Tecnología ultrasonido Hielscher

Nthuts'i nkohi pa inactivación coronavirus SARS — CoV — 2 ko sonicación

Hielscher VialTweeter ge 'nar ar xe̲ni mfädi multimuestra ultrasónica ho̲ntho, nä'ä da gi japu̲'be̲fi pa inactivar coronavirus SARS — COV — 2. Ar VialTweeter permite hoki asta 10 viales muestra simultáneamente ne, ir ge ar ar xe̲ni ideal pa ar procesamiento muestras jar masa.

Inactivación coronavirus SARS — CoV — 2 ko ar VialTweeter

'Mefa xta retirar ar fijador, ya monocapas ar lavaron hñu ya 'nandi ko njäts'i salina tamponada ko fosfato (PBS) 'be̲tho da t'a̲fi ya células 1 ml MEM/5% FBS ne sonicadas (3 × 10 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i encendido, 10 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i ar descuento 100% ar amplitud nts'edi ne amplitud) utilizando ar procesador ultrasónico Hielscher) utilizando ar procesador ultrasónico Hielscher) UP200St ko VialTweeter archivo adjunto. Ya supernadantes ar clarificaron centrifugando da 3000 ya g × 10 ya t'olo ora. 

Lea ar Nthuts'i nkohi completo nuwa pa ar inactivación ar coronavirus SARS — CoV — 2 ya Welch et jar ar. (2020) tso̲kwa continuación:

Células ne virus

Células Vero E6 (Vero C1008; ATCC CRL — 1586) bí cultivaron jar ar made esencial mínimo (MEM) modificado ar Eagle complementado ko 10% (v/v) suero ternera fetal (FCS). Ar virus ar utilizado bí SARS — CoV — 2 cepa hCOV — 19 yá England yá 2 yá 2020, aislado ya PHE ar ndu̲i ar Hmunts'i ya pacientes jar ndä mfats'i ar 29 yá 01 yá 2020. Nuna ar virus obtuvo jar ar bi thogi 1 ne da utilizó pa nsadi inactivación ja ya pasajes 2 wa 3.
Pa ya reactivos ne ya productos químicos utilizados pa ar inactivación ar SARS — CoV — 2, nja'bu Komo ar eliminación ar citotoxicidad ya reactivos, ga ar mfädi dätä mfädi mä Welch et jar ar. (2020).

The ultrasonic sample preparation unit VialTweeter is used for the inactivation of SARS-CoV-2 coronavirus

Inactivación ar virus ya detergentes – SARS — CoV — 2 Coronavirus ko ya Inactivación ya Welch et jar ar. 2020

Inactivación SARS — CoV — 2

Pa productos comerciales, preparaciones virus (fluido ar cultivo tejido, títulos nä'ä da ndezu̲ 1 × 10)6 ma 1 × 108. PFU yá ml) ma tratados ya triplicado ko reactivos jar concentraciones ne ya tiempos ar contacto recomendados ja ya instrucciones njapu'befi ar fabricante, nu'bu̲ 'yo da 'mui, wa pa concentraciones ne tiempos solicitados específicamente ir nge ya laboratorios ensayo. Nu'bu̲ ar fabricante umbi 'nar serie concentraciones, bí probó ar nthe mäs xí hñets'i'i entre ar producto ne ar muestra (es decir, ar concentración recomendada mäs xí hñets'i'i ar producto ensayo). Ya reactivos tubo transporte especímenes ar probaron utilizando 'nar nä'ä da 'yadi wa ar 'nar volumen fluido cultivo tisular ma 're̲t'a volúmenes ar reactivo, menos da ar fabricante especificara 'nar nthe volumen fluido muestra da reactivo. Ar probaron detergentes, ar fijadores ne ar disolventes ja ya concentraciones indicadas pa ya tiempos indicados. Ga̲tho ya pasos inactivación ar realizaron da mpat'i ambiente ambiente (18 — 25 oC). Pa ya pruebas xingu ya muestras alternativos, ar virus bí disparó jar matriz muestra indicada ja 'nar nä'ä da 'yadi wa ar 1:9, xu̲ki ar bí za̲pi bí hñut'u̲wi ko reactivos ntsa̲ Komo ar indica mañä. Ya experimentos incluyeron muestras tratadas simuladas ar control triplicado ko 'nar volumen equivalente ar PBS en lugar de reactivo ntsa̲. Ngut'a xta thogi ar pa contacto requerido, bí procesaron 1 ml ar muestra tratada ga utilizando ar matriz filtración seleccionada adecuadamente. Ar eliminación ar reactivos pa pruebas inactivación bí zits'i da t'ot'e xi hño jar 'nar formato columna espín mäs dätä utilizando Columnas giro eliminación detergente Pierce 4mL (Thermo Fisher), wa rellenando columnas centrífugas mfeni Pierce 10mL vacías (Thermo Fisher) ko SM2 Bio — Beads, Sephacryl S — 400HR wa Sephadex LH — 20 pa gi perlas yá resina 4mL empacadas. Pa ar purificación utilizando filtros Amicon, ar purificaron muestras 2 × 500 l utilizando yoho filtros centrífugos ir nge ar nt'ot'e descrito ma 'met'o mi, ne gem'bu̲ bí juntaron. Pa ar eliminación formaldehído ne formaldehído ko ar glutaraldehído, bí utilizó 'nar filtro ko 'nar volumen muestra 1× 500 l, resuspended 'mefa xta procesamiento jar 500 l PBS, ne bí añadió 400ul MEM/5% FBS. Pa ar inactivación ar infectados VialTweeter at the ultrasonic processor UP200STmonocapas, 12,5 cm2 frascos células Vero E6 (2,5 × 106 células/matraz jar 2,5 ml MEM/5% FBS) bí infectaron 0,001 ar MOI ne ar incubaron 37oC/5% CO2 Nxoge 24 ar ora. Ar eliminó ar sobrenadante ne ar fijaron ya células 5 ml formaldehído, wa ya formaldehído ne ya glutaraldehído jar mpat'i ambiente Nxoge 15 wa 60 t'olo ora. Ar fijador bí removido, ne ya monocapas ar lavaron hñu ya 'nandi ko PBS nu'bu da t'a̲fi ya células 1 mL MEM yá 5% FBS ne sonicaron (3 × 10 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i encendido, 10 ya 'na̲te ya mfe̲ts'i apagados ar 100% nts'edi ne amplitud) usando 'nar UP200St accesorio VialTweeter (Hielscher Ultrasound Technology). Ya supernadantes ar clarificaron centrifugando da 3000 ya g × 10 ya t'olo ora.

VialTweeter pa sonicación intensa viales cerrados

VialTweeter pa sonicación intensa viales cerrados

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Various reagents have been tested for the inactivation of the SARS-CoV-2 coronavirus using the ultrasonic sample prep unit VialTweeter.

Detalles ar ar reactivo utilizado pa ar inactivación ar coronavirus SARS — CoV — 2 ko ar VialTweeter ultrasónico nä'ä mä jar Nthuts'i nkohi Welch et jar ar.

Ar Nthuts'i nkohi completo da mfa̲ts'i 'bu̲i njapu'befi ya Hielscher VialTweeter ar tsa̲ da tingigi mbo nuwa:
Welch, Stephen R.; Davies, Katherine A.; Buczkowski, Hubert; Hettiarachchi, Nipunadi; Green, Nicole; Arnold, Ulrike; Jones, Matthew; Hannah, Matthew J.; Evans, Reah; Burton, Christopher; Burton, Jane E.; Guiver, Malcolm; Cane, Patricia A.; Woodford, Neil; Bruce, Christine B.; Roberts, Allen D. G.; Killip, Marian J. (2020): Inactivation analysis of SARS-CoV-2 by specimen transport media, nucleic acid extraction reagents, detergents and fixatives. Journal of Clinical Microbiology. Accepted Manuscript Posted Online 24 August 2020.

The multi-sample ultrasonicator VialTweeter allows for simultaneous sample preparation of up to 10 vials under same process conditions. The VialTweeter is an established ultrasonic device used for the inactivation of corona virus SARS-CoV-2 (Click to enlarge!)

VialTweeter pa inactivación virus ultrasónicos

Ventajas ar VialTweeter ne ar vistazo

  • Sonicación ga 10 viales simultáneamente
  • 'Ñotho ar contaminación cruzada
  • 'Ñotho ar pérdida muestra
  • Grabación automática datos
  • Hei ne pädi xi hño ar operar
Ar VialTweeter 'nehe ar gi japu̲'be̲fi pa

  • Cell Lysis
  • Interrupción partículas virales
  • Extracción ácido nucleico: aislamiento ADN yá ARN
  • Fragmentación ADN yá ARN
  • Solubilización licato
  • Sofisticados dismembradores ultrasónicos ne disruptores celulares

    Ultrasonicador multimuestra VialTweeter ar ho̲ntho 'na ya dí soluciones ultrasónicas pa jar nt'ot'e muestras jar laboratorios biológicos, bioquímicos ne ar clínicos. Hielscher Ultrasonidos ofrece ar dismembrador ultrasónico ideal pa ár nt'ot'e, ngu, ar lísis celular, extracción celular, homogeneización ar tejido, solubilización ar lesate, disolución, desgasificación ar muestras, etc.
    Da ga ga pädi Tengu ar muestras pe̲ts'i da procesar ya ora ne pa, nu'bu̲ prefiere sonicación directa wa ya indirecta ne Teme ra objetivo ar nt'ot'e ya muestras ultrasónicas. Bí recomendamos ar ar xe̲ni ultrasónica mäs adecuada pa ár rutina ar 'be̲fi hyax'bu̲!
    Ya procesadores ultrasónicos digitales ar Hielscher Ultrasonics gi 'bu̲hu̲ equipados ko software inteligente, grabación automática datos, opciones ar preafiación fáciles pa control mpat'i, duración jar sonicación, modo ciclo yá pulso, nja'bu ngu iluminación muestras ne control remoto ar navegador. Ga esforzamos ya da da HMUNTS'UJE dispositivos ultrasónicos 'bu̲hu̲ nä'ä mäs inteligentes tsa̲ pa da ár rutina nthoni ne 'be̲fi ar vuelva nä'ä mäs mahyoni ne exitosa tsa̲.
    'Yot'e clic nuwa, pa nda tingigi mbo mäs aplicaciones, da 'ñent'i protocolos nt'ot'e muestras ultrasónicas ko ar VialTweeter!

    Ja ar contacto ko ngekihe! Yá preguntar ga!

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    Utilice da ku̲hu̲ formulario pa da 'yadi ungumfädi adicional dige ar procesadores ultrasónicos, ar aplicaciones ne ar precio. Estaremos encantados da mä ár proceso ko nu'i ne bí ofrecer 'nar ko ya ultrasónico da cumpla ko yá requisitos!









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    Ultrasonic high-shear homogenizers are used in lab, bench-top, pilot and industrial processing.

    Hielscher Ultrasonidos fabrica homogeneizadores ultrasónicos mar hñets'i rendimiento pa aplicaciones ar mezcla, dispersión, emulsión ne extracción jar laboratorio, ar piloto ne ar escala industrial.

    Ot'a yá Referencias



    Hechos Bale ar penä ga pädi

    ¿Temu̲ ya ya células Vero?

    Vero E6, 'nehe conocido komongu Vero C1008 (ATCC hingi. CRL-1586) ge 'nar 'ñu celular clonada Vero 76 ne bí gi japu̲'be̲fi jar nthoni coronavirus SARS — CoV ne SARS — CoV — 2. Ya células Vero ge 'nar linaje ar células utilizado cultivos celulares. Ar 'nar Vero’ ar linaje ar aisló ja ya células epiteliales renales extraídas 'nar mono xí africano (Chlorocebus sp.).
    Ya células Vero E6 muestran cierta inhibición ar contacto, nä'ä ya mäs ar za pa propagar virus da lentamente ar replican. Ya líneas celulares Vero E6 ar utilizan comúnmente da hyoni ar citopatología ya coronavirus SARS — CoV ne SARS — CoV — 2, ya ne ya células Vero (células renales ar mono xí africano) exhiben 'nar hmä abundante receptores enzimas convertidoras ar angiotensina 2 (ACE2). Ya receptores ACE2 ge 'nar sitio acoplamiento mahyoni pa ar coronavirus SARS — CoV — 2.
    Ngu, Ogando et jar ar. (2020) bí dini da SARS — CoV — 2 – jar comparación ko ar SARS — CoV – generaron pe̲ts'i niveles ARN viral intracelular, pe sorprendentemente bí recuperó 'nar progenie viral infecciosa 50 ya 'nandi menos ar nt'uni cultivo. 'Nehe, determinaron da sensibilidad yoho ya virus ma hñu inhibidores establecidos ar replicación coronavirus (Remdesivir, Alisporivir ne cloroquina) xí na similar, pe da infección ya SARS — CoV — 2 mar sustancialmente mäs sensible ja ar pretratamiento ar ar células ko interferón alfa pegilado. 'Nar diferencia mahyoni ja yoho ya virus ar hecho nä'ä – mbi jar células Vero E6 – SARS — CoV — 2 aparentemente xi jár 'nar xí nze̲di presión selección pa adquirir mutaciones adaptativas jar ár gen proteína espiga. Gi mutaciones cambian wa eliminan 'nar "sitio ar escote similar ja ar furina" putativo ja ar hnini da conecta ya dominios S1 ne S2 ne gi lugar ma 'nar cambio fenotípico xi prominente ja ya ensayos placa.