Tecnología ultrasonido Hielscher

Lysis Ultrasónica de Drosophila melanogaster Muestras

Drosophila melanogaster is widely used in laboratories as model organism. Therefore, pre-analytical preparation steps such as lysis, cell disruption, protein extraction and DNA shearing of Drosophila melanogaster samples must be frequently carried out. Ultrasonic dismembrators are reliable and efficient and can used to perform various tasks such as lysis, protein extraction or DNA fragmentation at ease by only adjusting ultrasonic process parameters. Ultrasonic homogenizers are thereby flexible tools with a broad range of applications.

Lysis Ultrasónica ne Extracción Proteínas

Drosophila melanogaster is widely used as model organism in biological labs. Find here protocols for lysis, protein extracion and DNA shearing of D. melanogaster samples.Ar lísis, ar solubilización celular, ar homogeneización ar tejidos ne ar extracción proteínas ya tareas típicas pa ya desmembradores ultrasónicos jar laboratorios biológicos. Dismembradores ya ultrasónicos ne ya disruptores celulares ya adecuados pa homogeneizar tejidos animales, insectos (nt'udi, Drosophila melanogaster, c.ndunthe elegans) wa especímenes do̲ni. Ya aplicaciones posteriores ultrasonidos ya lysis suspensiones celulares ne pellets, nja'bu Komo ar extracción proteínas intracelulares.
Ar lysis ar ultrasónica ne ar extracción proteínas ya procesos altamente fiables ne reproducibles, nä'ä xi ga OT'UJE ar dige ar base protocolos establecidos. Dado da intensidad ar proceso ultrasónico ar tsa̲ da ajustar exactamente a través de parámetros sonicación komongu ar amplitud, ciclo yá modo ya pulso, mpat'i ne volumen muestra, mbi ya protocolos probados ar xi yokwi ko xkagentho ar nt'uni una y otra xähmä.

Ventajas ar nt'ot'e muestras ultrasónicas

  • altamente nt'ot'e xi hño
  • Ajustable ya he̲'mi muestra específico
  • Mfädi pa 'na volumen
  • Ár nt'ot'e hingi térmico
  • resultados reproducibles
  • Simple ne pädi xi hño

Fragmentación ADN ultrasónico ne ARN

After cell lysis and protein extraction, a common required step in sample preparation is the shearing and fragmentation of DNA, RNA, and chromatin, e.g. before chromatin immunoprecipitation (ChIP). DNA and RNA fragmentation can be reliably achieved by breaking the covalent bonds that hold the DNA together by physical forces. Using physical shearing such as sonication, at first the DNA strands are broken, then the DNA is fragmented into smaller pieces.
Ar fragmentación ar ADN ultrasónico ar fiable ne ya nt'ot'e xi hño ja ar cizallamiento ADN ja 'nar longitud específica, ngu, 500bp (pares base). Ya ndu'mi ventajas ar fragmentación ar ADN ultrasónico incluyen ar control preciso ya parámetros ar proceso ar ultrasónico ne ar intensidad. Ya parámetros ar proceso ultrasónico ar xi ajustar ajustando ar intensidad ar sonicación, ya ciclos ne ar pa precisión. 'Me̲hna permite da t'ot'e ya tamaños ar ADN deseados ne ar longitud ar ADN dirigida ar tsa̲ da producir ne reproducir ya nt'ot'e fiable. Cizallamiento ultrasónico ar ADN 'nehe ar ideal pa da t'ot'e ya fragmentos ADN mar hñets'i be̲xu molecular.

Ultrasonicator UP200Ht with microtip S26d2 for ultrasonic lysis of Drosophila samples

ultrasonicador UP200Ht with 2mm microtip S26d2 for the sonication of Drosophila samples

Nu'bu da 'yadi ungumfädi




Pets'i ja ma Nt'eje privacidad.


Protocolos pa lísis ultrasónica Drosophila melanogaster

Tso̲kwa continuación to tingigi mbo varios protocolos pa lysis asistida ya ultrasonidos, extracción proteínas, ne ar fragmentación ADN wa cromatina ya muestras Drosophila.

Lysis Ultrasónica pa El Ensayo ar Inmunoprecipitación ar Reticulación (CLIP)

CLIP assay was performed as previously reported with some modifications. Approximately 20 mg ovaries from 0- to 1-day-old wild-type females were UV crosslinked (3 × 2000 μJ/cm2), homogenized on ice in 1 mL RCB buffer (50 mM HEPES pH 7.4, 200 mM NaCl, 2.5 mM MgCl2, 0.1% Triton X-100, 250 mM sucrose, 1 mM DTT, 1× EDTA-free Complete Protease Inhibitors, 1 mM PMSF) supplemented with 300 U RNAseOUT and placed on ice for 30 min. The homogenate was sonicated on ice, at 80% power, five times in 20 s bursts with a 60 s rest in between using the Hielscher Ultrasonic Processor UP100H (100 W, 30 ar kHz) ne centrifugado (16000 × g Nxoge 5 min ma 4oC). Ar extracto ar soluble bí preclearizó ko ar 20 ar l dinar — G ar proteína-G Nxoge 20 min da 4oC. 'Me̲fa ar eliminación muestras pa inmunoblotting ne ar cuantificación ar entrada ARN (1%), HP1 bí inmunoprecipitado ko anticuerpos anti — HP1 9A9 a partir de 450 l extracto precleared ya incubación Nxoge 4 h ko 50 l proteína-G dinesas. Ya inmunoprecipitados bí lavaron ar 4 bes ko RCB. Pa eluir ya ARN inmunoprecipitados, ya perlas peletadas ar hervieron jar 100 l ar dehe tratada ko DEPC UltraPure Nxoge 5 ar min. 900 l reactivo ar Qiazol bí añadió bí sobrenadante recuperado pa jar nt'ot'e ARN. Ar ARN ar purificado bí utilizó nu'u̲ plantilla pa sintetizar cDNA utilizando oligo dT, hexámeros aleatorios ne SuperScript rever ar transcriptase III nä'ä mä jar Nthuts'i nkohi ar fabricante.
(Cassale et jar ar. 2019)

Lysis Ultrasónica pa Ensayo ar Inmunoprecipitación ar Cromatina

Chromatin immunoprecipitation was performed according to the method described by Menet with minor modifications. Approximately 20 mg ovaries from 0- to 1-day-old wild-type females were homogenized in 1 mL of NEB buffer (10 mM HEPES-Na at pH 8.0, 10 mM NaCl, 0.1 mM EGTA-Na at pH 8, 0.5 mM EDTA-Na at pH 8, 1 mM DTT, 0.5% NP-40, 0.5 mM Spermidine, 0.15 mM Spermine, 1× EDTA- free Complete Protease Inhibitors) with a homogenizer / immersion disperser 1 min (at 3000 rpm). The homogenate was transferred to a pre-chilled glass dounce and 15 full strokes were applied with a tight pestle. Free nuclei were then centrifuged at 6000xg for 10 min at 4°C. The nuclei-containing pellets were resuspended in 1 mL of NEB and centrifuged at 20000 × g for 20 min on sucrose gradient (0.65 mL of 1.6 M sucrose in NEB, 0.35 mL of 0.8 M sucrose in NEB). The pellet was resuspended in 1 mL of NEB and formaldehyde to a final concentration of 1%. Nuclei were cross-linked for 10 min at room temperature and quenched by adding 1/10 vol of 1.375 M glycine. The nuclei were collected by centrifugation at 6000 × g for 5 min. Nuclei were washed twice in 1 mL of NEB and resuspended in 1 mL of Lysis Buffer (15 mM HEPES-Na at pH 7.6, 140 mM NaCl, 0.5 mM EGTA, 1 mM EDTA at pH 8, 1% Triton X-100, 0.5 mM DTT, 0.1% Na Deoxycholate, 0.1% SDS, 0.5% N-lauroylsarcosine and 1× EDTA-free Complete Protease Inhibitors). Nuclei were sonicated using a Hielscher Ultrasonic Processor UP100H (100 W, 30 ar kHz) 'rato ya 'nandi ja 20 s encendido ne 1 min jar hielo. Ya núcleos sonicados ar centrifugaron da 13000 × g Nxoge 4 min da 4oC. Kasu̲ nga̲tho ar cromatina sonicada bí 500 bí 1000 pares ar bases (bp) ar longitud. Pa kadu̲ 'nar inmunoprecipitación, bí incubaron ar 15 ma g cromatina jar 'bu̲i Kwä 10 g anticuerpo monoclonal HP1 9A9 (3 h da 4oC ja 'nar rueda giratoria). Ne gem'bu̲ bí ar añadieron 50 l proteína dinabeads G ne bí continuó ar incubación Nxoge nxui jar 4oC. Ya sobrenadantes ar desecharon ne ya muestras da lavaron ya yoho ya 'nandi ja ya Lysis Buffer (kadu̲ 'nar lavado 15 min ma 4oC) ne yoho ya 'nandi ja DI Buffer (EDTA ar 1 mM, 10 mM TrisHCl ma pH 8). Ar cromatina ar eluía ja ya cuentas yoho ya pasos; Ar ndu̲i jar 100 l tampón elución 1 (10 mM EDTA, 1% SDS, 50 mM TrisHCl ma pH 8) jar 65oC Nxoge 15 ma min, seguido ya centrifugación ne ya recuperación ar sobrenadante. Ar he̲'mi ya perlas ar xi vuelto jar extraer 100 l DI + 0,67% SDS. Ar eluido combinado (200 l) bí incuba Nxoge ar xui 65oC da invertir ya enlaces cruzados ne bí bí za̲pi bí hñut'u̲wi ko RNaseA Nxoge 15oG yá ml Nxoge 15 min jar 65oC ne 500 g yá ml ya Proteinasa ë Nxoge 3 h jar 65oC. Ya muestras da extrajeron ya fenol-cloroformo ne ar precipitó etanol. Ar ADN ar resuspendió jar 25 l ar dehe. Pa maximizar ya análisis moleculares ko ADN inmunoprecipitado, ya genes candidatos ar amplificaron jar pares a través de 'nar nthuts'i nkohi dúplex — PCR optimizado ir nge njapu'befi ya yoho ya conjuntos 'na'ño imprimaciones ko temperaturas ar fusión similares jar 'na sola reacción.
(Casale et jar ar. 2019)

UP200St TD_CupHorn pa sonicación indirecta muestras

UP200St TD_CupHorn pa ar sonicación indirecta muestras komongu ADN ne cizallamiento cromatina

Ya disruptores celulares ar ultrasónicos ar mar hñets'i rendimiento pa muestras biológicas

Hielscher Ultrasonidos ge ár socio ko mfeni Nxoge xingu ya ora nu'bu̲ t'o̲t'e ultrasonicadores mar hñets'i rendimiento pa ar interrupción celular, lelisis, extracción ar proteínas, ADN, ARN ne fragmentación cromatina, nja'bu ngu ya pasos mfädi ar muestras previas. Hielscher ofrece 'nar cartera nxo̲ge homogeneizadores ar laboratorio ultrasónicos ne unidades nt'ot'e muestras, ne pe̲ts'i ar dispositivo ultrasónico ideal pa ár nt'ot'e ar biológica ne ar requisitos.
Sonda ar klase insonifier UP200St pa lisisUltrasonicador clásico ar klase sonda ko micro-punta Komo ar UP200St (200W; ga tsita ar izquierda) wa 'na ya unidades nt'ot'e muestras ultrasónicas VialTweeter o UP200St_TD_CupHorn VialHolder ko ya modelos favoritos jar laboratorios ya nthoni ne ya análisis. Ar sonda ultrasónica clásica ar ideal, nu'bu̲ ar preparan menos muestras tsa da asanadas, extraídas wa fragmentadas. Ya unidades nt'ot'e muestras VialTweeter UP200St_TD_CupHorn permiten sonicación simultánea asta 10 wa 5 viales, respectivamente.
Nu'bu̲ ar tsa procesar 'bede ar muestras ar dätä (nt'udi, placas ar 96 ar me̲he̲, placas ar microtíter, etc.), ar UIP400MTP ar configuración ar sonicación ideal. Ar UIP400MTP funciona komongu 'nar ndäni copa mäs dätä, xi lleno ar dehe ne pe̲ts'i xingu ya espacio pa contener placas micro-pozo. Alimentado ir nge 'nar potente procesador ultrasónico ar 400 ar vatios, ar UIP400MTP ofrece 'nar sonicación xi uniforme ne intensa placas multi-pozo jar 'mui interrumpir ya células, muestras lese, solubilizar pellets, extraer proteínas wa ADN cizallamiento.

Control preciso a través de Smart Software

Procesadores industriales Hielscher ar serie hdT xi da cómodo ne hei ar zu̲di funciona ir nge ya control remoto ar navegador.Ga̲tho ya soluciones sonicación Hielscher ar 200 vatios ma'bu̲ gi equipadas ko 'nar pantalla táctil 'bede njät'i ne 'nar software inteligente. A través de ya datos inteligentes protocolling ga̲tho ya parámetros ar proceso ultrasónico ar guardan automáticamente komongu archivo CSV 'na jar tarheta SD incorporada ngut'ä ngut'ä Komo ar gi du̲i ar ultrasonicador. 'Me̲hna thogi ke ár nthoni ne ar Nthuts'i nkohi 'bu̲hu̲ xingu mäs convenientes. 'Me̲fa ya ensayos sonicación wa jar nt'ot'e ar muestra, simplemente to da hnu ya parámetros sonicación ya sonicación ne ya comparar.
Via the intuitive menu, numerous parameter can be preset before sonication: For instance, to control the temperature in the sample and to prevent its thermal degradation, an upper limit of sample temperature can be set. A pluggable temperature sensor, which comes with the ultrasonic unit, gives the ultrasonic processor feedback on the actual sonication temperature. When the upper temperature limit is reached, the ultrasonic device pauses until the lower limit of the set ∆T is reached and starts then automatically sonicating again.
Nu'bu̲ ar requiere sonicación ko 'nar entrada energía específica, pe preestablecer ar energía ultrasónica final ar nt'eni ja ya sonicación. Hä, ar pulsación ar ultrasónica ne ar modo ciclo 'nehe ar xi configurar individualmente.
Pa volver da utilizar ya parámetros ar sonicación xí exitosos, pe guardar varios modos sonicación (nt'udi, pa ar sonicación, intensidad, modo ar ciclo, etc.) komongu modos predefinidos, pa ndi tsa da da fáciles ne rápidamente iniciados ar 'ra'yo.
'Nar dätä comodidad operativa, pa ga̲tho ya unidades ultrasónicas digitales ar xi operar a través de ar control remoto ar navegador 'na navegador hne ngatho (nt'udi, InternetExplorer, Safari, Chrome, etc.). Ar conexión LAN ge 'nar configuración simple plug — n — play ne hingi requiere instalación software adicional.
Hielscher jar sabemos ne ar sonicación exitosa muestras biológicas requiere precisión ne ar repetibilidad. Ir diseñamos HMUNTS'UJE ultrasonicadores komongu dispositivos inteligentes ko ga̲tho ya características da permiten 'nar nt'ot'e muestras nt'ot'e xi hño, ar confiable, ya reproducible ne ya mahyoni.

Ga japi ar jar contacto ko ngekagihe nu'bya ne contar ga dige yá muestras ya biológicas ne ya pasos nt'ot'e mahyoni. Propondremos ar dispositivo nt'ot'e muestras ultrasónicas mäs adecuado ne bí ayudaremos ko ungumfädi adicional komongu protocolos ne mfädi.

The table below gives you an indication of the approximate processing capacity of our ultrasonic systems from ultrasonic micro-tips and classic ultrasonic homogenizers to MultiSample ultrasonicators for the convenient, reliable preparation of numerous samples:

Volumen lote Tasa flujo Dispositivos recomendados
Placas 96 me̲he̲ yá microtíteres n.a. UIP400MTP
10 viales 0,5 ma 1,5 ml n.a. VialTweeter jar UP200St
CupHorn pa sonicación indirecta, ngu, asta ar 5 ar viales n.a. UP200St_TD_CupHorn
0.01 250mL 5 100 ml yá min UP50H
0.01 500mL 10 200 mL yá min UP100H
0.02 1 ar L 20 400 mL yá min. UP200Ht / UP200St
10 da 2000mL 20 400 mL yá min. UP200Ht, UP400St
0.25 5 ar L 0.05 1 L yá min UIP500hdT

Ja ar contacto ko ngekihe! Yá preguntar ga!

Da 'yadi mäs ungumfädi

Utilice da ku̲hu̲ formulario pa da 'yadi ungumfädi adicional dige ar procesadores ultrasónicos, ar aplicaciones ne ar precio. Estaremos encantados da mä ár proceso ko nu'i ne bí ofrecer 'nar ko ya ultrasónico da cumpla ko yá requisitos!









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The VialTweeter is a MultiSample Ultraonicator that allows for reliable sample preparation under precisely controlled temperature conditions.

Ar xe̲ni mfädi ultrasónica multimuestra VialTweeter permite sonicación simultánea asta 10 viales. Ko ar dispositivo sujeción VialPress, ar xi presionar asta 4 tubos Nthuts'i jar xeni delantera pa 'nar sonicación intensa.

Ot'a yá Referencias



Hielscher Ultrasonics supplies high-performance ultrasonic homogenizers from lab to industrial size.

Ultrasonidos ya mar hñets'i ar rendimiento! Gama productos Hielscher cubre nga̲tho ar espectro, ndezu̲ ar ultrasonicador ar laboratorio xí nze̲di dige unidades sobremesa asta sistemas ultrasónicos totalmente industriales.


Hechos Bale ar penä ga pädi

Metabolómica

Metabolomics is the study of small molecules, known as metabolites, present within cells, biofluids, tissues or organisms. These small molecules and their interactions within a biological system are summarized under the umbrella term “metabolome” and the research field is called metabolomics. The metabolome research is closely connected with the rapidly emerging field of precision medicine. The understanding of the metabolome and its relation to various diseases helps to develop disease prevention and clinical care strategies whilst individual variability in environment, lifestyle, genetics, and molecular phenotype. In order to release metabolite molecules from cells, ultrasonication is frequently used in biological laboratories for pre-analytical sample preparation such as cell disruption, lysis and the extraction of proteins, lipids and other molecules.