Hielscher ultralydteknologi

Prøve forberedelse med ultralyd vialTweeter

Prøvepreparat før analyse kan kreve ulike pre-analytiske prosesser som vevhomogenisering, lysis, ekstraksjon av proteiner, DNA, RNA, organeller og andre intracellulære stoffer, oppløsning og avgassing. VialTweeter er en unik ultralydsenhet som forbereder flere prøverør samtidig under nøyaktig samme forhold. På grunn av indirekte sonikering av lukkede testrør unngås krysskontaminering og prøvetap.

Ultralyd Prøveforberedelse

Ultrasonication is a common technique of sample treatment in order to get the sample ready for analyses such as polymers chain reaction (PCR), Western Blots, assays, molecular sequencing, chromatography etc. Ultrasonication is a technique widely used in laboratories to treat samples pre-analytically. A major advantage of sonication is that the working principle of ultrasound is based on purely mechanical forces. Ultrasonic lysis and cell disruption is achieved by sonomechanical shear forces, which gives ultrasonication the advantage that the solvents used for protein extraction can be used also during lysis. Ultrasonic cell disruptors such as the VialTweeter break the cell walls / membranes and promote mass transfer between cell interior and solvent. Thereby, the analyte (e.g. DNA, RNA, proteins, organelles etc.) are efficiently transferred from the cell matrix into the solvent. This means the steps of quenching and extraction overlap with the ultrasonic cell disruption process, which makes ultrasonic lysis very effective. Furthermore, ultrasonic sample preparation does not require detergents and other lysis reagents, which might alter and destruct the structure of the lysate and is known for the subsequent troubles with purification. Another lysis method, the enzymatic disruption requires long incubation times and delivers often non-reproducible results. Ultrasonic sample preparation overcomes common problems in sample preparation such as tissue homogenization, cell disruption, lysis, protein extraction and lysate solubilization. Since the intensity of the ultrasonic treatment can be exactly controlled and adjusted to the biological sample, degradation and sample loss are avoided. Automatically monitored and controlled sample temperature, pulse mode and sonication duration ensure optimum outcomes.

VialTweeter er et unikt ultralydsystem for samtidig sonikering av opptil 10 hetteglass under nøyaktig samme forhold uten krysskontaminering.

UP200St med VialTweeter for sonikering av lukkede hetteglass

Hetteglasstweeter er spesielt praktisk for laboratoriearbeid som krever samtidig fremstilling av flere prøver under samme forhold. VialTweeter er en ultralydblokk sonotrode som kan holde opptil 10 hetteglass (f.eks Eppendorf, centriguge, NUNC rør, kryo-ampuller) og sonikerer dem intenst under nøyaktig kontrollerte forhold. Siden ultralydenergien er kombinert gjennom hetteglassenes vegger inn i prøvemediet, opprettholder hetteglassene lukket under behandlingen. Dermed unngås prøvetap og krysskontaminering helt.

Komplett VialTweeter oppsett: VialTweeter sonotrode ved ultralydsprosessor UP200St

Ultralyd prøve prep enhet VialTweeter: VialTweeter sonotrode for ultrasonic processor UP200St

Informasjonsforespørsel




Merk våre Personvernregler.


Hetteglass og rør som passer til HetteglassTweeter

VialTweeter er egnet til å holde 10 vanlige koniske eller runde bunnrør som Eppendorf, sentrifuge, kryo-hetteglass og ulike NUNC hetteglasstyper, men hullene kan tilpasses andre hetteglass og rørstørrelser på forespørsel. Gi oss beskjed om hvilken type testrør du vil bruke, slik at vi kan endre hetteglasstweeteren din tilsvarende. For større testrør som Falcon-rør og andre testbeholdere, beger og fartøy er VialPress en praktisk løsning.

Hetteglassettweeter med VialPress

Hielscher VialTweeter med VialPress for indirekte Sonikering av større hetteglassMens VialTweeter selv med sine 10 rørhull allerede er en unik og svært funksjonell ultralydsenhet, gjør VialPress-tillegget VialTweeter enda mer allsidig og fleksibel for drift. VialPress er et tilbehør for VialTweeter som består i en clamp-on bar som gjør det mulig å fiksere større prøverør som Falcon rør eller andre små til mellomstore testbeger til VialTweeter front. Bildet til venstre viser VialTweeter holder 10 Eppendorf hetteglass i blokken, mens VialPress fikserer en større testrør til forsiden for sonikering. VialPress er i stand til å holde opptil 5 større testrør for intens sonikering.

Klargjøringsprotokoller for hetteglasstweeter-prøve

VialTweeter er mye brukt til å sonikere biologiske prøver. Før analyse må prøver tilberedes for biokjemiske eller biofysiske analyser og analyser, for eksempel ved lysis, vevhomogenisering, proteinutvinning, DNA / RNA-klipping, avgassing etc. VialTweeter oppfyller disse ultralydprosessene pålitelig og gir reproduserbare resultater. En vanlig anvendelse av VialTweeter er lysis / celle forstyrrelse av pattedyr (menneske og dyr) vev samt bakterier celler og virale partikler. Vellykket vialTweeter-behandlet biologiske prøver inkluderer humane lunge epitelceller, hematopoetiske stamceller, myelogen leukemi celler, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Bacillus anthracis, Francisella tularensis, Yersinia pestis, Streptokokker pyogener, Caulobacter halvmåne, Mycoplasma pneumoniae, mycobacteria / Mycobacterium tuberculosis kompleks (MTBC) og mange andre bakterielle, botaniske og mikrobielle celler.
Nedenfor finner du noen utvalgte protokoller med VialTweeter.

The VialTweeter can hold up to 10 common test vials for simultaneous ultrasonic sample preparation

VialTweeter sonikerer 1,0, 1,5 og 2,0 ml Eppendorf-rør med høy intensitet uten krysskontaminering eller prøvetap.

Bruksområder for hetteglassTweeter

  • Vev homogenisering
  • Cell avbrudd & lyse
  • Proteinekstraksjon
  • DNA / RNA klipping
  • celle pellet solubilisering
  • patogen deteksjon
  • avgassing
  • in-vitro diagnostikk
  • pre-analytisk behandling
  • proteomikk

E.Coli Lysis med vialTweeter for In-Vivo glutation bestemmelse

Escherichia coli bakterier av stammen MG1655 ble dyrket i MOPS minimal medium i et totalt volum på 200ml til en A600 på 0,5 ble nådd. Kulturen ble delt inn i 50 ml kulturer for stressbehandling. Etter 15 min inkubasjon med 0,79 mM allicin, 1 mM diamid eller dimetylsulfoksid (kontroll), ble cellene høstet ved 4000g ved 4 °C i 10 min. Cellene ble vasket to ganger med KPE-buffer før resuspensjon av pellets i 700μl KPE-buffer. For deproteinering ble 300μl på 10% (w / v) sulfosalisylsyre lagt til før forstyrrelse av celler ved ultralydbehandling (3 x 1 min; HetteglassTøter ultrasonicator). Supernatanter ble samlet inn etter sentrifugering (30 min, 13.000g, 4 °C). Sulfosalicylic acid konsentrasjoner ble redusert til 1% ved tilsetning av 3 volumer KPE buffer. Målinger av total glutation og GSSG ble utført som beskrevet ovenfor. Cellulære glutationkonsentrasjoner ble beregnet basert på et volum av E. coli-celler på 6,7×10-15 liter og en celletetthet på A600 0,5 (tilsvarende 1×108 celler ml-1 kultur). GSH-konsentrasjoner ble beregnet ved subtraksjon av 2[GSSG] fra total glutation. (Müller et al. 2016)

Cellelysis med hetteglassTweeter før grafittovn atomabsorpsjonsspektrometri

Bacillus subtilis 168 (trpC2) ble utsatt for 15 min antibiotikastress, deretter ble cellene høstet på 3320 x g, vasket fem ganger med 100 mM Tris / 1 mM EDTA, pH 7,5, resuspended i 10 mM Tris, pH 7.5 og forstyrret av ultralydbehandling i et Hielscher VialTweeter instrument. (Wenzel et al. 2014)

Klargjøring av hetteglasstweeterprøve før massespektrometri

De lyofiliserte cellepellets av humane CD34􏰀 hematopoetiske stamceller ble gjenbrukt i 10μ􏰇l (200μl for bulk HEK293 forberedelse for peptid fortynning serien) av 8 M urea i 100 mM ammoniumhydrogenkarbonat og lysed hjulpet av sonikering med Hielscher VialTweeter med en amplitude på 60%, en syklus på 60% og en varighet på 20-tallet for tre ganger med mellomkjøling på is. (Amon et al. 2019)

Eksempel på klargjøringsprotokoller ved hjelp av VialPress

The VialTweeter equipped with VialPress, a clamp that fixates larger test vessel to the VialTWeeter front for intense indirect sonicationFersk salat (Lactuca sativa) ble homogenisert i 0,5 M HEPES buffer (pH 8, KOH justert) i forholdet 1 g plante (frisk vekt) til 200, 100, 50 eller 20 ml bufferløsning. Forholdet mellom volum for plantemasse og bufferløsning var variert for å holde det totale homogene volumet mellom 3,5 og 12 ml. Forholdet mellom volum av plantemasse til bufferløsning var variert for å holde det totale homogene volumet mellom 3,5 og 12 ml, noe som tillater homogenisering med sonden. Homogenater deretter gjennomgikk indirekte ultralydbehandling ved hjelp av en UP200St med VialTweeter utstyrt med 200xt VialPress (Hielscher Ultrasonics GmbH, Tyskland) i 3 min (80% puls og 100% strøm). Bruk av denne enheten unngikk kontaminering. (Laughton et al. 2019)

Informasjonsforespørsel




Merk våre Personvernregler.


VialTweeter at the ultrasonic processor UP200ST

Hetteglasstweeter med 10 Eppendorf hetteglass på ultralydprosessoren UP200St

Pålitelig temperaturkontroll under sonikering med VialTweeter

Temperatur er en avgjørende prosess-påvirkende faktor som er spesielt viktig for behandling av biologiske prøver. Som alle mekaniske prøveforberedelsesteknikker skaper sonikering varme. Temperaturen på prøvene kan imidlertid kontrolleres godt ved bruk av VialTweeter. Vi presenterer deg ulike alternativer for å overvåke og kontrollere temperaturen på prøvene dine mens du forbereder dem med VialTweeter og VialPress for analyse.

  1. Overvåking av prøvetemperaturen: Ultralydprosessoren UP200St, som driver VialTweeter, er utstyrt med en intelligent programvare og en pluggbar temperatursensor. Koble temperatursensoren til UP200St og sett spissen av temperatursensoren i et av prøverørene. Via digital farget berøringsskjerm kan du stille inn menyen i UP200St et bestemt temperaturområde for prøvesonikering. Ultrasonicatoren vil automatisk stoppe når makstemperaturen er nådd og pause til prøvetemperaturen er ned til den lavere verdien av den innstilte temperaturen ∆. Deretter begynner sonikeringen automatisk igjen. Denne smarte funksjonen forhindrer varmeindusert nedbrytning.
  2. VialTweeter-blokken kan forkjøles. Sett VialTweeter-blokken (bare sonotroden uten transduser!) i kjøleskapet eller fryseren for å forhåndskjøle titanblokken bidrar til å utsette temperaturstigningen i prøven. Hvis det er mulig, kan prøven i seg selv også være forhåndskjølt.
  3. Bruk tørris til å avkjøles under sonikering. Bruk et grunt brett fylt med tørris og plasser VialTweeter på tørrisen slik at varmen raskt kan forsvinne.

Kunder over hele verden bruker VialTweeter og VialPress for deres daglige prøveforberedelsesarbeid i biologiske, biokjemiske, medisinske og kliniske laboratorier. Den intelligente programvaren og temperaturkontrollen til UP200St-prosessoren, temperaturen er pålitelig kontrollert og varmeindusert prøvenedbrytning unngås. Ultralydprøve forberedelse med VialTweeter og VialPress gir svært pålitelige og reproduserbare resultater!

Tekniske detaljer om VialTweeter

VialTweeter er en blokk sonotrode laget av titan som kan rommer opptil 10 hetteglass i hullene i blokken. I tillegg kan opptil 5 større testrør klemmes til VialTweeter-fronten ved hjelp av VialPress. Hetteglassettweeter er så designet at ultralydsenergien fordeles jevnt inn i hvert innsatte hetteglass for å sikre pålitelige og ensartede sonikeringsresultater. En liten dreining justerer VialTweeter sonotrode til ujevnt underlag og justerer reagensrørene vertikalt.

Fordeler med VialTweeter et øyeblikk

  • Intensiv lydbehandling av opptil 10 ampuller samtidig
  • Indirekte sonikering ved høy ultralyds intensitet gjennom karveggen inn i prøven
  • Indirekte sonikering unngår krysskontaminering og prøvetap
  • Reproduserbar resultater på grunn av justerbar og kontrollerbar sonikering amplitude
  • VialPress gjør det mulig å sonikere større rør
  • Justerbar amplitude fra 20 til 100%
  • Justerbar pulsmodus fra 0 til 100%
  • autoklaverbar

Hetteglasstweeteret drives av UP200St, en 200 watt kraftig ultralydprosessor. UP200St er utstyrt med en intelligent programvare som gir presis kontroll over alle viktige ultralydprosessparametere som amplitude, sonikeringstid, pulsering og temperatur. Dette gjør VialTweeter til et pålitelig verktøy for vellykket reproduserbar prosess resulterer i biologiske og biokjemiske laboratorier.
Fargeskjermvisning av ultralydsenhet UP400StAmplitude kan justeres mellom 20 og 100% og gjør det mulig å tilpasse ultralydintensiteten til prøven din. For eksempel krever klipping og fragmentering av DNA og RNA en mildere amplitude for å forhindre produksjon av for små DNA-fragmenter, vevhomogeniseringen av musehjernen trenger høy intensitets sonikering. Velg den ideelle amplituden, sonikeringsintensiteten og varigheten via den smarte og intuitive menyen på UP200St-prosessoren. Menyen og innstillingene kan enkelt nås og betjenes via farget berøringsskjerm. I innstillingene kan du forhåndsinnsette sonikeringsparametere som amplitude, pulsering / syklusmodus, sonikeringsvarighet, total energiinngang og temperaturgrenser. I forskning og produksjon er repeterbarheten av studier og testresultater avgjørende. Dette betyr at nøyaktig registrering av prosessforhold og sonikeringsprotokoller er helt viktige. Den automatiske dataprotokolleringen skriver alle sonikeringsdata i en CSV-fil på et integrert SD-kort, slik at du enkelt kan sjekke og sammenligne ulike sonikeringskjøringer. Alle ultralydprosessdata kan enkelt nås og deles som CSV-fil.
Hielscher Ultrasonics streber etter å gi deg avansert teknologi for å lette og forbedre forskningsarbeidet ditt!

Be om et forslag for denne varen!

For å motta et forslag, kan du sette din kontaktinformasjon i skjemaet nedenfor. En typisk enhetskonfigurasjonen er forhåndsvalgt. Føl deg fri til å revidere valget før du klikker på knappen for å be om forslaget.








Vennligst oppgi informasjonen, som du ønsker å motta, nedenfor:



  • UP200St-G Ultralyd Generator 200 watt

    ultralyd generator, 200W, 26kHz (Autom. tuning system), berøringsskjerm, amplitude justerbar 20-100%, puls 10-100%, tørr kjører beskyttet, IP51, inkl. kraftmåling, socket for Ethernet, strømforsyning, nettverkskabel, bærbart etui, manuell



  • UP200St-T ultralyd transduser 200 watt

    ultralyd svinger, Ø45mm, ca. lengde 230mm, titanhorn Ø10mm (amplitude 70 μm), IP65-klasse, start/stopp-knapp, kontakt for PT100, lysdioder for prøvebelysning, med ST1-klemme, med monteringsverktøy



  • Hielscher VialTweeter for ultralyd enhet UP200St

    Hetteglass-diskant-Sonotrode, laget av Titan, for ultralydsprosessor UP200St eller UP200Ht, med 10 kjeder ø11mm, for eksitasjon av opptil 10 Eppendorf-rør 1,5 ml eller andre, (se også spenn anordning VialPress for fartøy med andre dimensjoner)



  • sonotrode for direkte sonikering, laget av Titan, Ø2mm (3mm2), ca. lengde 120mm, mannlig tråd M6x 0,75, for prøver ca. fra 2ml opp til 50 ml, amplitude ratio ca. 1:3, autoklaverbar



  • Hielscher VialPress for VialTweeter på ultralyd enhet UP200St

    Spenn anordning som tilbehør for VialTweeter-Sonotrode S26d11x10, rustfritt stål, for eksitasjon av opptil 5 fartøyer med Ø på opptil 20mm



  • ekstern fotbryter

    Ekstern fot bryter, pedal knapp, med RJ45-plugg (hann), svart belagt stål med gummi, 1,5 m kabel, for alle Hielscher ultralyd homogenisatorer med berøringskontroll (f.eks. UP200Ht, UP200St, Aktiver fjernkontroll RJ45 i innstillinger), se ekstern fotbryter


Vær oppmerksom på at Personvernregler.


Ultralyd apparat VialTweeter for proteinekstraksjon fra vevsprøver (Trykk for å forstørre!)

HetteglassTweeter med VialPress for indirekte sonikering.

Litteratur / Referanser



3 trinn for vellykket ultralydbehandling: gjennomførbarhet - optimalisering - skalering (klikk for å forstørre!)

Ultralydbehandling: Hielscher hjelper deg fra gjennomførbarhet og optimalisering til kommersiell produksjon!