontra ar virus ar viruela ar mono
Ya vacunas utilizadas kontra ar virus ar viruela ar mono ya 'bu̲'bya ya vacunas virus vivos. Ya vacunas xki desarrolladas podrían utilizar ma 'ra ya plataformas, komongu ya basadas ar ADN. 'Bu̲'bya contiene 'nar Vaccinia Ankara viurs modificado, 'nar ortopoxvirus atenuado nä'ä hingi ar replica. 'Nehe contiene Tris (tris — aminometano) ne cloruro sodio. Ar bakunä 'nehe tsa̲ da contener t'olo cantidades ADN ne proteínas ya células fibroblastos embrión pollo, da utilizan pa cultivar ar virus ar bakunä, ar benzonasa ne ar compuestos antibióticos Komo ar gentamicina ne ar ciprofloxacina.
Ar homogeneización ar ultrasónica ar gi japu̲'be̲fi jar producción vacunas virus vivos atenuados, vacunas ADN, cócteles ar ADN multivalentes, vacunas ARNm, vacunas proteínas recombinantes, vacunas partículas similares ma virus, etcétera.
- Dispersión partículas ne agentes virales
- Emulsificación
- Inactivación virus
- formulación portadores fármacos (NLC, SLN)
- encapsulación
- Disolución agentes
- Nt'ot'e coadyuvantes
- Desgasificación yá Desaireación
Nthuts'i nkohi pa ar aislamiento ultrasónico ar virus ar viruela ar mono
Equipo nthoni Stittelaar (2005) utilizó ar lisis ultrasónica pa liberar ar virus ar viruela ar mono ar cultivo células huésped jar crecimiento, nja'bu komongu ar células obtenidas ir nge ya intercambios 'yu̲ga̲ primates infectados.
Nt'ot'e ar bakunä kontra ar viruela ar mono:
Ya virus ar viruela ar mono bí cultivaron jar células fibroblastos ar embrión pollo xi hño ar patógenos específicos. 'Me̲fa ar incubación Nxoge 1 jar 2 pa, ar suspensión células virales cosechó ir nge 'nar ronda congelación-descongelación ne gem'bu̲ bí concentró ya centrifugación. Ar pellet ar resuspendió ne ar sometió ndunthe rondas homogeneización ultrasónica.
Aislamiento ar virus ar viruela ar mono macacos vacunados:
Ya muestras ar congelaron ne descongelaron hñu ya 'nandi ne sonicaron ja 'nar CupHorn ultrasónico. Ar utilizaron yoho diluciones (1:10 ne 1:100) en medio de transporte suplementado ko suero fetal bovino jar 1% pa inocular monocapas células Vero jar placas 'rato ar pocillos. 'Me̲fa 1 h ar incubación 37 °C, bí retiraron ya inóculos ne reemplazaron con medio de cultivo suplementado con suero fetal bovino a el 1%. Ya monocapas cultivaron durante 5 días a 37 °C ne tiñeron ko 'nar solución de violeta cristalino.
(cf. Stittelaar et jar el., 2005)
Ultrasonidos pa ar análisis ar virus ne ar producción vacunas
Ar nt'ot'e ho 'bui ndunthe cartera productos Hielscher Ultrasonics ofrece ar ultrasonido ideal pa laboratorios nthoni ne análisis, nja'bu komongu pa fabricación industrial vacunas.
Hielscher Ultrasonics xi especializada ar diseño, ar fabricación ne ar NTHEGE ultrasonidos ne sonobiorreactores mar hñets'i rendimiento pa ár njapu'befi laboratorios nthoni ne análisis, nja'bu komongu ár implementación ar producción industrial pa ar vacunas (hne. ej. Vacunas, Apis).
Ar sonicación ar to da t'uni jar recipientes abiertos, reactores cerrados agitación continua ne reactores flujo continuo. Ngatho ya nt'ot'e ya sistemas ultrasónicos, da ku̲t'i ja contacto ko ar made líquido, gi hechas asero inoxidable, titanio wa ya vidrio. Ya piezas esterilizables jar autoclave ne ya accesorios sanitarios garantizan ar producción hñets'i'i ar nkohi 'mui farmacéutico.
Registro automático ar datos: Ar software inteligente registra automáticamente ya parámetros proceso sonicación jar ar tarheta ar memoria SD 'mui. Control preciso ga̲tho ya parámetros ar proceso garantiza ar reproducibilidad, Estandarización ar producciónne facilita ntsoni deni ya ntsuni ya productos farmacéuticos.
Hielscher Ultrasonics’ Ya procesadores ultrasónicos ya na fiables ne xi controlar ar ko precisión. Ga̲tho ya ultrasonidos industriales ar xi ajustar pa ofrecer 'nar gama nxo̲ge, ndezu̲ amplitudes mäs bajas asta xi altas. Robustez ya sistemas ultrasónicos Hielscher permite 'nar funcionamiento 24 yá 7 entornos exigentes ne 'be̲fi hñei.
Xtí tabla bí xta ar 'nar indicación ya mfeni ya procesamiento aproximada ar HMUNTS'UJE ultrasonidos:
Volumen lote | Gasto | Dispositivos recomendados |
---|---|---|
Placas multipocillo yá ar microtitulación | N/A | UIP400MTP |
Ar 1 jar 500 ml | Ar 10 200 ml yá min | UP100H |
Ar 10 da 2000 ml | Ar 20 400 ml yá min | UP200Ht, UP400St |
0.1 da 20L | 0.2 4 L yá min | UIP2000hdT |
Ar 10 da 100L | Ar 2 10 l yá min | UIP4000hdT |
N/A | Ar 10 100 L yá min | UIP16000 |
N/A | Mar dätä | Racimo ar UIP16000 |
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Bibliografía yá Referencias
- Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
- Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidov in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
- J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
- Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
- Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.
Datos da Bale ar penä ga pädi
Virus ar viruela ar mono
Ar viruela ar mono (MPV, MPXV wa hMPXV) ge 'nar zu'we Dar virus ADN bicatenario da causa 'nar enfermedad zoonótica viral. Nuna ar enfermedad ar pädi komongu infección ya viruela jar mono ne tsa̲ da ocurrir ja ya jä'i ne me̲ti. Pertenece ar género Orthopoxvirus ja ya mengu Poxviridae. Ar virus ar viruela ar mono ge 'na ya ortopoxvirus humanos junto con ya virus ar viruela (VARV), ar viruela bovina (CPX) ne ar vaccinia (VACV). Ya orthopoxvirus da caracterizan ya dätä partículas virus ja ya ladrillo, da contienen 'nar genoma ADN bicatenario aproximadamente 200.000 pb.
Ensayo ELISA
ELISA ya ya siglas Enzyme — Linked ImmunoSorbent Assay (ensayo ar inmunoabsorción ligado enzimas) ne ge 'nar inmunoensayo mbeni ke nu'u̲ t'uni estándar k'axt'i ya inmunoensayos. ELISA ge 'nar ntsa̲ inmunológica, valorada ir nge ár mextha sensibilidad diagnóstica, ne bí gi japu̲'be̲fi pa detectar ne cuantificar moléculas, incluidos anticuerpos, antígenos, proteínas, glicoproteínas ne ar hormonas. Ar ndui ar ELISA bí basa ar interacción jar antígeno — anticuerpo. Ir nge nuna interacción antígeno — anticuerpo, ya anticuerpos específicos ar unen da antígeno ár diana. Honto nu'bu̲ bí produce ar interacción, ar sustrato to unir bí ma jar enzima ne ar tsa̲ da observar 'nar 'mefa ár njäts'i Tange'u conversión ar sustrato, nä'ä ir bo̲ni ke ar obtiene 'nar nt'uni positivo.

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