हिल्सचर अल्ट्रासाउन्ड टेक्नोलोजी

ई कोलि को अल्ट्रासोनिक Lysis

  • ई। कोलो जीवाणुहरू माइक्रोबायोलजी र बायोटेक्नोलोजीमा सबैभन्दा सामान्य प्रयोग गरिन्छ।
  • अल्ट्रासोनिक सेल विच्छेदकर्ता ई। कोलोन को लागी विश्वसनीय र reproducable परिणाम प्रदान गर्दछ।
  • तीव्र अझै सम्म सटीक रूपमा नियन्त्रणयोग्य cavitation र कतरनी बल पूर्ण विघटन र उच्च निष्कर्षण उपज (जस्तै प्रोटीन, डीएनए) मा परिणाम।

Cavitation द्वारा सेल अवरोध

एस्क्रेरिसिया कोली ब्याक्टेरिया अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers को उपयोग गरेर विश्वसनीय रूप देखि lysed।अल्ट्रासोनिक जांच-प्रकारको Homogenizers लगभगको साथ काम गर्दछ। प्रति 20,000 चक्र प्रति सेकेन्ड (20 कि.जी.ज.ज.) र तरल पदार्थ वा सुपरस्सनमा cavitation कारण। वैक्यूम-जस्तै दबाब र उच्च तापमान कि कोशिकाहरु लाई अलग गर्दछ को ध्वनिक cavitation माइक्रोस्कोपी क्षेत्रहरु। यद्यपि तापक्रम धेरै हज़ार डिग्री सेल्सियससम्म पुग्न सक्छ, भित्ता भोल्युमहरू यति सानो हुन्छन् कि उनीहरूले यो प्रक्रियालाई तातो नखान्छन्। अल्ट्रासाउंड उत्पन्न ध्वनिक cavitation र कतरनी बलहरु लाई पराजित गर्दछ या E.coli को सेल झिल्ली तोड्छ। – अल्ट्रासोनिक homogenizer को उपकरण सेटिंग्स मा निर्भर गर्दछ।

अल्ट्रासोनिक लिसिसको लाभ

  • lysis को सटीक नियंत्रण (तीव्रता, आयाम, तापमान)
  • विशिष्ट नमूनेहरूमा इष्टतम अनुकूलन
  • तापमान नियन्त्रण
  • धेरै साना को लागि धेरै ठूलो नमूने (लीटर सम्म μL)
  • शुद्ध यांत्रिक उपचार
  • रैखिक मापन अप प्रयोगशालाबाट उत्पादन
अल्ट्रासोनिक उपकरण VialTweeter 10 प्रक्रियाहरु को एक साथ नमूना नमूना तैयारी को लागि अनुमति को लागि एक नै प्रक्रिया को स्थितिहरु को तहत। (विस्तार गर्न क्लिक गर्नुहोस्!)

VialTweeter अल्ट्रासोनिक lysis को लागि

सूचना अनुरोध




हाम्रो नोट गर्नुहोस् गोपनीयता नीति


जब रासायनिक र एंजाइमिक लिसिस समस्याग्रस्त हुन सक्छ – किनकी रासायनिक एलिसन प्रोटीन ढाँचाहरू बदल्न सक्छ र शुद्धीकरण समस्याहरू प्रस्तुत गर्न सक्दछ र एंजाइमिक एलिसन लामो इन्सुलेशन टाइमर चाहिन्छ र पुनरुत्थान योग्य छैन। – अल्ट्रासोनिक अवरोध एक परिष्कृत, छिटो सेल अवरोध विधि हो।
अल्ट्रासोनिक lysis मात्र मेकानिकल फोर्समा आधारित छ। कुनै रसायनहरू थपिएका छैनन्, Sonication कतराहरू द्वारा सेल सेल भत्काउँछ। रासायनिक lिसिन प्रोटीन संरचना परिवर्तन र शुद्धिकरण समस्या परिचय गर्न सक्दछ। एन्जाइमेटिक अवरोधलाई लामो इन्क्युबेशन समय आवश्यक पर्दछ र पुन: उत्पादन योग्य हुँदैन। E.coli ब्याक्टेरिया सेलहरूको अल्ट्रासोनिक सेल अवरोध छिटो, सरल, विश्वसनीय र पुन: उत्पादन योग्य छ। यसैले हिल्सचर अल्ट्रासोनिकेटरहरू विश्वभरका जैविक र जैविक रसायन प्रयोगशालाहरूमा नमूना तयारी, पूर्व-एनालिटिक्स, इन-भिट्रो डायग्नोस्टिक्स र मनिफोल्ड एसेसको लागि प्रयोग गरिन्छ।

सामान्य सिफारिसहरू

UP400St अल्ट्रासोनिक्स प्रवाह रिएक्टर संगसनकरण सेल सेल निलम्बनको धेरै सानो, मध्यम र ठूलो मात्रा lysing को लागि सबैभन्दा लोकप्रिय प्रविधी हो – पिको-लीटरबाट 100L / घण्टासम्म (अल्ट्रासोनिक प्रवाह कक्ष प्रयोग गरी)। कक्षहरू तरल क्यान्सर र cavitation द्वारा lysed छन्। डीएनए पनि sonication को समयमा साझा गरेको छ, त्यसैले यो सेल निलम्बन गर्न DNase थप्न आवश्यक छैन।
तापमान नियन्त्रण:
नमूनालाई पूर्व-ठोक्दै र नमूनालाई बर्फमा लगाउँदा, नमूनाको नमूना थर्मल गिरावट सजिलै रोकिएको हुन सक्छ।
आदर्श रूप मा, नमूनाहरु लाई lysis को समयमा बरफ ठंड राखी जान सकिन्छ, तर तापमान को संस्कृति या ऊतक स्रोत को माथि माथि वृद्धि गर्दैन यदि अधिकांश नमूने को लागि पर्याप्त छ। त्यसैले यो सिफारिस गरिएको छ, बर्फमा निलम्बन राख्न र केही छोटो अल्ट्रासोनिक दालहरूको साथमा 5-10 सेकेन्डको साथमा राख्न र 10-30 सेकेन्डको रोकथाम। पजहरूमा, कम तापमान पुन: स्थापित गर्न गर्मी हटाउन सक्छ। ठूला सेल नमूनाहरूको लागि, ठंडा जैकेटहरूसँग विभिन्न प्रवाह कक्ष रिएक्टरहरू उपलब्ध छन्।

ई कोली लाइट्स को तैयारी को लागि प्रोटोकॉल

अभिव्यक्ति विश्लेषण र पुनःसंरचना प्रोटीन को शुद्धि

ई। कोको गोली एक अल्ट्रासोनिक प्रणाली संग sonicated थियो UP100H (हेलसिच)। यस उद्देश्यको लागि, सेल गोलीले ठुलो लिइस बफर (50 मिमी ट्रिस-एचएलसी पीएच = 7.5, 100 एमएम एनएलसी, 5 एमएम डीटीटी, 1 मिमी PMSF) मा resuspended गरिएको थियो र 10 मिनेटको लागि बर्फमा ठोक्किएको थियो। त्यसपछि, सेल निलम्बन 10 ठट्टा फटका साथ 10 को पछि ठोकाको लागि 30 को अन्तराल पछि सटेको थियो। अन्तमा, सेल मलबे अति अल्ट्राफ्रेजेशन द्वारा 4 डिग्री सेल्सियस सम्म 15 मिनेटको लागि 14000 rpm मा हटाइयो। आरपीपी अभिव्यक्तिको पुष्टिको लागि, अन्वेन्टन्ट 12% polyacrylamide जेलमा चल्ने र एसडीएस-पृष्ठ र पश्चिमी ब्लूटिङ द्वारा विश्लेषण गरिएको थियो। आरआरपी को शुद्धीकरण नी द्वारा प्रयोग गरिएको थियो2+निर्माताको मार्गदर्शकको अनुसार एनएनटी राल (निमन्त्रणा, यूएसए)। यस चरणमा, मूल शुद्धीकरण विधि प्रयोग गरिएको थियो। शुद्ध प्रोटीनको शुद्धता 12% polyacrylamide जेल र पछिल्ला कोमोसी ब्लू धुआनमा इलेक्ट्रोफोर्सिस प्रयोग गरेर मूल्याङ्कन गरिएको थियो। शुद्ध प्रोटीन एकाग्रता माइक्रो बीसीए प्रोटीन परख किट (PIERCE, USA) द्वारा मापन गरिएको थियो। (Azarnezhad एट अल 2016)

अल्ट्रासोनिक सेल डिप्प्लर UP100H (100W) lysis को लागि, सेल विच्छेद र डीएनए कतरनी।

अल्ट्रासोनिक homogenizer UP100H (100W)

सेल विकास, क्रसलिंकिंग र ई। कोलि सेल निकासी को तैयारी

SeqA र आरएनए पोलिमिरेज चिप-चिप ई कोली MG1655 वा MG1655 को लागि ΔseqA 37 डिग्री C600 50 मिलीलीटर एलबी (+ 0.2% ग्लुकोज) को लगभग 0.15 औपचारिकहाइड (37%) प्रति मिलीलीटर मध्यम (थप एकाग्रता 1%) थपिएको थियो। क्रसलिङ्किंग 20 मिनेट को लागि कम से कम मिलाएर (100 आरपीएम) कोठा को तापमान मा प्रदर्शन गरियो पछि 10 मिलीलीटर 2.5 एम ग्लाइसेन (अंतिम एकाग्रता 0.5 एम) संग घिमिरे। गर्मी-सदमे प्रयोगका लागि ई। कोली MG1655 65 मिलीलीटर एलबी माध्यममा 30 डिग्री सेल्सियसमा ओडीमा वृद्धि भएको थियो।600 लगभग 0.3। त्यसपछि संस्कृतिको 30 मिलीलीटर 43 डिग्री सेल्सियसमा पूर्व तापिएको फ्लास्कमा पठाइएको थियो र बाँकी 30 डिग्री सेल्सियसमा बाँकी थियो। क्रसलिङ्किङ र खारेज माथि उल्लेख गरिएको थियो बाहेक सेलहरू कोठाको तापमानमा हिँड्दा 5 मिनेटको लागि 30 वा 43 डिग्री सेल्सियसमा राखिएको थियो। सेलहरू सेन्टरफ्रेजेशन द्वारा एकत्रित गरियो र ठण्ड टीबीएस (पीएच 7.5) सँग दुई पटक धोइयो। 1 मिलीलीटर लिस बफर (10 एमएम ट्रिस (पीएच 8.0), 20% sucrose, 50 मिमी एनएमएल, 10 एमएम EDTA, 10 मिलीग्राम / मिलीलीटर लाइओजोजी) र 30 मिनेट को लागि 37 डिग्री सेल्सियस मा इन्सुलेशन पछि 4 मिलीलीटर आईपी को बहाव पछि बफर, सेलहरू 12 पटक 30 सेकेन्ड र 30 सेकेन्ड ब्रेकमा बर्फमा राखिएको थियो UP400St अल्ट्रासोनिक प्रोसेसर (हेलसेस्टर अल्ट्रासोनिक्स जीmbH) 100% बिजुलीको साथ। 9 0 जीमा 10 मिनेटको लागि सेन्टरफ्रेजेशन पछि, सर्भरटन्टको 800 μl aliquotes -20 डिग्री सेल्सियस भण्डारण गरियो। (Waldminghaus 2010)

एंजाइमको प्रवर्धन र शुद्धि।

Decahistidine (His10) को ओवर प्रजनन को लागि प्रोटीन, ई। Coli BL21 (DE3) को pET19b निर्माण संग बदल दिए थियो। एक रातभरको बागवानी सेन्टरफुगरेसन द्वारा खेती गरिएको थियो, र 1% अभिव्यक्ति संस्कृतिको आविष्कार गर्न प्रयोग गरिएको थियो। PET19mgtB लिने कोशिकाहरू 22 डिग्रीमा वृद्धि भएको थियो। अप्टिकल घनत्व 600 एनएम सम्म (ओडी600) को 0.7। यो संस्कृति 17 डिग्री सेल्सियस सम्म सारियो र 100 माइक्रोन आईपीटीजी द्वारा प्रेरित गरियो। 16 घन्टा पछि, सेन्टरफर्जेशन द्वारा 4, 4 डिग्री सेल्सियस मा संस्कृति को खेती गरिएको थियो। कोशिकाहरु पीएच 7.4 मा 0.3 एम NaCl को साथ 50 एमएम फास्फेट बफर वाला (पीबीएस) मा resuspended र एक S2 माइक्रो टिप सोनाट्रोड संग अल्ट्रासोनिकेशन द्वारा बाधित UP200St अल्ट्रासोनिकरेटर (हेलस्लेचर, टेलटो, जर्मनी) 0.5 को चक्र र 75% को एक आयाममा।
डिहाइस्टिडिड-ट्याग गरिएको GtfC को overproduction को ओडीडी मा 37 डिग्री सेल्सियस मा प्रेरित गरियो600 को 0.6 को 100 माइक्रोन आईपीटीजी संग। त्यसपछि कक्ष 4 घन्टा, काटिएको, र MgtB को लागि माथि उल्लेख गरिएको lysed को लागि incubated गरियो।
कच्चे कक्ष निकासी तल सेल मलबे को लागि 15,000 × जी र 4 डिग्री सेल्सियस मा centrifuged थिए। स्पष्ट निष्कर्षहरू ÄKTAprime प्लस प्रणाली (जीई हेल्थकेयर) को प्रयोग गरेर 1 मिलीलीटर हिटफैप एफएफ कोष स्तम्भहरूमा लोड भएको थियो। एंजाइमहरु उनको ट्याग प्रोटीन को ढाल एव्युटिभेशन को लागी निर्माता को प्रोटोकॉल को अनुसार शुद्ध गरियो। एल्यूमीनियम प्रोटीन समाधानहरु 1000 एमएम को 50 एमएम पीबीएस, पीएच 7.4 को विरुद्ध 0.3 डिग्री सेल्सियस मा 4 डिग्री सेल्सियस मा दोब्बर हो। शुद्धता 12% एसडीएस-पेज द्वारा विश्लेषण गरिएको थियो। रोटी-क्वाटर (कार्ल रोथ जीmbH, कार्ल्सुही, जर्मनी) को प्रयोग गरी प्रोडिनको एकाग्रता ब्राडफोर्ड विधि द्वारा निर्धारित गरिएको थियो। (Rabausch et al। 2013)

ई। कोलो ब्याक्टेरिया बाट प्रोटीन को निष्कर्ष
ब्याज को एक चारा प्रोटीन (यस मामला मा, Arabidopsis thaliana को एमटीवी 1) एक जीएसटी ट्याग संग fused र BL21 Escherichia कोली (ई। कोली) कोशिकाहरुमा व्यक्त गरेको छ।
1. GST-MTV1 र GST को एक गोली लिनुहोस् (50 मिलीलीटर ब्याक्टेरियल संस्कृति अनुसार) र प्रत्येक 2.5 मिलीलीटर बर्फको चिसो निकासी बफरमा पुन: प्रयत्न गर्नुहोस्।
2. अल्ट्रासोनिकरेटर प्रयोग गर्नुहोस् UP100H (MS3 माइक्रो्रोटिप-सोनोट्रोडको साथ सानो मात्रा (2-5 एमएल) को लागि ब्याक्टेरियल कोशिकाहरु लाई रोक्न को लागी लैजान नसक्ने सम्म लैजान सकिन्छ, जुन कम अस्पष्टता र चिपचिपापन बढेको हुन्छ। यो बर्फमा जान सकिन्छ, र यसलाई अन्तरालहरूमा सोचेको सिफारिस गरिन्छ (उदाहरणका लागि 10 सेकेन्ड हप्ताको पछि बर्फमा 10 सेकेण्ड पछि र)। हेरचाह अत्यन्तै उच्च तीव्रता संग ध्वनि लगाउन को लागी छैन। यदि फोमिंग वा सेतो साईकलको गठन पत्ता लगाइएको छ, तीव्रता कम गर्न आवश्यक छ।
3. lysed जीवाणु समाधान को 1.5 मिलीलीटर माइक्रोस्कोट्रिज ट्यूब र केन्द्रित केन्द्रक 4 मिनेट को लागि, 20 मिनेट को लागि 16,000 xg को स्थानांतरित गर्नुहोस।

E. coli मा एलिसनिक-संशोधित प्रोटीन

VialTweeter एक नमूना अल्ट्रासोनिक्स एक सानो नमूना homogenization को लागि हो5,5'-डिथियबिस (2-नाइट्रोबेन्जोजी एसिड) द्वारा सल्फहाइडल सामग्री को निर्धारण को निर्धारण (डीटीएनबी) परख
एक E. कोली MG1655 रातोरातको संस्कृति प्रयोग गरिएको थियो एमओपीएस न्यूनतम माध्यम (1: 100) लाई आवर्धन गर्न। संस्कृति एरोबिक हुन्थ्यो जबसम्म A600 को 0.4 सम्म पुग्यो। संस्कृतिको उपचारको लागि संस्कृति 15 15 मिलीलीटर संस्कृतिमा विभाजन गरिएको थियो। एक अप्रत्यक्ष संस्कृतिले नकारात्मक नियन्त्रणको रूपमा सेवा गर्यो। 0.79 एमएम allicin (128 μg मिलीलीटर-1) वा 1 एमएम डायनालाई बाँकी दुई संस्कृतहरूमध्ये प्रत्येकलाई थपिएको थियो। 15 मिनेटको लागि खेतहरू भत्काइयो। प्रत्येक संस्कृतिको 5 मिलीलीटर सेन्टरफ्रेजेशन (8,525 × जी, 4 डिग्री सेल्सियस, 10 मिनेट) द्वारा खेती गरिएको थियो। कक्षहरु पीबीएस को 1 मिलीलीटर (दुई लाख NaCl, 2.7 मिमी KCl, 10 मिमी एन संग दुई पल्ट धोए थिए2HPO4, 2 एमएम KH2PO4, पीएच 7.4, पहिले एनारोबायोटिक भण्डारण गरिएको छ) र केन्द्रित (13,000 × जी, 4 डिग्री सेल्सियस, 10 मिनेट)। कोशिकाहरु लाई lysis बफर (6 एमएम गुइनिडिनियम एचसीएल, पीएच 7.4 संग) पीडीएफ मा अचानक 4 डिग्री सेल्सियस मा अल्ट्रासोनिकेशन द्वारा रोकथाम मा resuspended (VialTweeter अल्ट्रासोनिक्स, हेल्सेचर जीmbH, जर्मनी) (3 × 1 मिनेट)। सेल मलबे centrifugation द्वारा pelleted (13,000 × जी, 4 डिग्री सेल्सियस, 15 मिनेट) थियो। चरनेटन्ट एक चुम्बकीय हलचल पट्टी संग 3.5 मिलीलीटर QS-macro cuvette (10 मिमी) लाई हस्तांतरित गरियो र लिस बफर को 1 मिलीलीटर संग मिलायो। नमूने को निकासी 412 एनएम मा कोठा को तापमान मा PSC-718 तापमान नियंत्रित सेल धारक (जोस्को) संग सुसज्जित Jasco V-650 स्पेक्ट्रोफोटोमीटर संग निगरानी गरिएको थियो। 3 एमएम डिथियबिसको 100μl (2-निट्रोबेन्जोजी एसिड) समाधान थपियो। यसलाई संतृप्ति सम्म पुग्न नसक्ने निगरानी गरियो। Thiol एकाग्रता गणना गणना विलुप्त गुणांक ε प्रयोग गरेर प्रदर्शन गरियो412 = 13,700 एम-1 cm-1 थियो-2-नाइट्रोबेंजोनिक एसिड (TNB) को लागि। सेलुलर थियोल सागरण गणना को मात्रा को आधार मा ई। को कोली कोशिकाहरु 6.7 × 10 को आधार मा बनाइयो-15 लीटर र ए सेलको घनत्व600 = 0.5 (1 × 10 को बराबर8 कोशिका एमएल-1 संस्कृति)। (मुलर र अल। 2016)

भिभ ग्लुथथिन निर्धारण मा

E.coli MG1655 एमओपीएस मा न्यूनतम मा 200ml को कुल मात्रामा ए ए सम्म पुग्यो600 को 0.5 पुग्यो। संस्कृतिको उपचारको लागि संस्कृति 50-मिलीलीटर संस्कृतिमा विभाजन गरिएको थियो। 0.79 एमएम एलिसिनिन, 1 एमएम डायमेड, वा डाइमेथाइल सल्फोक्साइड (नियन्त्रण) को 15 मिनेटको इन्चाइभेशन पछि, कोशिकाहरू 4,000 ग्राममा 4 डिग्री सेल्सियसमा 10 मिनेटको लागि काटिएको थियो। सेलहरू KPE बफरको 700μl मा छर्रों को पुनर्जन्च गर्नुअघि केपीई बफर संग दुई पटक धोएको थियो। गिरावटको लागि, 10 9% (w / v) को 300l (s / w) सल्फोस्लासिलिक एसिड अल्ट्रासोनिक द्वारा कोशिकाहरु को विघटन देखि पहिले (3 x 1 मिनेट; VialTweeter अल्ट्रासोनिकरेटर)। सेन्टरफेरेशन (30 मिनेट, 13,000 जी, 4 डिग्री सेल्सियस) पछि सुपरनेटरहरू एकत्रित थिए। केपीई बफरको 3 संस्करणहरूको थपमा सल्फोस्लासिलिक एसिड सागेशन्स 1% घट्यो। कुल glutathione र GSSG को माप माथि वर्णित रूपमा प्रदर्शन गरियो। सेल्युलर ग्लुटाथियो एकाग्रता गणना को मात्रा को आधार मा ई। को کولي कोशिकाओं को 6.7×10-15 लीटर र ए सेलको घनत्व600 0.5 (1 बराबर×108 कोशिका एमएल-1 संस्कृति)। GSH सांद्रता गणना 2 [GSSG] द्वारा कुल ग्लुथथिययनबाट गणना गरियो। (मुलर र अल। 2016)

सेल lysis को लागि अल्ट्रासोनिक डिप्प्लेक्टर र जैविक सामाग्री को निकालन (विस्तार गर्न को लागी!)

जांच प्रकार अल्ट्रासोनिकरेटर UP400St

ई। कोल मा मानव maspat को अभिव्यक्ति

इन्टर्रासेलुलर पदार्थ (जस्तै प्रोटीन, आयल, डीएनए, आरएनए आदि) को निकासी को लागि अल्ट्रासोनिक सेल डिप्प्लेटर UP400St (400W)30 को एलएलिया-बर्टानी (एलबी) मा मध्यम वर्ण 100 सेकेन्ड / एमएल एम्पिलिलिनमा अभिव्यक्ति वेक्टर बन्द गर्ने E. coli BL21 (DE3) को एक उपन्यास, र त्यसपछि 37 डिग्री सेल्सियसमा उजुरी घटेको हुँदा (ओडी)600) 0.6 सम्म पुग्यो। कोशिकाहरू सेन्टरफ्रेजेशनले 4 मिनेट × 10 मा 10 मिनेटको लागि खरिद गर्यो, र 3L ताजा एलबी माध्यममा 100μg / mL एम्पिलिलिन समावेश गर्दछ।
त्यसपछि, प्रोटीन अभिव्यक्ति 1 एमएम isopropyl β-ᴅ-1-thiogalactopyranoside (आईपीटीजी) 20 ℃ को 20 घन्टा को लागि प्रेरित गरिएको थियो। कोशिकाओं को उत्खनन द्वारा 8000 × जी 15 मिनेट को लागी बफर गरियो र बफर ए (20 मिमी NaH2PO4, 0.5 एम NaCl, पीएच 7.4) धोया। लगभग 45 ग्राम (गीलो वजन) कक्षहरू 3 एल संस्कृतिबाट प्राप्त भए। Centrifugation पछि, सेल छर्रों 40 मिलीलीटर (1 L संस्कृति को लागि) बर्फ ठंडा निष्कर्ष बफर ए, resuspended थियो, र आइस-शीत तापमान मा अल्ट्रासोनिकेशन द्वारा lysed UP400St साधन (डा। हेलस्लेचर जीmbH, जर्मनी)। सेल lysis घुलनशील (सतहमार्ग) र precipitated (गोली) अंश अलग 15 मिनेट को लागि 12,000 rpm मा centrifuged थियो। (जियांग एट अल 2015)

तलको तालिकाले तपाइँलाई हाम्रो अल्ट्रासोनिक्सको अनुमानित प्रकृया क्षमताको संकेत दिन्छ:

ब्याच मात्रा बग्ने गति सिफारिस गरिएका उपकरणहरू
0.5 देखि 1.5 एमएल na VialTweeter
1 देखि 500 ​​एमएल 10 देखि 200 एमएल / मिनेट UP100H
10 देखि 2000 एमएल 20 देखि 400 मिनेट / मिनट Uf200 ः टी, UP400St
0.1 देखि 20L 0.2 देखि 4 एल / मिनेट UIP2000hdT
10 देखि 100 एल 2 देखि 10 एल / मिनेट UIP4000
na 10 देखि 100 एल / मिनेट UIP16000
na ठूलो को क्लस्टर UIP16000

हामीलाई सम्पर्क गर्नुहोस! / हामीलाई सोध्नुहोस्!

यदि तपाई अल्ट्रासोनिक समोजनको बारे थप जानकारी अनुरोध गर्न चाहनुहुन्छ भने कृपया तल फारम प्रयोग गर्नुहोस्। हामी तपाईंलाई एक अल्ट्रासोनिक प्रणाली प्रस्ताव गर्न खुसी हुनुहुनेछ।









कृपया ध्यान दिनुहोस् गोपनीयता नीति


साहित्य / सन्दर्भ



तथ्यहरू थाह छ

E.coli

Escherichia कोली (ई। कोलो) एक ग्रामीण नकारात्मक, facultatively anaerobic, रड को आकार, क्रेन एस्क्रिरिचिया को coliform बैक्टीरिया छ कि सामान्यतया गर्म खून जीवित जीवहरु (endotherms) को कम आंत मा पाइन्छ। त्यहाँ धेरै विशेषताहरु छन् ई। को कोणीय स्ट्राइन (वा उपप्रकार) को एक ठूलो संख्या। प्रायः ई। को کولي स्ट्रेनहरू मानवहरूलाई हानिकारक हुन्छन्, उदाहरणका लागि बी र कश्मीर 12 उपभोगहरू जुन सामान्यतया प्रयोगशालामा अनुसन्धान अनुसन्धानका लागि प्रयोग गरिन्छ। तथापि, केही उपभोगहरू हानिकारक छन् र गम्भीर बीमारी हुन सक्छ।
ई। कोलो आधुनिक जैविक ईन्जिनियरिङ् र औद्योगिक सूक्ष्मजीवविज्ञान मा एक महत्वपूर्ण भूमिका निभािन्छ किनकी ब्याक्टेरिया हेरफेर गर्न आसान छ। साधारण ल्याब अनुप्रयोगहरू जुन प्रायः E. coli को प्रयोग समावेश गर्दछ, उदाहरणका लागि पुनःसंरचनात्मक deoxyribonucleic एसिड (डीएनए) सिर्जना गर्न वा एक मोडेल जीवको रूपमा कार्य गर्न।
ई कोलो को विषाणु प्रोटीन को उत्पादन को लागि एक बहुमुखी होस्ट हो, र ईथर को प्रोटीन अभिव्यक्ति प्रणाली ई। को کولي मा पुनः संयोजक प्रोटीन को उत्पादन गर्न उपलब्ध छ। प्लाज्माइडहरू प्रयोग गर्ने प्रोटीनको उच्च स्तर अभिव्यक्तिलाई अनुमति दिँदै, जीनहरू ब्याक्टेरियामा प्रस्तुत गर्न सकिन्छ, जसले औद्योगिक किण्वन प्रक्रियाहरूमा उच्च मात्रामा यस्तो प्रोटीन उत्पादन गर्न सक्छ।
ईकोलीलाई इन्सुलिन उत्पादन गर्न सेल कारखानाको रूपमा प्रयोग गरिन्छ। थप अनुप्रयोगहरूमा बायोफुलेहरू र साथै bioremediation को उत्पादन गर्न टीका र immobilized एंजाइमहरू विकास र उत्पादन गर्न परिमार्जित ई कोलो कोशिकाहरूको प्रयोग समावेश गर्दछ।
तनाव K-12 ई कोलो को एक उत्परिवर्ती रूप हो जो एंजाइम एल्किन फास्फेट (ए.ए.पी.) मा अधिक व्यक्त गर्दछ। यो उत्परिवर्तन निरन्तर एंजाइमको लागि कोड जीनमा दोषको कारण हुन्छ। यदि जीन कुनै पनि अवरोध बिना एक उत्पादन को उत्पादन गर्दछ यो विषम गतिविधि को रूप मा जानिन्छ। यो विशिष्ट उत्परिवर्ती रूप अलगाव र शुद्धि को लागि ALP एंजाइम को लागी प्रयोग गरिन्छ।

अल्ट्रासोनिक डीएनए सेयरिंग

अल्ट्रासोनिक क्यानर बलहरू सेलबाट अलग गर्न र टुक्राहरूमा डीएनए तारहरू तोड्न एक सामान्य प्रयोग गरिएको विधि हो। ध्वनिक cavitation कोशिका पर्खालहरु र झिल्लीहरु लाई कोशिकाओं देखि डीएनए निकालन को लागि र 600 को टुकडे उत्पन्न गर्दछ – 800 बी.पी. लम्बाई, जुन विश्लेषणको लागि उपयुक्त छ।
डीएनए विच्छेदनका लागि अल्ट्रासोनिक होमगेनसरहरू बारे थप जान्न यहाँ क्लिक गर्नुहोस्!