हिल्सचर अल्ट्रासाउन्ड टेक्नोलोजी

Ultrasonication द्वारा BL21 कक्षहरूको सेल Lysis

BL21 कक्षहरू E. coli को एक तनाव हो जुन व्यापक रूपमा अनुसन्धान प्रयोगशालाहरू, जैव प्रौद्योगिकी र औद्योगिक उत्पादनमा प्रयोग गरिन्छ उनीहरूको क्षमता अत्यधिक कुशल प्रोटीन अभिव्यक्तिको कारण। अल्ट्रासोनिक सेल अवरोध, losis र प्रोटीन निकासी BL21 कोशिका सेलुलर भित्री देखि लक्षित प्रोटीन अलग गर्न र संकलन गर्न सामान्य विधि हो। अल्ट्रासोनिकेसनले सेललाई पूर्ण रूपले अवरूद्ध गर्दछ र सबै एन्क्रेड प्रोटीनहरू रिलिज गर्दछ, प्रोटिनको १००% उपलब्ध बनाउँदछ।

प्रोटीन अभिव्यक्तिको लागि BL21 कक्षहरू

E. coli bacteria such as BL21 cells are commonly lysed by ultrasonication in order to release expressed proteins, such as recombinant proteinsBL21 सेल एक रसायनिक रूपले सक्षम ई। कोलाई बैक्टीरिया स्ट्रैन्सन रूपान्तरण र उच्च स्तरको प्रोटीन अभिव्यक्तिको लागि उपयुक्त T7 RNA पोलीमरेज-IPTG प्रेरण प्रणाली प्रयोग गरेर। BL21 कक्षहरूले कुनै पनि जीनको उच्च-दक्षता प्रोटीन अभिव्यक्तिलाई अनुमति दिन्छ जुन T7 प्रमोटरको नियन्त्रणमा छ। ई। कोलाई तनाव BL21 (DE3) एक T7 आरएनए पोलीमरेज आधारित प्रोटीन उत्पादन तनाव हो, T7 प्रमोटर-आधारित अभिव्यक्ति भेक्टरको साथ संयोजन र प्रयोगशाला र उद्योगमा व्यापक रूपमा लागू हुन्छ पुनः संयोजक प्रोटीन उत्पादन गर्न। बीएल २१ (डीई)) मा, जीनको एन्कोडिंग पुनःबिनबिन प्रोटीनको अभिव्यक्ति क्रोमोसोमल एन्कोड गरिएको T7 आरएनए पोलीमेरेज (T7 RNAP) द्वारा लिखित हुन्छ, जुन परम्परागत E. कोलाई RNAP भन्दा आठ गुणा छिटो ट्रान्सक्रिप्ट गर्दछ। यो तनाव BL21 (DE3) अत्यधिक कुशल बनाउँछ र यसलाई एक सबै भन्दा मनपर्ने प्रोटीन अभिव्यक्ति कोशिका प्रणालीहरूमा परिवर्तन गर्दछ।

अल्ट्रासोनिक लीसीस र BL21 कक्षहरूबाट प्रोटीन निकासीको लागि प्रोटोकल

BL21 कोषहरूको सेल losis प्राय: सोडियम लौरोयल सारकोसिनेट (जसलाई सर्कोसिल पनि भनिन्छ) लाईसिस बफरको रूपमा संयोजनको साथ अल्ट्रासोनिकेसन प्रयोग गरेर गरिन्छ। अल्ट्रासोनिक सेल अवरोध र प्रोटीन निकासी को लाभ विश्वसनीयता, प्रजनन क्षमता को रूप मा साथै अल्ट्रासोनिकेटरहरु को सरल, सुरक्षित र द्रुत अपरेशन मा निहित। तलको प्रोटोकलले अल्ट्रासोनिक BL21 सेल lysis को लागी एक कदम पछि कदम दिन्छ।

Lysis को लागि जांच प्रकार को अपननेपाल UP200St

अल्ट्रासोनिक सेल बिघटनकर्ता UP200St माइक्रो-टिप S26d2 को साथ lysis र प्रोटीन निकासी को लागी

सूचना अनुरोध




हाम्रो नोट गर्नुहोस् गोपनीयता नीति


  • चेपेरोन प्रोटीनहरू हटाउन, BL21 ब्याक्टेरिया गोलीहरू आइस चिसो सोडियम ट्रीस-ईडीटीए (एसटीई) बफरको m० मिलीलीटरमा पुनः पुनःस्थापित गरियो (१० एमएम ट्राइस-एचसीएल, पीएच .0.०, १ एमएम ईडीटीए, १ m० एमएम एनसीएल १०० एमएमसँग पूरक) PMSF)।
  • , लाईसोोजाइमको ul०० उल (१० मिलीग्राम / एमएल) थपियो र कोषहरू १ ice मिनेटको लागि बरफमा इन्क्युबेटेड हुन्छन्।
  • पछि, डीटीटीको ul०० उल र सार्कोसिलको m मिलि (एसटीई बफरमा बनेको १०% (w / v) थपियो।
  • सबै शुद्धीकरण बफरहरू आइस-चिसो राख्न र बरफमा नमूनाहरू सबै समयमा कायम राख्न आवश्यक छ। सबै शुद्धीकरण चरणहरू सम्भव भए चिसो कोठामा गरिनु पर्छ।
  • VialTweeter at the ultrasonic processor UP200ST

  • अल्ट्रासोनिक lysis र प्रोटीन निकासी को लागी, नमूनाहरू Sonhet गरीन्छ VialTweeter मल्टि नमूना अल्ट्रासोनिकेटर x x sec० सेकेन्डको लागि १००% आयाममा प्रत्येक सोनिशनको बीचमा २ मिनेट अन्तराल। वैकल्पिक रूपमा, एक प्रोब-प्रकार अल्ट्रासोनिक homogenizer माइक्रो-टिप को साथ उदाहरण को लागी, Uf200 ः टी S26d2 (x x sec० सेकेन्ड, २ मिनेट। अल्ट्रासोनिक चक्रको बीच रोक्नुहोस्, %०% आयाम) प्रयोग गर्न सकिन्छ।
  • थप शुद्धिकरण चरणहरूका लागि, नमूनाहरू बरफमा राख्नुपर्दछ वा वैकल्पिक रूपमा -80० डिग्री सेल्सियसमा थप प्रक्रिया नभएसम्म राख्नुपर्दछ।

Prescise तापमान नियन्त्रण अन्तर्गत अल्ट्रासोनिक Lysis

जैविक नमूनाहरू ह्यान्डल गर्दा सटीक र भरपर्दो तापमान नियन्त्रण महत्त्वपूर्ण छ। उच्च तापक्रम नमूनाहरूमा तापीय प्रेरित प्रोटीन गिरावट शुरू गर्दछ।
सबै मेकानिकल नमूना तयारी प्रविधिको रूपमा, Sonication गर्मी सिर्जना गर्दछ। जहाँसम्म, VialTweeter प्रयोग गर्दा नमूनाको तापक्रम राम्रोसँग नियन्त्रण गर्न सकिन्छ। हामी तपाईलाई बिभिन्न विकल्पहरू प्रस्तुत गर्दछौं तपाईको नमूनाहरूको तापक्रम नियन्त्रण गर्न र नियन्त्रण गर्नको लागि तिनीहरूलाई विश्लेषणको लागि VialTweeter र VialPress सँग।

  1. नमूना तापमान अनुगमन: अल्ट्रासोनिक प्रोसेसर UP200St, जसले VialTweeter ड्राइभ गर्दछ, एक बुद्धिमान सफ्टवेयर र प्लगेबल तापमान सेन्सरले सुसज्जित छ। UP200St मा तापमान सेन्सर प्लग गर्नुहोस् र एउटा नमूना ट्यूबहरूमा तापमान सेन्सरको टिप घुसाउनुहोस्। डिजिटल र colored्गीन टच-डिस्प्ले मार्फत, तपाई UP200St को मेनुमा सेट गर्न सक्नुहुनेछ तपाईको नमूना Sonication को लागी एक विशिष्ट तापमान सीमा। अल्ट्रासोनिकेटर स्वत: रोकिनेछ जब अधिकतम तापमान पुग्यो र रोक्नुहोस् जबसम्म नमूना तापक्रम सेट तापमानको कम मानमा नपर्दछ ∆। त्यसपछि Sonication फेरि स्वत: सुरु हुन्छ। यो स्मार्ट सुविधा गर्मी प्रेरित गिरावट रोक्छ।
  2. VialTweeter ब्लक प्रि-कूल्ड गर्न सकिन्छ। VialTweeter ब्लक (ट्रान्सड्यूसर बिना मात्र Sonotrode!) फ्रिज वा फ्रीजर मा टायटानियम ब्लक राख्न पूर्व नमूना मा तापमान वृद्धि स्थगित गर्न मद्दत गर्दछ। यदि सम्भव छ भने, नमूना पनि प्रि-कूल्ड गर्न सकिन्छ।
  3. Sonication को समयमा चिसो सुक्खा बरफ प्रयोग गर्नुहोस्। सुक्खा बरफले भरिएको एउटा उथलो ट्रे प्रयोग गर्नुहोस् र बरफमा भायल्टवीटर राख्नुहोस् ताकि तातो चाँडै नै खस्कन सक्छ।

जैविक, जैव रसायनिक, चिकित्सा र क्लिनिकल प्रयोगशालाहरूमा दैनिक दैनिक नमूना तयारी कार्यको लागि ग्राहकहरूले विश्वव्यापी VialTweeter र VialPress प्रयोग गर्छन्। बुद्धिमान सफ्टवेयर र UP200St प्रोसेसरको तापमान नियन्त्रण, तापमान विश्वसनीयतापूर्वक नियन्त्रण र गर्मी-प्रेरित नमूना गिरावट हटाइएको छ। VialTweeter र VialPress साथ अल्ट्रासोनिक नमूना तयारी अत्यधिक विश्वसनीय र पुन: उत्पादन योग्य परिणाम प्रदान गर्दछ!

तपाइँको विश्लेषण अनुप्रयोगको लागि इष्टतम अल्ट्रासोनिक अवरोधक फेला पार्नुहोस्

Hielscher's industrial processors of the hdT series can be comfortable and user-friendly operated via browser remote control.हिलस्चर अल्ट्रासोनिक्स उच्च-प्रदर्शन अल्ट्रासोनिक सेल अवरोधकहरू र प्रयोगशालाहरू, बेन्च-टप र औद्योगिक स्केल प्रणालीहरूको लागि होमोजिनाइजर्सको लामो समयको अनुभवी निर्माता हो। तपाईंको ब्याक्टेरिया सेल संस्कृति आकार, तपाईंको अनुसन्धान वा उत्पादन लक्ष्य र सेलको मात्रा प्रति घण्टा वा दिनमा प्रक्रिया गर्नको लागि तपाईंको अनुप्रयोगको लागि सही अल्ट्रासोनिक सेल अवरोधक फेला पार्न आवश्यक कारकहरू हुन्।
हिल्सचर अल्ट्रासोनिक्सले बहु-नमूनाहरूको एकैसाथ Sonication (VialTweeter सँग १० शीशहरू सम्म) र मास नमूनेहरू (जस्तै, माइक्रोटीटर प्लेट्स / ELISA प्लेटहरू UIP400MTP सँग), साथै क्लासिक प्रोब-प्रकार प्रयोगशाला अल्ट्रासोनिकेटरको बिभिन्नसँग प्रस्ताव गर्दछ। levels० देखि 400०० वाट सम्मको पावर स्तर पूर्ण औद्योगिक इन्टरनेट अल्ट्रासोनिक प्रोसेसरसँग प्रति इकाई १ 16,००० वाटसम्म वाणिज्यिक सेल अवरोध र ठूलो उत्पादनमा प्रोटीन निकासीको लागि। सबै हिल्सचर अल्ट्रासोनिकेटरहरू २//7/ .65 operation पूर्ण लोडमा सञ्चालनका लागि निर्माण गरिएका छन्। मजबुतता र विश्वसनीयता हाम्रो अल्ट्रासोनिक उपकरणहरूको मुख्य सुविधाहरू हुन्।
सबै डिजिटल अल्ट्रासोनिक होमोजाइनाइजर स्मार्ट सफ्टवेयर, रंगीन टच डिस्प्ले र स्वचालित डेटा प्रोटोकलिंगले सुसज्जित छन्, जसले अल्ट्रासोनिक उपकरणलाई प्रयोगशाला र उत्पादन सुविधाहरूमा सुविधाजनक कार्य उपकरणको रूपमा गर्दछ।
हामीलाई थाहा दिनुहोस्, कस्तो प्रकारको सेलहरू, कुन खण्ड, कुन आवृत्तिसँग र कुन लक्ष्यसँग तपाईं आफ्नो जैविक नमूनाहरू प्रशोधन गर्न सक्नुहुन्छ। हामी तपाइँको प्रक्रिया को आवश्यकता को लागी सबैभन्दा उपयुक्त अल्ट्रासोनिक सेल बिघटनकर्ता सिफारिस गर्दछौं।

तलको तालिकाले कम्प्याक्ट ह्यान्ड होल्डोजेन्ड होमोजिनाइजर्स र मल्टि नमूना अल्ट्रासोनिकेटरहरूबाट व्यावसायिक अनुप्रयोगहरूको लागि औद्योगिक अल्ट्रासोनिक प्रोसेसरहरूमा हाम्रो अल्ट्रासोनिक प्रणालीहरूको अनुमानित प्रशोधन क्षमताको संकेत दिन्छ:

ब्याच मात्रा बग्ने गति सिफारिस गरिएका उपकरणहरू
---राम्रो / माइक्रोटिटर प्लेटहरू na UIP400MTP
१० शीशाहरू à ०. 1.5 देखि 1.5mL na UP200St मा वैलटाइमर
0.01 देखि 250mL To देखि १०० मिलि / मिनेट UP50H
0.01 बाट 500mL 10 देखि 200 एमएल / मिनेट UP100H
10 देखि 2000 एमएल 20 देखि 400 मिनेट / मिनट Uf200 ः टी, UP400St
0.1 देखि 20L 0.2 देखि 4 एल / मिनेट UIP2000hdT
10 देखि 100 एल 2 देखि 10 एल / मिनेट UIP4000hdT
na 10 देखि 100 एल / मिनेट UIP16000
na ठूलो को क्लस्टर UIP16000

हामीलाई सम्पर्क गर्नुहोस! / हामीलाई सोध्नुहोस्!

थप जानकारीको लागि सोध्नुहोस्

कृपया तलको फारम प्रयोग गर्नुहोस् अल्ट्रासोनिक प्रोसेसर, अनुप्रयोग र मूल्य को बारे मा थप जानकारी अनुरोध गर्न। हामी तपाईंसँग तपाईंको प्रक्रियाको बारेमा छलफल गर्न र तपाईंको आवश्यकताहरू पूरा गर्ने अल्ट्रासोनिक प्रणाली प्रस्ताव गर्न खुशी हुनेछौं!









कृपया ध्यान दिनुहोस् गोपनीयता नीति


Ultrasonicator UP200Ht with microtip S26d2 for ultrasonic lysis of biological samples

अल्ट्रासोनिकरेटर Uf200 ः टी साना नमूनाको Sonication को लागी २mm microtip S26d2 को साथ

साहित्य / सन्दर्भ



तथ्यहरू थाह छ

Escherichia कोली बैक्टीरिया

Escherichia कोलाई एक ब्याक्टेरिया प्रकार हो, कि गैर-बीजाणु-गठन, ग्राम नकारात्मक छ र यसको एक सीधा रॉडको रूप द्वारा विशेषता हो। E.coli ब्याक्टेरियाहरू वातावरण, खाद्य पदार्थ, र मानव र जनावरहरूको आंत्रमा छन्। ई। कोलाई प्राय: पेरिट्रिचस फ्लाजेला प्रयोग गरेर गतिशील हुन्छ, तर त्यहाँ नोमोटाइल प्रकार पनि हुन्छन्। इकोली तथाकथित फूहल्टिली एनाइरोबिक चेमोर्गनोट्रोफ जीवहरू हुन् जसको अर्थ तिनीहरू दुबै श्वास र किण्वनशील मेटाबोलिज्मको लागि सक्षम छन्। धेरै जसो ईकोली प्रकारहरू सौम्य र शरीरमा उपयोगी कार्यहरू पूरा गर्दछन्, उदाहरणका लागि हानिकारक ब्याक्टेरिया प्रजातिहरूको बृद्धिलाई दबाउन, भिटामिनहरू संश्लेषण आदि।
तथाकथित बी प्रकारको एशेरिचिया कोलि ब्याक्टेरिया सेल ईकोली स्ट्रिनको विशेष कोटी हो जुन ब्याक्टेरियोफेज संवेदनशीलता वा प्रतिबन्ध-संशोधन प्रणाली जस्ता संयन्त्रहरूको अनुसन्धान गर्न व्यापक रूपमा प्रयोग गरिन्छ। यसबाहेक, इकोली ब्याक्टेरियालाई बायोटेक्नोलजी र जीवन विज्ञान प्रयोगशालाहरूमा प्रोटीन अभिव्यक्तिका लागि भरपर्दो workhorse को रूपमा मूल्यवान छ। उदाहरण को लागी, E.coli औद्योगिक पैमाने मा प्रोटीन र ओलिगोसाक्राइड जस्ता यौगिकों synthesize गर्न प्रयोग गरीन्छ। प्रोटीज अभाव, ग्लुकोजको एक उच्च स्तरमा कम एसीटेट उत्पादन, र बृद्धि पारगम्यता जस्ता विशिष्ट सुविधाहरूको कारण, ई। कोलाई बी कोशिकाहरू प्रायः आनुवंशिक रूपमा इंजीनियर प्रोटीनहरूको उत्पादनको लागि होस्ट सेलहरू प्रयोग गरिन्छ।

पुनः संयोजक प्रोटीन

पुन: संयोजक प्रोटीन (आरप्रोट) रासायनिक उत्पादन, औषधि, कस्मेटिक, मानव र पशु चिकित्सा, कृषि, खाद्य साथै बेकार उपचार उद्योग लगायत, धेरै गुणा शाखाहरु मा महत्त्वपूर्ण महत्त्व प्राप्त गर्दै छन्।
पुनः संयोजक प्रोटीन को उत्पादन को एक अभिव्यक्ति प्रणाली को उपयोग को आवश्यकता छ। पुनः संयोजक डीएनए को उत्पादन को लागी कोशिका प्रणालीहरु व्यक्त को रूप मा, दुबै प्रोकारियोटिक र eukaryotic कोशाहरु प्रयोग गर्न सकिन्छ। जबकि ब्याक्टेरिया सेल प्रोटीन अभिव्यक्तिको लागि सबै भन्दा व्यापक रूपमा प्रयोग गरिन्छ कम कारक, सजिलो स्केलेबिलिटी र साधारण मिडिया सर्तहरू, स्तनपायी, खमीर, शैवाल, कीट र सेल-मुक्त प्रणाली स्थापना विकल्पको रूपमा। प्रोटीन प्रकार, कार्यात्मक गतिविधि, साथै व्यक्त प्रोटीनको आवश्यक उपजले प्रोटीन अभिव्यक्तिको लागि प्रयोग गरिएको सेल प्रणालीको चयनलाई प्रभाव पार्छ।
पुनः संयोजक प्रोटीन अभिव्यक्त गर्नका लागि, एक विशेष कक्षलाई DNA भेक्टरसँग ट्रान्सफक्ट हुनुपर्दछ जुन पुनः संयोजक डीएनएको टेम्प्लेट समावेश गर्दछ। सेलहरू टेम्प्लेटको साथ ट्रान्सफेक्ट गरियो भने सुसंस्कृत हुन्छन्। सेलुलर संयन्त्रको नतिजाको रूपमा, कोषहरूले ब्याख्याको प्रोटीन ट्रान्सक्रिप्ट र अनुवाद गर्दछ, यसैले लक्षित प्रोटीन उत्पादन गर्दछ।
जसरी व्यक्त प्रोटीन सेलुलर म्याट्रिक्समा संलग्न छन्, प्रोटीन रिलीज गर्न सेल लाईस (विघटन र बिग्रिएको) हुनुपर्दछ। एक पछि शुद्धिकरण चरणमा, प्रोटीन छुट्टिन्छ र शुद्ध हुन्छ।
उपचारमा प्रयोग गरिएको पहिलो पुनः संयोजक प्रोटीन १ 2 2२ मा पुनः संयोजक मानव इन्सुलिन थियो। आज, १ 170० भन्दा बढी प्रकारका पुनः संयोजक प्रोटीन विश्वभरि चिकित्सा उपचारका लागि उत्पादन गरिन्छ। सामान्यतया औषधीमा प्रयोग हुने पुनः संयोजक प्रोटिनहरू उदाहरणका लागि पुनः संयोजक हार्मोन, इन्टरफेरोन, इन्टरल्यूकिन, वृद्धि कारक, ट्यूमर नेक्रोसिस कारक, रगत जमाउने कारक, थ्रोम्बोलाइटिक ड्रग्स, र एन्जाइम जस्ता प्रमुख रोगहरू जस्तै मधुमेह, बौनापन, मायोकार्डियल इन्फेक्शन, कन्जेस्टिव हार्ट फेल्योर, सेरेब्रल एपोप्लेक्सी, मल्टिपल स्क्लेरोसिस, न्यूट्रोपेनिया, थ्रोम्बोसाइटोपेनिया, एनीमिया, हेपेटाइटिस, संधिशोथ, दम, क्रोन रोग, र क्यान्सर थेरापी। (cf. Phuc V. Pham, ओमिक्स टेक्नोलोजीहरू र बायो-ईन्जिनियरि ,्ग, २०१ 2018 मा)


Hielscher Ultrasonics supplies high-performance ultrasonic homogenizers from lab to industrial size.

उच्च प्रदर्शन अल्ट्रासोनिक्स! हिल्सचरको उत्पादन दायराले कम्प्याक्ट ल्याब अल्ट्रासोनिकेटरबाट बेन्च-शीर्ष इकाईहरूमा पूर्ण औद्योगिक अल्ट्रासोनिक प्रणालीहरूमा पूर्ण स्पेक्ट्रम कभर गर्दछ।