हिल्सचर अल्ट्रासाउन्ड टेक्नोलोजी

Sonication को साथ SARS-CoV-2 कोरोनाभाइरस निष्क्रियताको लागि प्रोटोकल

Hielscher VialTweeter एक अद्वितीय अल्ट्रासोनिक बहु नमूना तयारी एकाई हो, जुन कोरोनाभाइरस सार्स-सीओभी -२ लाई निष्क्रिय गर्न प्रयोग गरिन्छ। VialTweeter एकै साथ १० नमूना शीशहरू एकैसाथ तयार गर्न अनुमति दिन्छ र त्यहाँ सामूहिक नमूना प्रशोधनको लागि आदर्श एकाई हो।

SARS-CoV-2 कोरोनाभाइसको VialTweeter को निष्क्रियता

फिक्सेटिभ हटाएपछि, मोनोलेयरहरू फास्फेट-बफेर्ड सालिन (पीबीएस) को साथ तीन पटक धोइन्थ्यो सेल्स स्क्र्यापि before्ग गर्नुभन्दा पहिले १ एमएल एमईएम /%% एफबीएसमा र सोनिकेटेड (× × १० सेकेन्ड, १० सेकेन्ड १००% पावर र एम्प्लिट्यूड) हिल्सचर प्रयोग गरेर अल्ट्रासोनिक प्रोसेसर UP200St VialTweeter को साथ संलग्नक। सुपरनेट्सलाई १० मिनेटको लागि 000००० × g मा केन्द्रीपसार गरेर स्पष्ट गरियो। यहाँ सम्पूर्ण प्रोटोकल पढ्नुहोस् SARS-CoV-2 कोरोनाभाइरस निष्क्रियताको लागि वेल्च एट अल द्वारा। (२०२०) तल:

कक्षहरू र भाइरस

भेरो ई cells सेलहरू (भेरो सी १०० AT; एटीसीसी सीआरएल -१8686)) परिष्कृत ईगलको न्यूनतम आवश्यक माध्यम (MEM) लाई १०% (v / v) भ्रुण बाछो सीरम (FCS) सँग पूरक थियो। भाइरस प्रयोग गरिएको SARS-CoV-2 तनाव एचसीओवी -१ / / इ /्ल्यान्ड / २ / २०२० थियो, २ by/०१/२०२० मा युकेमा पहिलो बिरामी क्लस्टरबाट पीएचई द्वारा पृथक। यो भाइरस प्यासेज १ मा प्राप्त गरीएको थियो र प्यासेज २ वा at मा निष्क्रिय अध्ययनको लागि प्रयोग गरिएको थियो।
SARS-CoV-2 in निष्क्रियताका लागि प्रयोग गरिएको reagents र रसायनहरूको साथै अभिकर्ता cytotoxicity को हटानको लागि कृपया वेल्च एट अलको वैज्ञानिक रिपोर्ट हेर्नुहोस्। (२०२०)

The ultrasonic sample preparation unit VialTweeter is used for the inactivation of SARS-CoV-2 coronavirus

डिटर्जन्टहरू द्वारा भाइरस निष्क्रियता – SARS-CoV-2 कोरोनाभाइरस ईन्टिएभिएसन प्रोटोकल द्वारा वेल्च र अन्य। २०२०

SARS-CoV-2 निष्क्रियता

व्यावसायिक उत्पादनहरूको लागि, भाइरस तयारीहरू (टिश्यू कल्चर फ्लुइड, १ × १० सम्मका टाइटरहरू)6 १ × १० सम्म8 पीएफयू / एमएल) एकाग्रतामा अभिकर्मकहरू र प्रयोग समयका लागि निर्माणकर्ताहरूको निर्देशनहरूमा सिफारिस गरिएको सम्पर्क समयको लागि, वा उपलब्धतामा, वा प्रयोगशालाहरूको परीक्षणद्वारा अनुरोध गरिएको सघनता र समयका लागि सिफारिस गरिएको सम्पर्क समयको लागि तीन पटकमा व्यवहार गरियो। जहाँ एकाग्रताको दायरा निर्माताले दिएका थिए, नमूनाको उत्पादनको न्यूनतम अनुपात परीक्षण गरिएको थियो (जस्तै परीक्षण उत्पादको न्यूनतम सिफारिश गरिएको एकाग्रता)। नमूना यातायात ट्यूब अभिकर्मकहरू अभिकर्मकको दस खण्डहरूमा टिश्यु कल्चर फ्लुइडको एक खण्डको अनुपात प्रयोग गरेर परीक्षण गरिएको थियो, जबसम्म नमूना तरल पदार्थको मात्रा अनुपात अभिकर्मक द्वारा निर्दिष्ट गरिएको थिएन। डिटरजेन्ट्स, फिक्सेटिभ र सॉल्भन्टहरू संकेत गरिएको समयका लागि संकेत गरिएको सांद्रतामा परीक्षण गरिएका थिए। सबै निष्क्रियता चरणहरू परिवेश कोठाको तापक्रम (१ - - २° डिग्री सेल्सियस) मा गरिएको थियो। वैकल्पिक नमूना प्रकारहरूको परीक्षणको लागि, भाइरसलाई संकेत गरिएको नमूना म्याट्रिक्समा १: of को अनुपातमा स्पिक गरिएको थियो, त्यसपछि माथि परीक्षणको अभिकर्मकको साथ व्यवहार गरियो। सबै प्रयोगहरूमा परीक्षण अभिकर्मकको ठाउँमा पीबीएसको बराबर खण्डको साथ ट्रिपिलिकेट नियन्त्रण मक-उपचार नमूनाहरू समावेश थिए। तुरुन्तै आवश्यक सम्पर्क समयलाई अनुसरण गर्दै, उपचार गरिएको नमूनाको १mL उचित चयनित फिल्टरेशन म्याट्रिक्स प्रयोग गरेर प्रशोधन गरिएको थियो। निक्रियात्मक परीक्षणको लागि अभिकर्ता हटाउने काम पियर्स m एमएल डिटर्जेंट रिम्युवल स्पिन स्तम्भहरू (थर्मो फिशर) को प्रयोग गरेर वा खाली पियर्स १० एमएल क्षमता सेन्ट्रिफ्युज स्तम्भ (थर्मो फिशर) को साथ भरिएर एसएम २ बायो-मोती, सेपक्रिल एस-400०० एचआर वा सेफेडेक्स LH-20 4mL प्याक मोती / रेजिन दिन। एमिकान फिल्टरको प्रयोग गरेर शुद्धीकरणको लागि, २ ×००μl नमूनाहरू पहिले वर्णन गरिएको विधिको द्वारा दुई केन्द्रापसारक फिल्टरहरू प्रयोग गरेर शुद्ध पारिएको थियो, त्यसपछि सँगै जोडिएको थियो। ग्लुटाराल्डिहाइड हटाउनको साथ formaldehyde र formaldehyde को लागी, एक फिल्टर १ × 500μl नमूना भोल्यूमको साथ प्रयोग गरिएको थियो, 500 processingl PBS मा प्रसंस्करण पछि पुनः हटाइयो, र 400ul MEM / 5% FBS मा थपियो। संक्रमितको निष्क्रियताको लागि VialTweeter at the ultrasonic processor UP200STmonolayers, १२..5 सेन्टीमिटर2 भेरो E6 कक्षहरूको फ्लास्क (२.× × १०6 कक्षहरू / फ्लास्क २.m एमएल एमईएम /%% एफबीएस) MOI ०.०१ मा संक्रमित भए र ° 37 डिग्री सेल्सियस /%% सीओमा संकलित गरियो।2 २ hours घण्टाको लागि। सुपरनाटेन्ट हटाइयो, र कोषको तापमानमा १m वा min० मिनेटको लागि mmL formaldehyde, वा formaldehyde र glutaraldehyde को प्रयोग गरेर सेलहरू स्थिर गरियो। फिक्सेटिभ हटाइएको थियो, र मोनोलेयरहरू पीबीएससँग तीन पटक धोएपछि सेलहरू स्क्र्याप गर्नु अघि १ एमएल एमईएम /%% एफबीएस र सोनिकेटेड (× × १० सेकेन्डमा, १०० सेकेन्डमा १००% पावर र एम्प्लिट्यूडमा) वायालट्विटर एट्याच्मेन्ट (हिलस्चर अल्ट्रासाउन्ड) को साथ एक UP200St प्रयोग गर्दै। टेक्नोलोजी)। सुपरनेट्सलाई १० मिनेटको लागि 000००० × g मा केन्द्रीपसार गरेर स्पष्ट गरियो।

बन्द विलियम्स को द तीव्र सोनिकेशन को लागि VialTweeter

बन्द शीशाहरूको प्रबल Sonication को लागि VialTweeter

सूचना अनुरोध




हाम्रो नोट गर्नुहोस् गोपनीयता नीति


Various reagents have been tested for the inactivation of the SARS-CoV-2 coronavirus using the ultrasonic sample prep unit VialTweeter.

वेल्च एट अल द्वारा प्रोटोकल अनुसार अल्ट्रासोनिक VialTweeter संग SARS-CoV-2 कोरोनाभाइरस निष्क्रियताका लागि प्रयोग गरिएको अभिक्रेताको विवरण। २०२०

Hielscher VialTweeter को उपयोग सहित पूर्ण प्रोटोकल यहाँ पाउन सकिन्छ:
Welch, Stephen R.; Davies, Katherine A.; Buczkowski, Hubert; Hettiarachchi, Nipunadi; Green, Nicole; Arnold, Ulrike; Jones, Matthew; Hannah, Matthew J.; Evans, Reah; Burton, Christopher; Burton, Jane E.; Guiver, Malcolm; Cane, Patricia A.; Woodford, Neil; Bruce, Christine B.; Roberts, Allen D. G.; Killip, Marian J. (2020): Inactivation analysis of SARS-CoV-2 by specimen transport media, nucleic acid extraction reagents, detergents and fixatives. Journal of Clinical Microbiology. Accepted Manuscript Posted Online 24 August 2020.

The multi-sample ultrasonicator VialTweeter allows for simultaneous sample preparation of up to 10 vials under same process conditions. The VialTweeter is an established ultrasonic device used for the inactivation of corona virus SARS-CoV-2 (Click to enlarge!)

अल्ट्रासोनिक भाइरस निष्क्रियताको लागि VialTweeter

एक नजर मा VialTweeter को लाभ

  • एकै साथ १० शीश सम्म Sonication
  • कुनै पार संदूषण छैन
  • कुनै नमूना घाटा छैन
  • स्वचालित डेटा रेकर्डि।
  • अपरेट गर्न सजिलो र सुरक्षित
VialTweeter पनि को लागी प्रयोग गरीन्छ

  • सेल लिसिसन
  • भाइरल कण अवरोध
  • न्यूक्लिक एसिड निकासी: DNA / RNA अलग
  • DNA / RNA फ्रेगमेन्टन
  • Lysate solubilization
  • परिष्कृत अल्ट्रासोनिक डिसमेम्बेरेटर्स र सेल अवरोधकहरू

    मल्टि-नमूना अल्ट्रासोनिकेटर भियलट्विटर जैविक, जैविक रसायनिक र क्लिनिकल प्रयोगशालाहरूमा नमूना तयारीको लागि धेरै अल्ट्रासोनिक समाधानहरू मध्ये एक हो। हिलस्चर अल्ट्रासोनिक्सले तपाईको अनुप्रयोगको लागि आदर्श अल्ट्रासोनिक डिस्मेम्ब्रेटर प्रदान गर्दछ, जस्तै सेल लिइसिस, सेल एक्सट्र्यासन, टिशो होमोजेनाइजेशन, लाइसेट सोल्युबिलाइजेशन, विघटन, नमूना डीगस्सिing आदि।
    हामीलाई थाहा दिनुहोस् कि तपाईंले प्रति घण्टा र दिनमा कति नमूनाहरू प्रशोधन गर्नुपर्दछ, यदि तपाईं प्रत्यक्ष वा अप्रत्यक्ष Sonication रुचाउनुहुन्छ र अल्ट्रासोनिक नमूना उपचारको लक्ष्य के हो भने। हामी तपाईंलाई आफ्नो दैनिक कामको लागि सबैभन्दा उपयुक्त अल्ट्रासोनिक एकाइ सिफारिस गर्नेछौं!
    हिल्सचर अल्ट्रासोनिक्सको डिजिटल अल्ट्रासोनिक प्रोसेसर स्मार्ट सफ्टवेयर, स्वचालित डेटा रेकर्डि,, तापक्रम नियन्त्रणको लागि सजिलो पूर्व सेटिंग विकल्प, सोनिकेशन अवधि, चक्र / पल्स मोडका साथै नमूना रोशनी र ब्राउजर रिमोट कन्ट्रोलको साथ सुसज्जित छन्। हामी हाम्रो अल्ट्रासोनिक उपकरणहरूलाई सकेसम्म स्मार्ट बनाउन कोशिस गर्दछौं ताकि तपाईंको अनुसन्धान र कार्य तालिका सकेसम्म सुविधाजनक र सफल हुन सके।
    VialTweeter को साथ अल्ट्रासोनिक नमूना तयारी को प्रोटोकल सहित अधिक अनुप्रयोगहरु पाउन यहाँ क्लिक गर्नुहोस्!

    हामीलाई सम्पर्क गर्नुहोस! / हामीलाई सोध्नुहोस्!

    थप जानकारीको लागि सोध्नुहोस्

    कृपया तलको फारम प्रयोग गर्नुहोस् अल्ट्रासोनिक प्रोसेसर, अनुप्रयोग र मूल्य को बारे मा थप जानकारी अनुरोध गर्न। हामी तपाईंसँग तपाईंको प्रक्रियाको बारेमा छलफल गर्न र तपाईंको आवश्यकताहरू पूरा गर्ने अल्ट्रासोनिक प्रणाली प्रस्ताव गर्न खुशी हुनेछौं!









    कृपया ध्यान दिनुहोस् गोपनीयता नीति


    Ultrasonic high-shear homogenizers are used in lab, bench-top, pilot and industrial processing.

    हिलस्चर अल्ट्रासोनिक्स लेब, पाइलट र औद्योगिक मापनमा मिश्रण अनुप्रयोगहरू, फैलाव, पायसीकरण र निकासीको लागि उच्च प्रदर्शन अल्ट्रासोनिक होमोजिनाइजर बनाउँछ।

    साहित्य / सन्दर्भ



    तथ्यहरू थाह छ

    भेरो सेलहरू के हुन्?

    भेरो ई,, जसलाई भेरो सी १०० AT (एटीसीसी नं। सीआरएल -१868686) को रूपमा पनि चिनिन्छ भेरो from 76 बाट क्लोन सेल लाइन हो र सार्स-कोभ र सार्स-कोभ -२ कोरोनाभाइरसको अनुसन्धानमा प्रयोग भएको छ। भेरो सेलहरू सेल संस्कृतिहरूमा प्रयोग हुने सेलहरूको वंश हुन्। 'भेरो’ वंश एक अफ्रिकी हरियो बाँदर (क्लोरोसेबस एसपी।) बाट निकालेको मिर्गौला उपकला कोषहरूबाट पृथक गरिएको थियो।
    भेरो E6 कोषहरूले केहि सम्पर्क रोक्दछ, त्यसैले भाइरस प्रचार गर्न उपयुक्त छ जुन बिस्तारै प्रतिकृति हुन्छ। भेरो ई cell सेल लाइनहरू सामान्यतया कोरोनाभाइरस सार्स-कोभि र सार्स-कोभ -२ को साइरोपथोलोजी अनुसन्धान गर्न प्रयोग गरिन्छ भेरो सेलहरू (अफ्रिकी हरियो बाँदर किडनी कोषहरू) एंजियोटेंसिन-रूपान्तरण एन्जाइम २ (ACE2) रिसेप्टर्सको प्रचुर अभिव्यक्ति प्रदर्शन गर्दछ। ACE2 रिसेप्टर्स SARS-CoV-2 कोरोनाभाइरस को लागी एक प्रमुख डकिking साइट हो।
    उदाहरण को लागी, Ogando et al। (२०२०) फेला पर्‍यो कि SARS-CoV-2 – SARS-CoV को तुलनामा – इंट्रासेल्युलर भाइरल आरएनएको उच्च स्तर उत्पन्न गर्दछ, तर आश्चर्यजनक रूपमा लगभग -० गुणा कम संक्रामक भाइरल वंश संस्कृति माध्यमबाट पुनः प्राप्त गरियो। यसबाहेक, उनीहरूले निर्धारण गरे कि दुई भाइरसको संवेदनशीलता कोरोनाभाइरस प्रतिकृति (रेमडेसिभिर, एलिसपोरिभिर र क्लोरोक्वाइन) को तीन स्थापित इनहिबिटरहरूसँग धेरै मिल्दोजुल्दो छ, तर सार्स-कोभ -२ संक्रमण पेगिलेटेड इन्टरफेरनको साथ कोषहरूको पूर्व-उपचारको लागि बढी संवेदनशील थियो। अल्फा दुई भाइरस बीच एक महत्त्वपूर्ण भिन्नता तथ्य हो – भेरो E6 कक्षहरूमा पासिंगमा – सार्स-कोभ -२ स्पष्ट रूपमा यसको स्पाइक प्रोटीन जीनमा अनुकूलन म्यूटेशनहरू प्राप्त गर्न कडा चयन दबावमा छ। यी उत्परिवर्तनहरूले S1 र S2 डोमेनहरू जोड्ने यस क्षेत्रको एक पुट्याटिभ 'फुरिन-जस्तो क्लीभेज साइट' लाई परिवर्तन गर्दछ वा मेटाउदछ र फलस्वरूपको एस्सेजमा एक महत्त्वपूर्ण फेनोटाइपिक परिवर्तनको परिणाम दिन्छ।