Extracción betaglucanos setas ir nge ya ultrasonidos
Materiales ne equipos
- Champiñones (nt'udi, 100 g ar champiñones picados wa rodajas)
- Ar dehe destilada fría (nt'udi, 500 ml)
- Licuadora wa ya molinillo
- Baso ar precipitados wa frascos vidrio
- He̲'mi filtro wa 'nar configuración filtración ja ar vacío
- Centrífuga (opcional)
- Alkol (nt'udi, etanol) pa precipitación
- Refrigerador
- Horno secado
Nthuts'i nkohi extracción beta — glucano
- Ju̲ní wa triturar ya champiñones (nt'udi, Chaga wa Lyon’ Hongo melena) jar partículas gruesas ar aprox. 1 jar 3 milímetros. Ngu, use 100 g partículas hongos secos.
- Tso̲kwa continuación, añada ya partículas setas ja 'nar Baso ar precipitados wa matraz vidrio.
- Tso̲kwa continuación, agregue 500 ml ar dehe destilada ar Baso ar precipitados da contiene ya partículas hongos nä'ä da da extraer. Nä'ä da 'yadi wa ar dehe hongo to variar nä'ä mä ar klase específico ar hongo ne ar tamaño partícula.
- 'Mefa xta agitar ar suspensión, sonique mezcla ko 'nar homogeneizador laboratorio ultrasónico (nt'udi, UP400St ko 'nar sonotrodo 22 mm ja ar 100% amplitud wa UP200Ht ko 'nar sonotrodo 14 mm ja ar 100% ar amplitud) ne mantenga 'nar mpat'i inferior ma 90 °C. Ya temperaturas mäs bajas ayudan da jwati ya compuestos sensibles ar pa, komongu ya betaglucanos Nxoge ar extracción. Sonicado Nxoge aprox. 5 da 10 ya t'olo ora nu'bu̲ ar gi japu̲'be̲fi jar UP400St ne Nxoge 10 t'olo ora nu'bu̲ ar gi japu̲'be̲fi ar UP200Ht, respectivamente. Pets'i ja da ar mpat'i ne ar pa extracción xi variar ir nge ár nts'edi ultrasónica utilizada. Hä, ya volúmenes mäs mña dätä requerirán tiempos ar sonicación xí largos.
- Filtre ar mezcla sonicada a través de he̲'mi filtro wa utilice 'nar configuración filtración ja ar vacío da separar ar líquido (da contiene ya betaglucanos extraídos) ar residuo sólido hongos.
- Tso̲kwa continuación, precipite ya betaglucanos ar líquido añadiendo alkol (nt'udi, etanol). Ir 'me̲t'o general, pe zu̲di 2 — 3 volúmenes ar alkol pa ar precipitación.
- 'Me̲fa eso guarde ar mezcla 'nar refrigerador Nxoge ndunthe ya ora pa hegi nuna ar Hmunts'i da betaglucanos ya precipiten.
- 'Mefa xta precipitación, pe decantar ar líquido xi cuidado ne recolectar ar precipitado beta — glucano.
- Ir último, seca ya betaglucanos 'nar horno xí hñets'i'i mpat'i (nt'udi, 40 — 50°C) Asta ke bí elimine nga̲tho ar alkol ne obtengas 'nar polvo seco.
Ya hongos presentan variaciones ja yá características. Ir proceso extracción beta — glucano to nt'uni ir nge ar factores komongu ar zu'we Dar específica ar hongo, jar dätä hnini ja ya hongos (secos wa frescos), ar tamaño ar partícula ne ar mpat'i extracción. Pa optimizar ár nt'ot'e extracción, mahyoni ja ar posibilidad ar experimentar ko 'na'ño parámetros, komongu ar variación ya proporciones sólido-líquido, ar za ya temperaturas, ar exploración varios ar disolventes ne ar ntsa̲ ar 'na'ño duraciones sonicación ne ajustes amplitud.
Extracción enzimática asistida ya ultrasonidos beta — glucano
Ar extracción enzimática asistida ya ultrasonidos ge 'nar nt'ot'e utilizado pa extraer betaglucanos ya hongos ir nge 'nar combinación ya enzimas ne ya ondas ultrasónicas. Nuna ar proceso mejora dätä nt'ot'e ar extracción ar romper ya paredes celulares ya hongos ne ár hño ja ar liberación betaglucanos.
Ampliación ar extracción betaglucano ya hongos
Mbi xi establecido 'nar nthuts'i nkohi extracción betaglucano da cumpla ko yá requisitos, ntu̲ngi proceso extracción to da 'befi nguu 'nar sencilla.
Escalado ar extracción ya lotes
Nu'bu̲ planea escalar verticalmente ir nge 'nar nt'ot'e extracción ya lotes, ar recomienda aumentar ar volumen ar lote manteniendo constantes ya proporciones sólido-líquido ne ngatho ya 'ra parámetros. Nu'bu̲ te̲ni utilizando ar xkagentho homogeneizador ultrasónico, xi hño da ar aumentar proporcionalmente ar pa sonicación. Pa lotes da superen 1 ar litro, ar tsa̲ da desee nt'ent'i incorporación 'nar agitador lento pa da zeti ar suspensión partículas ne mejorar ar uniformidad ar extracción. Xtí ar tsita gi 'ñudi 'nar configuración extracción ya lotes 8 litros utilizando 'nar homogeneizador ultrasónico UP400St jar combinación ko 'nar agitador laboratorio.
Extracción hongos jar 'ñu
Pa aquellos interesados jar extraer ñäñho pe̲ts'i cantidades betaglucanos ya hongos, Hielscher Ultrasonics ofrece reactores ar celda flujo diseñados pa extracción hñei botánico. Nu'bu̲ nuna gehna ár nt'ot'e, bí recomendamos ne da ponga jar contacto ko ngekagihe Hmunts'i da uni mäs ungumfädi. Ma equipo técnico da encantado ar bí da 'BATS'I jäts'i ar configuración xí adecuada pa yá ndu específicas. Ne nuna, da t'ot'e ar experimento escala laboratorio mencionado ma 'met'o mi ko ár zu'we Dar específica ar hongo to da invaluable pa t'ode ya requisitos precisos ar proceso. Xtí ar tsita gi 'ñudi 'nar Nar dätä hño reactor celda flujo ko 'nar homogeneizador ultrasónico UIP4000hdT pa extraer betaglucanos aproximadamente 50 ma 200 litros ar lodo disolvente hongos ya ora.
Concentración empírica beta — glucano ar especies hongos
Tso̲kwa continuación, encontrará 'nar Nthuts'i concentración empírica beta — glucano da extrajo ndunthe especies hongos.
Especies hongos | Contenido Beta Glucano (% jar be̲xu) |
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Termitomyces fuliginosus R. Heim | 1% |
Boletus coloso R. Heim | 3% |
Russula densifolia Secr. ex Gillet | 25% |
Russula cyanoxantha (Schaeff.) Fr. | 29% |
Russula alboareolata Hongo | 42% |
Russula emetica (Schaeff.) Pers. | 10% |
Russula delica Fr. | 38% |
Pycnoporus cinnabarinus (Jacq.) hne. Karst. | 35% |
Amanita hemibapha (Berk. & Broome) Sacc. | 5% |
Ts'ät'i Amanita princeps & Bas | 9% |
Amanita caesarea (Scop.) Pers. | 4% |
Heimiella retispora (Pat. & C.F. Baker) Boedijn | 19% |
Cortinarius claricolor var. turmalis (Fr.) Quadr | 13% |
Termitomyces tylerianus Otieno | 12% |
Termitomyces microcarpus (Berk. & Broome) R. Heim | 8% |
Termitomyces eurhizus (Berk.) R. Heim | 7% |
Polyporellus varius (Pers.) hne. Karst. | 2% |
Pycnoporus coccineus (Fr.) Bondartsev & Cantante | 45% |
Lentinus squarrosulus Mont. | 2% |
Daedaleopsis confragosa (Bolton) J. Schröt | 3% |
Pycnoporus sanguineus (L.) Fr. | 35% |
Amanita hemibapha (Berk. & Broome) Sacc. | 5% |
Amanita virgineoides Bas | 1% |
Agaricus silvaticus Schaeff. | 3% |
Chlorophyllum molybdites (G. Mey.) Massee | 3% |
Ganoderma lucidum (Curtis) hne. Karst. | 33% |
Amauroderma rugosum (Blume & T. Nees) Torrend | 4% |
Suillus bovinus var. bovinus (Pers.) Kuntze | 1% |
Clitocybe suaveolens (Schumach.) hne. Kumm. S | 9% |
Cleroderma verrucosum (Bol.) Pers. | 9% |
Heimiella retispora (Pat. & C.F. Panadero) | 19% |
Lentinula edodes (Berk.) Pegler | 34% |
Pycnoporus cinnabarinus (Jacq.) hne. Karst. | 35% |
concentración betaglucano especies setas jar kampo, Fuente: Boonyanuphap, Jaruntorn & Hansawasdi, Chanida. (2010). NTHEGE espacial ya hnini hongos jar kampo da contienen betaglucano jar jar mboza seco subtropical, Tailandia. 'Na'ño 'mu̲i fúngica. 46. 29-42. 10.1007/s13225-010-0067-8.
Cuantificación ar concentración extracto betaglucano hongos
Concentración beta — glucano 'mefa xta ar extracción ar tsa̲ da cuantificar utilizando varios nt'ot'e, dependiendo de ar klase beta — glucano ne ya requisitos específicos ar análisis. Tso̲kwa continuación da enumeran ya nt'ot'e pa ngatho pa cuantificar ar concentración beta — glucano. Hä, ár nt'ets'i ár nt'ot'e bi jagu̲ju̲ factores komongu ar precisión ar requerida ne ar equipo disponible.
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Nt'ot'e gravimétrico
- Ndui: Nuna ar nt'ot'e da basa jar ar precipitación ar betaglucanos ko ar etanol, seguida ar secado ne ar pesaje ar ar precipitado.
- Nt'ot'e: Ar muestra bí disuelve jar dehe, bí mä ko etanol pa precipitar betaglucanos, ne gem'bu̲ bí recoge, seca ne pesa ar precipitado.
- Ventajas: Sencillo ne ampliamente utilizado.
- Limitaciones: Menu preciso jar comparación ko ma'ra ya nt'ot'e.
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Nt'ot'e colorimétricos
- Ndui: Nuya ya nt'ot'e implican reacciones njät'i ko reactivos específicos da producen 'nar cambio njät'i proporcional ma concentración beta — glucano.
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Ejemplos:
- Nt'ot'e fenol — ácido sulfúrico: nuna ar nt'ot'e ir bo̲ni jar japi ar muestra ácido sulfúrico concentrado ne fenol, nä'ä mi thogi ke ár njäts'i ar vuelva naranja. Ar intensidad ar njät'i ar proporcional bí concentración ar beta — glucano.
- Nt'ot'e Anthrone: Ar reactivo Anthrone reacciona ko ya betaglucanos pa producir 'nar njät'i k'angi verdoso ne bí mide ar intensidad ar njät'i.
- Ventajas: Sensible ne adecuado pa análisis mar hñets'i ar rendimiento.
- Limitaciones: Interferencia ma 'ra ya compuestos ne ya 'medi da reactivos ar específicos.
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Ensayos enzimáticos
- Ndui: Ya ensayos enzimáticos utilizan enzimas komongu ar β — glucanasa da descomponer ya betaglucanos azúcares mäs simples, ne da cuantifican ya azúcares liberados.
- Ventajas: Na específico ne preciso.
- Limitaciones: Requiere equipos ne reactivos mfädi.
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Cromatografía líquida mextha resolución (HPLC)
- Ndui: Ar HPLC separa ne cuantifica ya compuestos ir nge yá interacciones ko 'nar columna cromatográfica.
- Nt'ot'e: Ya betaglucanos ar hidrolizan jar monosacáridos, ne ya azúcares da t'ot'e 'na bí separan ne cuantifican ir nge ya HPLC.
- Ventajas: Mextha precisión ne mfädi pa muestras complejas.
- Limitaciones: Requiere equipo especializado ne mfeni.
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Inmunoensayos específicos
- Ndui: Ya inmunoensayos utilizan anticuerpos específicos kontra ya betaglucanos da cuantificar ár concentración.
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Ejemplos:
- ELISA (Enzyme — Linked Immunosorbent Assay): Jar nuna nt'ot'e anticuerpo ligado 'nar enzima produce 'nar cambio ar njät'i nu'bu̲ une ja ya betaglucanos.
- Ensayos flujo lateral: ya pruebas rápidas da proporcionan 'nar nt'uni visible ja 'nar tira reactiva.
- Ventajas: Mextha ar especificidad ne ar sensibilidad.
- Limitaciones: Requiere anticuerpos específicos ne to da mäs costoso.